郭 震，戴景斌，姜麗亞，趙丙波

(聊城市人民醫(yī)院，山東聊城252000)

大量研究表明，腸道微生物在誘導(dǎo)免疫耐受、抑制過(guò)敏性疾病的發(fā)生和改善過(guò)敏性疾病癥狀方面起重要作用［1，2］。特應(yīng)性皮炎是與遺傳有關(guān)的，具有產(chǎn)生lgE傾向的一種慢性、難治性皮膚病，隨著世界工業(yè)化的發(fā)展，該病發(fā)病率逐年升高。特應(yīng)性皮炎病因眾多，遺傳、環(huán)境、食物、情緒等均與其發(fā)病有關(guān)［3］。近年來(lái)，腸道菌群狀況異常與過(guò)敏性疾病的關(guān)系引起臨床重視，研究結(jié)果表明嬰幼兒特應(yīng)性皮炎的發(fā)生可能與腸道菌群紊亂有密切關(guān)系，但是目前國(guó)內(nèi)外對(duì)成年特應(yīng)性皮炎患者腸道菌群狀況的研究尚少［4～6］。2011年7月～2013年7月，我們觀察了68例特應(yīng)性皮炎患者的腸道菌群狀況，現(xiàn)分析結(jié)果，探討腸道菌群數(shù)量與特應(yīng)性皮炎病情程度的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 于聊城市人民醫(yī)院皮膚科門診就診的68例特應(yīng)性皮炎患者(觀察組)男33例，女35例;年齡18～45(32.62±1.46)歲;病程15～44(33±2.14)年;均符合Hanifin和Rejka特應(yīng)性皮炎診斷標(biāo)準(zhǔn)［7］;無(wú)其他伴發(fā)癥及系統(tǒng)疾病，治療前 2周內(nèi)未外用糖皮質(zhì)激素及免疫抑制劑治療;1個(gè)月內(nèi)未系統(tǒng)使用過(guò)糖皮質(zhì)激素;6個(gè)月內(nèi)未系統(tǒng)使用過(guò)益生菌、抗生素、免疫抑制劑或中藥治療。采用歐洲特應(yīng)性皮炎特別工作組制定的特應(yīng)性皮炎評(píng)分系統(tǒng)(SCORAD)［8］評(píng)估病情嚴(yán)重程度，病情為輕度(總分＜15分)20例，中度(總分15～40分)28例;重度(總分＞40分)20例。本院體檢健康者20例作為對(duì)照組，男 11例，女 9例，年齡 20～43(31.67±1.89)歲;排除過(guò)敏性疾病、食物過(guò)敏、濕疹及過(guò)敏體質(zhì)者。兩組性別比例及年齡無(wú)組間偏倚。

1.2 腸道菌群數(shù)量檢測(cè) 取兩組的新鮮中段大便500 mg(天平稱取)，-4℃冰箱保存，時(shí)間不超過(guò)1 h［9］。預(yù)處理后，采用PCR熒光定量法檢測(cè)糞便內(nèi)乳酸桿菌、雙歧桿菌、大腸桿菌、糞腸球菌及屎腸球菌數(shù)量;結(jié)果以每克濕便的細(xì)菌拷貝數(shù)的對(duì)數(shù)(以10為底數(shù))表示。雙歧桿菌、乳酸桿菌及大腸桿菌特異性引物根據(jù)16S rRNA基因序列設(shè)計(jì);糞腸球菌和屎腸球菌特異性引物根據(jù)其ddl基因序列設(shè)計(jì);引物由上海生工生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司合成。標(biāo)準(zhǔn)菌株:ATCC29212(糞腸球菌)、ATCC25922(大腸桿菌)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS18.0軟件行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以±s表示，進(jìn)行方差檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.01為差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

兩組糞便標(biāo)本中5種細(xì)菌數(shù)量比較見(jiàn)表1。

3 討論

腸道菌群是一個(gè)復(fù)雜的微生態(tài)系統(tǒng)，腸道內(nèi)的各類微生物處于一種平衡的共生狀態(tài)。研究表明，人結(jié)腸部位有400～500種細(xì)菌，細(xì)菌總數(shù)是人體細(xì)胞總數(shù)的10倍。腸道微生物菌群不僅在調(diào)節(jié)宿主量與代謝、促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收中起重要作用，且可通過(guò)代謝藥物及有害外源復(fù)合物、抵抗外源性致病微生物和內(nèi)源性條件致病菌、影響腸道免疫系統(tǒng)、促進(jìn)腸道黏膜屏障的免疫功能和成熟等作用維持人體的健康［10，11］。腸道微生物菌群是腸道和免疫系統(tǒng)發(fā)育的重要刺激物，缺乏正常的健康腸道共生菌群時(shí)，正常的保護(hù)性黏膜屏障就會(huì)受到破壞，黏膜屏障的破壞增加抗原的轉(zhuǎn)運(yùn)和高水平抗原的暴露，導(dǎo)致促炎因子的分泌，引起異常的免疫反應(yīng)和早期過(guò)敏性疾病的發(fā)生。大量研究表明，微生物暴露和腸道微生物包括益生菌在誘導(dǎo)免疫耐受、抑制過(guò)敏性疾病的發(fā)生和改善過(guò)敏性疾病癥狀方面起重要作用［12］。腸道菌群有助于恢復(fù)腸道正常的通透性，改善腸道免疫屏障功能，上調(diào)免疫調(diào)節(jié)性細(xì)胞因子，下調(diào)局部和全身過(guò)敏炎癥反應(yīng)特征性的促炎細(xì)胞因子的產(chǎn)生，調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫反應(yīng)，降低腸道炎癥反應(yīng)［13～16］。

表1 兩組糞便標(biāo)本細(xì)菌定量檢測(cè)結(jié)果(±s)

表1 兩組糞便標(biāo)本細(xì)菌定量檢測(cè)結(jié)果(±s)

注:與對(duì)照組比較，﹟ P ＜0.01;與病情輕度者比較，*P ＜0.01

組別 n 雙歧桿菌 乳酸桿菌 大腸桿菌 糞腸球菌 屎腸球菌觀察組 68 7.38±0.38﹟ 6.05±0.26﹟4.71 ±0.23 4.65 ±0.16 4.49 ±0.16輕度 20 8.46 ±0.43 6.91 ±0.23﹟ 4.58 ±0.22 4.57 ±0.13 4.27 ±0.17中度 28 7.02 ±0.34* 5.87 ±0.32* 4.47 ±0.26 4.63 ±0.15 4.55 ±0.14重度 20 6.81 ±0.37* 5.45 ±0.20* 5.02 ±0.19 4.44 ±0.17 4.39 ±0.16對(duì)照組 20 8.57 ±0.32 7.26 ±0.18 4.66 ±0.17 4.72 ±0.15 4.43 ±0.06

雙歧桿菌及乳酸桿菌是人體腸道內(nèi)的兩種常見(jiàn)益生菌。本研究結(jié)果顯示，特應(yīng)性皮炎患者糞便中雙歧桿菌及乳酸桿菌的數(shù)量明顯低于健康者，提示成年特應(yīng)性皮炎患者存在腸道菌群失調(diào)的情況。近期Roessler等［17］進(jìn)行的一項(xiàng)隨機(jī)雙盲對(duì)照研究結(jié)果顯示，成人特應(yīng)性皮炎患者糞便中乳酸桿菌數(shù)量明顯低于健康者，與本研究結(jié)果一致;但雙歧桿菌數(shù)量與健康人無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，與本研究不同，可能與兩研究的檢測(cè)方法、歐亞地區(qū)人種及飲食習(xí)慣等不同有關(guān)。

本研究結(jié)果顯示，特應(yīng)性皮炎患者病情為輕度者乳酸桿菌數(shù)量較健康人顯著降低，中、重度者雙歧桿菌和乳酸桿菌均較輕度及健康人顯著降低，而中度和重度者雙歧桿菌及乳酸桿菌數(shù)量無(wú)顯著差異，提示特應(yīng)性皮炎患者腸道菌群失調(diào)主要發(fā)生在中度及重度患者。

分析本研究結(jié)果，特應(yīng)性皮炎患者，尤其是病情為中、重度者存在腸道菌群失調(diào)，主要表現(xiàn)為乳酸桿菌、雙歧桿菌降低數(shù)量減少;而腸道菌群失調(diào)誘發(fā)或加重了特應(yīng)性皮炎的過(guò)敏反應(yīng)。對(duì)此類患者應(yīng)采取改善腸道菌群異常、加強(qiáng)腸道免疫屏障功能、降低腸道炎癥反應(yīng)的相關(guān)措施。本研究的不足之處是樣本量較少，后續(xù)研究中將進(jìn)行多中心、大樣本的臨床研究，以更全面的反映成人特應(yīng)性皮炎患者的腸道菌群狀況。

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