高 陽(yáng)，楊敏飛，蘇婭萍，霍雅玉，米 潔，王欣芮，尤曉娟，張海龍（西安交通大學(xué)藥學(xué)院，西安 710061）

老山芹（Heracleum dissectum）又名東北牛防風(fēng)、山芹菜、土當(dāng)歸，為傘形科（Umbelliferae）獨(dú)活屬多年生草本植物，主要分布在黑龍江、吉林和新疆等地。它是一種藥食兩用的植物，其幼嫩莖葉是美味的蔬菜，具有特殊的香味，深受當(dāng)?shù)厝说南矏?，莖葉中含有豐富的膳食纖維，可以促進(jìn)胃腸蠕動(dòng)，清理腸道垃圾。它具有顯著的降血壓作用以及降血脂、降血糖、祛風(fēng)、除濕、止痛等作用［1－2］，尤其是對(duì)高血壓病人具有顯著的降壓作用，而對(duì)正常人的血壓無任何影響。

獨(dú)活屬植物的分類及鑒定一直很混亂，其屬間和屬內(nèi)的劃分也一直是傘形科系統(tǒng)學(xué)研究的一大難題［3］，因此本研究通過對(duì)老山芹的化學(xué)成分的分析不但對(duì)獨(dú)活屬植物的分類具有重要的參考意義，同時(shí)鑒于老山芹的多種藥用活性，通過首次對(duì)老山芹根中親脂性化學(xué)成分的GC－MS分析，為今后系統(tǒng)分離鑒定老山芹的化學(xué)成分及進(jìn)一步闡明其活性成分具有一定的參考價(jià)值。

1 儀器與試藥

1.1 儀 器 日 本 島 津 （Shimadzu）公 司 GC－MS／QP2010氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用儀。

1.2 試藥 老山芹的根于2011年9月采自黑龍江省北安市，經(jīng)西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)部藥學(xué)院牛曉峰教授鑒定為傘形科獨(dú)活屬植物Heracleum dissectum Ledeb.的根。甲醇、石油醚、氯仿為分析純，乙酸乙酯為色譜純。

2 方法與結(jié)果

2.1 樣品的制備 取老山芹的干燥根4.0kg，剪成1～2cm的小段，甲醇回流提取3次，每次2h，合并提取液并減壓回收溶劑得到甲醇總提物，甲醇總提物分散于水中，先后用石油醚和氯仿分別萃取，得石油醚層68.3g，氯仿層85.1g。

2.2 GC－MS分析條件

2.2.1 石油醚部分 GC條件 RTX－5MS柱（30m×0.25mm，0.25μm）；柱溫：始溫150℃（保持5min），以8℃·min－1升溫至220℃，再以5℃·min－1升溫至280℃（保持15min），氣化溫度為280℃；分流比5∶1。

石油醚部分MS條件 EI離子源，電離能量70eV；離子源溫度200℃；接口溫度280℃；質(zhì)量掃描范圍50～600 m／z；溶劑峰切除時(shí)間0.5s，起測(cè)時(shí)間3.00min，結(jié)束時(shí)間40.75min；NIST147質(zhì)譜圖計(jì)算機(jī)檢索數(shù)據(jù)庫(kù)。

2.2.2 氯仿部分GC條件 色譜柱型號(hào)與石油醚部位相同；柱溫：始溫150℃，20℃·min－1升溫至230℃，1℃·min－1升溫至240℃，5℃·min－1升溫至250℃，最后8℃·min－1升溫至280℃（保持5min）；分流比10∶1。

氯仿部分MS條件 質(zhì)譜檢測(cè)起測(cè)時(shí)間3.00min，結(jié)束時(shí)間24.75min；其余條件均與石油醚部位相同。

2.3 結(jié)果 對(duì)老山芹的石油醚部分和氯仿部分的總離子流圖中各峰分別經(jīng)質(zhì)譜掃描后得到質(zhì)譜圖，通過NIST147質(zhì)譜圖計(jì)算機(jī)檢索數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，鑒定出石油醚部分19個(gè)化合物，氯仿部分14個(gè)化合物，按面積歸一化法計(jì)算各化合物的相對(duì)百分含量。結(jié)果分別見圖1和圖2及表1和表2。

圖1 石油醚層的總離子流圖Fig.1 Total ion chromatogram of petroleum ether fraction

圖2 氯仿層的總離子流圖Fig.2 Total ion chromatogram of chloroform fraction

表1 石油醚層親脂性化學(xué)成分分析結(jié)果Tab.1 Results of the petroleum ether fraction in the roots of Heracleum dissectum

3 討論

老山芹根的GC－MS分析結(jié)果表明，石油醚層中甾體類（谷甾醇，豆甾醇及其衍生物及6β，6β－二溴－6，7－亞甲基睪丸激素）化合物的含量為主要成分，占52.86%，香豆素類化合物為第二大成分，含量共32.78%，其他的長(zhǎng)鏈烷醇、烯、烯醇及酯含量共9.75%，此外還有0.84%的薁類化合物以及1.99%的三環(huán)衍生物等。氯仿部分的14個(gè)化合物中絕大多數(shù)為香豆素類化合物，其含量高達(dá)54.14%。從兩部分的分析結(jié)果可以看出，老山芹根中尤其是氯仿層的親脂性成分主要是香豆素類化合物。

香豆素類化合物具有多種多樣的生物活性，如：抗 病 毒 及 抗 HIV 活 性［4－7］，抗 菌 和 抗 寄 生 蟲 活性［8－11］，抗癌活性［12－15］，抗炎和抗氧化活性［16－18］，以及抗糖尿病和抗高血壓活性［19－21］等。老山芹發(fā)揮降壓作用的物質(zhì)基礎(chǔ)可能就是其中所含有的香豆素類化合物，為驗(yàn)證這一推測(cè)和闡明其中的降壓活性成分，系統(tǒng)的化學(xué)成分研究和降壓活性研究正在進(jìn)行。

表2 氯仿部分化學(xué)成分分析結(jié)果Tab.2 Results of the chloroform fraction in the roots of Heracleum dissectum

市面上獨(dú)活品種很多，主要來自傘形科當(dāng)歸屬和獨(dú)活屬植物，而這2個(gè)屬的主要化學(xué)成分為香豆素類，目前已經(jīng)從不同品種的獨(dú)活中分離得到的香豆素類化合物達(dá)70多種［22－23］。通過 GC－MS分析得知，老山芹根中的化學(xué)成分絕大多數(shù)為香豆素類化合物，這不僅為老山芹的歸屬提供了依據(jù)，同時(shí)也為老山芹的開發(fā)利用奠定了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

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