劉軍鋒 華 瑛 王紅波 王曉萍 李富賢 劉建峰 陜西省中醫(yī)醫(yī)院（西安710003）

△陜西省腫瘤醫(yī)院（西安710065）

痰飲膏原劑型為黑膏藥，是本院使用幾十年的醫(yī)院制劑。采用傳統(tǒng)冬病夏治方法，貼于肺俞穴，治療習慣性哮喘。臨床療效顯著。由于黑膏藥劑型制備工藝上存在諸多不足，如：加有黃丹，含有對人體有害的鉛元素；植物油提取藥物成分不完全，高溫提取，熬煉，有效成分容易分解破壞；對環(huán)境及衣物造成污染等，黑膏藥已不如許多現(xiàn)代新技術(shù)制備的透皮吸收制劑應(yīng)用廣泛。為克服以上不足，提高臨床療效，本研究對痰飲膏（黑膏藥）劑型、提取制備工藝等方面進行改進，制備成具有現(xiàn)代制劑要求的透皮給藥的貼膏劑，滿足臨床用藥的需要。

1 劑型的選擇為了改善痰飲膏在制備工藝、使用、環(huán)境等方面存在的不足，并保持外用制劑的特點［1］，擬改制成經(jīng)皮吸收貼膏劑。

1.1 痰飲膏原制備工藝 處方全部藥材—植物油提?。ㄕㄋ?20℃）—煉油（320℃）—下丹成膏—去火毒—灘涂。特點：破壞成分，工序長，環(huán)境污染嚴重。

1.2 現(xiàn)代貼膏劑工藝路線 藥材—提取（油水雙提法）—揮發(fā)油＋干浸膏粉（100目）＋基質(zhì)—混勻—制成薄片狀貼膏劑。特點：最大限度保留各藥材有效成分，工藝簡單，現(xiàn)代化程度高，無污染。

2 提取工藝條件優(yōu)選

2.1 揮發(fā)油提取 肉桂、干姜等五味藥，有效成分主要為揮發(fā)油等，采用油水雙提法，先提取揮發(fā)油，再將藥渣并入水煎部分共提。提取出的揮發(fā)油既是藥物有效成分，又是貼劑透皮吸收促進劑，一舉兩得。

2.1.1 藥材吸水率試驗：按照處方比例，取肉桂等五味混合藥材60g，加水600mL，浸泡過夜，濾過，濾液460mL，求得藥材吸水率為230%。

2.1.2 揮發(fā)油工藝考察：影響揮發(fā)油提取的因素有加水量、浸泡時間、提取時間等，根據(jù)水蒸氣蒸餾原理，加水量影響較小，所以加水淹沒藥材一定量即可。再加之揮發(fā)油提取時間較長，浸泡或不浸泡影響不大，所以提取時間是影響揮發(fā)油提取的主要因素。所以采用單因素（提取時間）對照考察揮發(fā)油提取工藝。結(jié)果見表1。

表1 揮發(fā)油提取考察結(jié)果

從上述實驗可知：揮發(fā)油提取量與加水量關(guān)系不大，8倍、10倍、12倍提取量（7h）分別為1.95、1.94、1.95，平均1.947mL；而提取時間影響較大，隨著提取時間的增長，累積量增大，但5h后，增加不明顯。提取5h后的提取率為提取總量的98.09%，說明5h后基本提取完全。所以揮發(fā)油提取工藝確定為：藥材加水量為12倍量，連續(xù)提取5h，分取揮發(fā)油，備用。蒸餾后的水溶液濾過，收集濾液，藥渣并入川烏、附子，再加水共煎。

2.2 水煎提取 影響水煎因素有藥材粒度、加水量、煎煮時間、煎煮次數(shù)等。由于藥廠生產(chǎn)多使用多功能提取罐，壓力較大，多半用中藥飲片，所以我們選加水量、煎煮時間、煎煮次數(shù)為主要因素，各設(shè)置三水平進行正交實驗，以生物堿含量、干浸膏得率為指標綜合優(yōu)選水煎提取最佳工藝。

2.2.1 藥材吸水率實驗：按各處方比例，取川烏、附子各24g，加水200mL，浸泡過夜，濾過，濾液115mL，求得藥材吸水率為177%。

2.2.2 因素水平表及正交表選擇

表2 煎煮工藝條件正交試驗因素水平表

三因素三水平，不考慮交互作用，故選擇L9（34）正交表進行正交試驗，見表2。

2.2.3 試驗方法、結(jié)果及分析：按處方比例稱取附子、川烏、肉桂等七味混合藥材，共9份，隨機編成①～⑨號，按L9（34）正交表安排試驗，提取液濾過，定容。

干浸膏制備［2］取上述1～9號實驗中各提取液250mL，離心（3800轉(zhuǎn)∕ min）30min，精密量取上清液100mL，分別置于已恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上濃縮至干，105℃下干燥3h，取出，置干燥器中放置30min，稱定重量，計算出膏率，見表3。

生物堿含量測定［3、4、5］）分別精密量取1～9號離心后上清液若干毫升（相當于5g藥材），濃縮定容至50mL，用0.1mol/L 鹽酸調(diào) pH2.00，用乙醚萃取3次，每次20mL，除去雜質(zhì)。酸液加氨水調(diào)pH9.00，再用乙醚萃取3次（25，20，15mL），合并乙醚萃取液，回收乙醚至近干，揮干溶劑。殘渣加乙醇5mL溶解。精密加入硫酸滴定液（0.01mol/L）10mL，水10mL與甲基紅指示液2滴，用氫氧化鈉滴定液（0.02075mol/L）滴定至黃色。以乙醇5mL做空白對照。按下式計算總生物堿的含量（g/g）（見表3）。

公式中：C為氫氧化鈉滴定液摩爾濃度；V0為空白消耗氫氧化鈉滴定液毫升數(shù)；V為供試液消耗氫氧化鈉滴定液毫升數(shù)；645為烏頭堿（C34H47NO11）的分子量

表3 水提正交試驗表

對干浸膏得率與總生物堿含量進行方差分析，結(jié)果如下（見表4與5）。

表4 水煎結(jié)果方差分析（干浸膏）

表5 水煎結(jié)果方差分析（總生物堿）

由直觀分析表3可知，影響提取效果（干浸膏及總生物堿）因素順序為提取次數(shù)（C）＞加水量（A）＞提取時間（B），以提取次數(shù)最大；經(jīng)方差分析表（表4、5），C因素（提取次數(shù)）影響較大，A、B因素（加水量、提取時間）影響不大，考慮到大生產(chǎn)節(jié)約能源，選定提取最佳組合為A3B2C3。因此，確定的最佳工藝為生川烏生附子水煎提取3次，第一次加水12倍，煎煮2h，第二次并入提取揮發(fā)油后的藥渣、再煎兩次，每次加水10倍，煎煮1.5h。

合并各濾液（包括提取揮發(fā)油后的濾液）、低壓濃縮干燥、粉碎成細粉，備用。

2.3 提取工藝驗證試驗 取三份樣品，按上述所確定工藝進行試驗，結(jié)果見表6。

表6 提取工藝驗證

從驗證結(jié)果看，干浸膏得率與正交試驗最高值（33.56）基本持平，總生物堿含量略高于正交試驗最高值7（0.448%），說明選擇工藝科學、合理，可用于大生產(chǎn)。

3 成型工藝將上述提取的揮發(fā)油，干膏粉與一定量植物油、壓敏膠等基質(zhì)混合均勻，制成膏片，貼于帶膠層的無紡布上，蓋以防粘紙，即成。每片2g，相當生藥5g。

4 討 論提取揮發(fā)油，揮發(fā)油不僅能刺激穴位發(fā)熱，且在外用經(jīng)皮制劑中具有較好的透氣促進作用。提取揮發(fā)油加入制劑中，藥物成分透過皮膚角質(zhì)層進入血液循環(huán)的速度更快。生川烏和生附子為本制劑主藥，主要成分為生物堿，既是有毒成分，又是有效成分，通過長時間的煎煮，把毒性大的雙酯生物堿，水解成毒性小的單酯生物堿或原堿。制劑中烏頭堿的檢查試驗進一步證明臨床使用的安全性。

［1］李西林，沈紅藝，徐蓮英，等，中藥穴位敷貼透皮給藥的研究概況［J］.上海中醫(yī)學雜志，2001，4（1）：47.

［2］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典2010年版一部［M］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：25.

［3］張兆旺，孫秀梅，尉小慧，等，川烏2種方法提取液的成分比較［J］.中成藥，1999，21（1）：5－7.

［4］祝 林，奉建芳.附子總生物堿含量測定方法比較［J］.現(xiàn)代中藥研究與實踐，2003，17（6）：20.

［5］劉 芳，于向紅，李 飛，等，HPLC測定附子及其炮制品中3種雙酯型生物堿的含量［J］.中國中藥雜志，2006，31（4）：160.