葉 青，尹偉利，王鳳梅，李 寧

(天津市第三中心醫(yī)院，天津300170)

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是一類(lèi)以肝細(xì)胞脂肪變性和脂肪貯積為病理特征的臨床綜合征，包括非酒精性單純性脂肪肝(NAFL)、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)及脂肪性肝硬化［1、2］。NAFLD 的發(fā)生是多因素作用的結(jié)果，涉及到多個(gè)相互關(guān)聯(lián)的病理生理環(huán)節(jié)，肝細(xì)胞炎癥及免疫損傷是其病理基礎(chǔ)［3］?？扇苄约?xì)胞間黏附分子-1(sICAM-1)是一類(lèi)介導(dǎo)細(xì)胞間黏附的膜表面糖蛋白，在炎癥反應(yīng)、免疫應(yīng)答等多種病理過(guò)程中發(fā)揮重要作用，研究發(fā)現(xiàn)sICAM-1在諸多肝臟疾病中如病毒性肝炎、肝衰竭、肝癌、酒精性肝炎等有明顯升高，可能參與肝細(xì)胞炎癥、免疫損傷［4～8］。目前，對(duì)于 NAFLD 患者sICAM-1水平的研究較少。2013年1～9月，我們觀(guān)察了NAFL、NASH患者血清sICAM-1水平變化，現(xiàn)分析結(jié)果，探討其在NAFLD發(fā)生發(fā)展中的作用。

1 材料與方法

1.1 臨床資料 研究對(duì)象為天津市第三中心醫(yī)院同期收治的100例NAFLD患者。其中NAFL50例(NAFL組)，男32例，女18例，年齡 35～60歲，平均42.3歲;NASH50例(NASH組)，男30例，女20例，年齡35～66歲，平均46.2歲;均符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝臟病學(xué)分會(huì)脂肪肝和酒精性肝病學(xué)組制定的NAFLD 診斷標(biāo)準(zhǔn)［9］;甲、乙、丙、丁、戊型肝炎病毒血清標(biāo)志物均陰性，否認(rèn)飲酒史，并除外藥物性肝病、肝豆?fàn)詈俗冃?、自身免疫性肝病等其他可?dǎo)致脂肪肝的特定疾病。選擇50例健康體檢者為對(duì)照組，男29例，女21例，年齡48～65歲，平均54.7歲。各組年齡、性別比例等無(wú)顯著差異。

1.2 觀(guān)察項(xiàng)目 ①血清sICAM-1水平:采肘靜脈血4 mL，靜置，4 h內(nèi)以 3 000 r/min離心20 min，吸取血清分裝試管，避免溶血、高脂血標(biāo)本，將血清標(biāo)本置于-80℃冰箱凍存待檢。采用雙抗體夾心ELISA法測(cè)定sICAM-1水平。②體質(zhì)量指數(shù)(BMI):于清晨空腹測(cè)量身高、體質(zhì)量，計(jì)算 BMI。③血生化指標(biāo):采用微粒子化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測(cè)空腹血胰島素FINS;采用全自動(dòng)生化儀檢測(cè)空腹血糖(FPG)及血脂總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)。分析血清sICAM-1水平與BMI及血生化指標(biāo)的相關(guān)性。

1.3 sICAM-1診斷NASH的價(jià)值 繪制sICAM-1診斷NASH的ROC曲線(xiàn)，計(jì)算ROC曲線(xiàn)下面積、面積的標(biāo)準(zhǔn)誤，診斷NASH的敏感性、特異性等。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用 SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件行數(shù)據(jù)處理，計(jì)量資料符合正態(tài)分布，以±s表示，各組間比較采用方差分析;相關(guān)性采用等級(jí)相關(guān)分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

各組相關(guān)指標(biāo)檢查結(jié)果見(jiàn)表1。血清sICAM-1與 TG、FINS、ALT 呈正相關(guān)(r=0.268，P ＜0.05;r=0.264，P ＜0.05;r=0.637，P ＜0.05);與TC、FPG 無(wú)相關(guān)性(r=0.134，P ＞0.05;r=0.067，P ＞0.05)。血清sICAM-1診斷NASH的ROC曲線(xiàn)下面積為0.79，面積的標(biāo)準(zhǔn)誤為0.087，敏感性為97.1%，特異性為53.3%，面積的 95%可信區(qū)間為 0.619～0.962。

表1 三組BMI及血清sICAM-1水平、血生化指標(biāo)比較(±s)

表1 三組BMI及血清sICAM-1水平、血生化指標(biāo)比較(±s)

注:與對(duì)照組比較，*P ＜0.01;與 NAFL 組比較，▲P ＜0.01

組別 n BMI(kg/m2) sICAM-1(ng/mL) FINS(uIU/mL) FPG(mmol/L)TC(mmol/L) TG(mmol/L) ALT(U/L)NAFL 組 50 27.90 ±2.16* 244.62 ±60.86 17.80 ±6.31* 6.92 ±2.40 5.57 ±1.29* 3.28 ±1.29* 38.54 ±11.37*NASH 組 50 29.98 ±3.33＊▲ 379.30 ±102.79＊▲ 18.66 ±8.62* 7.06 ±2.94 5.74 ±1.77* 3.53 ±1.85* 140.92 ±49.93＊▲對(duì)照組 50 22.50 ±1.75 226.04 ±44.13 8.60 ±3.69 6.86 ±2.52 4.60 ±0.73 1.30 ±0.47 17.72 ± 9.20

3 討論

研究證實(shí)，NAFLD與肥胖、胰島素抵抗、高脂血癥等代謝綜合征密切相關(guān)［10］。在發(fā)達(dá)國(guó)家，NAFLD已成為慢性肝損傷及血清氨基酸轉(zhuǎn)移酶升高的首要原因［11，12］，在我國(guó)僅次于病毒性肝炎排第2位［13］。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)胰島素抵抗和脂質(zhì)誘導(dǎo)的免疫損傷在脂肪肝發(fā)病機(jī)制中起重要作用［10，14，15］。

組織學(xué)檢查是診斷NAFLD的金標(biāo)準(zhǔn)，也是區(qū)分NAFL 與 NASH 的唯一可靠手段［20、21］;但肝穿刺活檢為有創(chuàng)性檢查，患者接受度低。ICAM-1是免疫球蛋白超家族成員之一，是與免疫球蛋白結(jié)構(gòu)相似的一種細(xì)胞表面單鏈糖蛋白，在細(xì)胞膜上分為細(xì)胞外段、疏水的跨膜區(qū)段和短的細(xì)胞內(nèi)區(qū)段。細(xì)胞外區(qū)段有5個(gè)細(xì)胞外免疫球蛋白樣結(jié)構(gòu)區(qū)，其中第一個(gè)免疫球蛋白樣結(jié)構(gòu)區(qū)可與淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原-1(LFA-1)配基相結(jié)合而發(fā)揮作用。在正常肝臟，肝細(xì)胞不表達(dá)ICAM-1，當(dāng)受到外源性刺激或免疫功能異常時(shí)，ICAM-1則明顯表達(dá)于肝細(xì)胞膜，增強(qiáng)白細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞的黏附，促進(jìn)肝細(xì)胞炎癥、免疫損傷過(guò)程［16～18］。表達(dá)于肝臟血管內(nèi)皮細(xì)胞上的ICAM-1可與中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞上的CD11a/CD18、CD11b/CD18互為配體，介導(dǎo)血管內(nèi)皮表面的炎癥發(fā)生、抗原遞呈和免疫應(yīng)答反應(yīng)等;也可與表達(dá)在淋巴細(xì)胞上的LFA-1結(jié)合，介導(dǎo)淋巴細(xì)胞募集反應(yīng)和向肝臟等靶組織的遷移，還可使抗原特異性T細(xì)胞活化及白細(xì)胞跨內(nèi)皮游走等。患者肝臟內(nèi)浸潤(rùn)的淋巴細(xì)胞通過(guò)LFA-1/ICAM-1通路與肝細(xì)胞黏附，刺激細(xì)胞增殖，并引起肝細(xì)胞毒性免疫反應(yīng)和細(xì)胞免疫損傷。

本研究結(jié)果顯示，NASH患者血清sICAM-1水平高于NAFL患者及健康人，與國(guó)外相關(guān)報(bào)道［8，19］一致，說(shuō)明sICAM-1在NASH的發(fā)生中起重要作用;sICAM-1水平與 TG、FINS、ALT呈正相關(guān)，表明 sICAM-1升高程度可反映肝細(xì)胞損傷的嚴(yán)重程度，可作為NAFLD病情評(píng)估的一項(xiàng)指標(biāo)［22］。本研究顯示sICAM-1診斷NASH的敏感性達(dá)97.1%，說(shuō)明血清sICAM-1水平越高，NASH的可能性越大。

綜上所述，sICAM-1可能參與了NASH的免疫損傷機(jī)制，其升高程度與肝損害嚴(yán)重程度有密切關(guān)系，有望替代肝穿活檢成為 NAFLD診斷、區(qū)分NAFL和NASH的無(wú)創(chuàng)性指標(biāo)。

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