褚亞宇 肖敏佳 谷世喆 劉清國 王朝陽

北京中醫(yī)藥大學針灸推拿學院（北京100029）

捻轉(zhuǎn)補瀉手法作為針刺基本補瀉手法之一，是臨床應用最廣，也是學者爭論最多的一種針刺手法。關于捻轉(zhuǎn)補瀉手法的定義，陸壽康編著的針灸教材中規(guī)定：拇指向前左轉(zhuǎn)用力為補，拇指向后右轉(zhuǎn)用力為瀉［1］，認為捻轉(zhuǎn)補瀉手法主要與捻轉(zhuǎn)方向及捻轉(zhuǎn)力度相關。諸多臨床及實驗研究證明，補瀉手法的療效是客觀存在的［2］［3］。捻轉(zhuǎn)力度的不同，可直接導致補瀉效應的差異［4－6］；至于捻轉(zhuǎn)方向是否與捻轉(zhuǎn)補瀉手法直接相關，以往的臨床及實驗研究甚少。本實驗采用放血加限食法復制血虛證動物模型，觀察左右利手不同捻轉(zhuǎn)方向?qū)ρ撟C大鼠Hb、RETIC%的影響，探討捻轉(zhuǎn)補瀉手法與具體捻轉(zhuǎn)方向間的關系。

1 材料與方法1.1 實驗動物 Wistar大鼠（SPF級）80只，雄性，體重180～200g，由北京維通利華動物中心提供（許可證號：SCXK（京）2012－0001）。北京中醫(yī)藥大學提供標準實驗室與動物房，室溫為22℃～23℃，濕度40%～50%，自由飲食。

1.2 主要試劑及儀器 德國 Greiner非可替0.5mL及2mL真空采血管（購于北京康暉煜生物科技有限公司）。

直徑0.25mm、長13mm毫針（天津華鴻醫(yī)材有限公司制）；XE－5000型全自動血細胞分析儀（日本sysmex公司制）；電子稱（北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司制）；1N圓筒測力計（余姚市低塘街道輝旺塑料模具廠制）；自制針具：自制5mm寬紙條固定于針體上端，紙條顏色前面紅色，后面綠色，控制捻轉(zhuǎn)幅度及捻轉(zhuǎn)深度。

1.3 分組與造模 購置大鼠后，常規(guī)飼養(yǎng)3d，待適應環(huán)境后，根據(jù)隨機數(shù)字表，將購置大鼠隨機分為7組：A組（10只），B組（10 只），C 組（12只），D 組（12只），E 組（12 只），F(xiàn) 組（12只），G組（12只），后5組統(tǒng)稱為治療組。除A組外，其余6組均采用放血加限食法制成血虛證動物模型［7］：以75%酒精擦拭鼠尾，待尾部血管充血后，剪斷距尾尖，長度為2～3mm，隔日1次，每只每次放血約1.5mL，共計5次。自造模之日起改變正常喂養(yǎng)規(guī)律，半量與足量飲食隔日交替給予。制成的血虛證大鼠外觀精神萎靡、毛枯蓬松、唇色淡白、食欲下降、體重減輕，外周血紅細胞計數(shù)及血紅蛋白含量降低達20%以上。

1.4 取穴 大鼠“足三里”穴［8］：膝關節(jié)后外側(cè)，約腓骨小頭下5mm。

1.5 各組處置方法 治療前，將大鼠裝入自制的布袋中固定，充分暴露治療穴位。造模完成后第2天開始針刺，隔日1次，共計10次。

A組：不進行任何處理，正常同步喂養(yǎng)。

B組：僅造模，不針刺治療，與各針刺組同步捆綁固定，每次20min。

C組：造模后針刺大鼠雙側(cè)“足三里”，刺入5mm，留針20min，不行補瀉手法。

D組：右利手操作，造模后針刺大鼠雙側(cè)“足三里”，進針后，按預先錄制好的操作口令操作：右手前捻時用力重，力度約0.08N（彈簧測力計測得），還原力輕，捻轉(zhuǎn)幅度360°/次（用自制紙條不同的顏色控制轉(zhuǎn)動幅度），捻轉(zhuǎn)頻率60次/min（機械鬧鐘每秒響4次，規(guī)定捻轉(zhuǎn)頻率與機械鬧鐘一致：前捻耗時0.25s，停頓用時0.5s，還原用時0.25s），捻轉(zhuǎn)深度控制在5～8mm（自制紙條固定了捻轉(zhuǎn)深度），每側(cè)做1min×2次手法，剩余時間留針，共20min。

E組：右利手操作，右手后捻用力重，還原力輕，捻轉(zhuǎn)力度、幅度、深度同右手前捻組，捻轉(zhuǎn)頻率規(guī)定：后捻耗時0.25s，停頓用時0.5s，還原用時0.25s。

F組：左利手操作，左手前捻用力重，還原力輕，捻轉(zhuǎn)幅度、力度、深度及頻率同右手前捻組。

G組：左利手操作，左手后捻用力重，還原力輕，其余操作同右手后捻組。

1.6 檢測指標 分別在治療前1d、治療第7天、14天、21天，檢測大鼠血液中Hb及RETIC%。每次剪去大鼠尾部約1mm，每只每次取血0.2mL，輕搖以確保無凝血及溶血，4h內(nèi)送檢。

1.7 統(tǒng)計學處理 應用SPSS17.0統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計學處理，各組數(shù)據(jù)均采用均數(shù)加減標準差（±s）的形式表示，2組間比較用t檢驗，多組比較用ANOVA方差分析或者 Welch＇s ANOVA方差分析，組間兩兩比較用SNK檢驗，以P＜0.05作為具有顯著性差異的標準，以P＜0.01作為具有極顯著性差異的標準。

2 結(jié) 果2.1 不同治療時間點各組大鼠Hb值的比較針刺處理前，與A組相比，其余6組大鼠外周血中Hb值明顯降低，差異顯著（P＜0.01），說明造模成功；此外，B、C、D、E、F、G各組組間比較，各組間無顯著性差異（P＞0.05），說明這6組均衡可比。

針刺治療第7d，C、D、E、F、G這5組Hb值明顯高于B組，有統(tǒng)計學差異（P＜0.05），此外，A、B、C、D、E、F、G各組組間比較，C、D、F組3組之間差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），A、E、G3組之間差異不明顯（P＞0.05），但前3組Hb含量顯著高于后3組（P＜0.05）。

針刺治療第14d，A組Hb值低于其余6組，有統(tǒng)計學差異（P＜0.05），但B、C、D、E、F、G各組組間比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。結(jié)果見圖1。

2.2 不同治療時間點各組大鼠RETIC%的比較 針刺處理前，與A組相比，其余6組大鼠RETIC%明顯升高，差異顯著（P＜0.01）；此外，B、C、D、E、F、G各組組間比較，各組間無顯著性差異（P＞0.05），說明這6組均衡可比。

針刺治療第7d、14d、21d，各組大鼠RETIC%均無統(tǒng)計學差異（P＞0.05）。

圖1 不同治療時間點各組大鼠Hb值的比較

圖2 不同治療時間點各組大鼠RETIC%的比較

3 討 論中醫(yī)血虛證的現(xiàn)代研究中，往往將其與現(xiàn)代醫(yī)學的“貧血”相對稱，貧血的診斷主要依靠外周血的血紅蛋白（Hb）及網(wǎng)織紅細胞百分率（RETIC%）檢測。本研究中，通過觀察左右利手不同捻轉(zhuǎn)方向?qū)ρ撟C模型大鼠Hb、RETIC%的效應差異，探討捻轉(zhuǎn)補瀉手法與捻轉(zhuǎn)方向的關系。

在本實驗中，對于大鼠Hb的檢測，發(fā)現(xiàn)在針刺治療第7d，各組差異最敏感：與模型組相比，留針組、右手前捻組、右手后捻組、左手前捻組、左手后捻組大鼠 Hb均明顯升高（P＜0.05），說明了針刺手法的有效性及其良性調(diào)節(jié)作用。同時，留針組、右手前捻組、左手前捻組三組大鼠Hb變化無明顯差異（P＞0.05），右手后捻組、左手后捻組兩組大鼠Hb變化不明顯（P＞0.05），但前三組大鼠 Hb含量高于后兩組（P＜0.05），說明捻轉(zhuǎn)補瀉手法與左右捻針方向無關，無論何手持針，只要是拇指前捻用力效應一致，則為“補”；拇指后捻用力效應一致，即為“瀉”。

此外，對于RETIC%的檢測，除了造模結(jié)束后，各造模組大鼠RETIC%明顯升高外，其余各時間段檢測，各組同空白組相比，無論針刺與否，差異均無統(tǒng)計學差異（P＞0.05）。說明因單純失血所致的血虛證，對骨髓的造血機能的影響較小。

綜上所述，針刺對機體有良性調(diào)整作用，在虛證的情況下，無論行“補法”還是“瀉法”，針刺治療均可促進機體恢復。但是，捻轉(zhuǎn)補法與捻轉(zhuǎn)瀉法還是存在明顯的效應差異，“補法”優(yōu)于“瀉法”。此外，捻轉(zhuǎn)補瀉的方向需要建立統(tǒng)一的標準：拇指前捻用力為“補”，拇指后捻用力為“瀉”，與具體向左或者向右水平方向無關。

［1］陸壽康.刺法灸法學［M］.第2版.北京：中國中醫(yī)藥出版社，2007：70.

［2］支建梅，王朝陽，王 麗，等.不同刺激量捻轉(zhuǎn)補瀉手法對應激性高血壓大鼠頸交感神經(jīng)放電的影響［J］.中醫(yī)雜志，2009，50（9）：811－813.

［3］陳 中.太沖穴針刺捻轉(zhuǎn)瀉法對原發(fā)性高血壓即刻效應影響的臨床研究 ［D］.北京：北京中醫(yī)藥大學針灸推拿學院，2013.

［4］張露芬.實驗針灸學［M］.北京：化學工業(yè)出版社，2010：81－84.

［5］張月.捻轉(zhuǎn)補瀉手法對自發(fā)性高血壓大鼠心肌p38/MAPK信號轉(zhuǎn)導通路影響的機制研究 ［D］.北京：北京中醫(yī)藥大學針灸推拿學院，2013.

［6］睢明河，周宇姝，馬文珠，等.大小刺激量捻轉(zhuǎn)補瀉法對血虛證大鼠紅細胞計數(shù)的影響［J］.針刺研究，2004，29（3）：213－216.

［7］苗明三，方曉艷，孫艷紅.血虛動物模型復制的思考［J］.光明中醫(yī)，2003，18（10）：8－9.

［8］王 芳.石氏捻轉(zhuǎn)補瀉手法對健康小鼠“足三里”穴位局部及遠端能量代謝相關酶類影響的實驗研究 ［D］.天津：天津中醫(yī)學院，2001：5.