晏廷亮 張帆 崔道林 方杰 龔蕾

炎癥性腸?。↖BD）一詞特指病因尚不明了的炎癥性腸病，主要包括潰瘍性結(jié)腸炎和克羅恩病。IBD的病因尚未完全明確，目前認(rèn)為其發(fā)病機(jī)制可以概括為免疫反應(yīng)引發(fā)的炎性病理過程[1]。氨基水楊酸類藥物、免疫抑制劑和糖皮質(zhì)激素等藥物是目前治療該疾病的主要方法，但這類藥物停藥后容易復(fù)發(fā)，并且長(zhǎng)期應(yīng)用會(huì)帶來較多不良反應(yīng)[2]。近年來隨著對(duì)IBD的深入研究，生物制劑尤其是益生菌在IBD的治療領(lǐng)域受到醫(yī)學(xué)界的廣泛關(guān)注。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與主要試劑 雄性SD大鼠40只，隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型組、美沙拉嗪組和美沙拉嗪益生菌聯(lián)合組，每組10只。葡聚糖硫酸鈉（DSS），美沙拉嗪片，益生菌：雙歧三聯(lián)活菌（含雙歧桿菌、乳酸桿菌、腸球菌），小鼠ELISA試劑盒。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 造模與灌胃 根據(jù)每日實(shí)際飲用量新鮮配制5%DSS溶液。隨機(jī)選取的30只大鼠給予含5%DSS的飲用水10 d建立炎癥性腸病動(dòng)物模型。第11天開始模型組常規(guī)飼養(yǎng)觀察14 d；美沙拉嗪組給予150 mg/（kg·d）的劑量應(yīng)用美沙拉嗪灌胃治療14 d，聯(lián)合組則除給予美沙拉嗪組同等治療外，同時(shí)還應(yīng)用雙歧三聯(lián)活菌按照500 mg/（kg·d）的劑量灌胃治療14 d，在此治療期間正常對(duì)照組和模型組都給予等量生理鹽水灌胃；正常對(duì)照組不予DSS干預(yù)，僅同步常規(guī)飼養(yǎng)觀察。

1.2.2 觀察指標(biāo) 所有大鼠于灌胃結(jié)束后處死并取血分離血清，應(yīng)用ELISA試劑盒測(cè)定大鼠血清中IL-6、TNF-α和IFN-γ含量，具體步驟嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以（±s）表示，采用t檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

模型組的各類炎癥因子含量均明顯高于正常對(duì)照組（P<0.05）；而美沙拉嗪組和聯(lián)合組的IL-6、TNF-α和IFN-γ含量的表達(dá)均明顯低于模型組，（P<0.05）；而聯(lián)合組相比美沙拉嗪組在IL-6的表達(dá)上也是明顯下降（P<0.05），雖然TNF-α和IFN-γ含量也是有所下降，但是差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。具體見表1。

表1 各組大鼠腸黏膜IL-6、TNF-α和IFN-γ結(jié)果 pg/mL

3 討論

近年來我國的炎癥性腸病患病率逐年增加，而目前該病的發(fā)病因素及致病機(jī)制尚未明確，是多種因素導(dǎo)致的病變，一般主要考慮與外界環(huán)境、基因遺傳、免疫力以及感染等多方面綜合因素相關(guān)[3]。該病的主要臨床表現(xiàn)為腹痛、腹瀉、黏性血便等，如并發(fā)潰瘍必須及時(shí)治療，否則極易引發(fā)腸穿孔，威脅患者的生命安全[4]。傳統(tǒng)西醫(yī)臨床治療IBD的手段主要是通過抑制腸黏膜釋放前列腺素E和白三烯，進(jìn)而抑制巨噬細(xì)胞向炎癥中心移動(dòng)，從而達(dá)到有效抗炎的目的[5]。近年來有相關(guān)研究報(bào)道，IBD與腸道菌群失調(diào)有密切關(guān)系[6]，人體腸道有大量的微生物，不完全統(tǒng)計(jì)，數(shù)量高達(dá)400種以上，其中就以雙歧桿菌與嗜酸乳桿菌為主，大約占到微生物總量的98%以上，通常人體在正常情況下，腸道內(nèi)的微生物處于相對(duì)平衡狀態(tài)，可一旦失衡，菌群失調(diào)可導(dǎo)致相關(guān)疾病的發(fā)生[7]。IBD的患者腸黏膜表面的有益菌如乳酸桿菌和雙歧桿菌是缺失的，而大腸桿菌、變形桿菌和擬桿菌等革蘭氏陰性菌在腸黏膜表面的濃度反而增加，可以認(rèn)為腸道菌群失調(diào)可能是IBD誘發(fā)及復(fù)發(fā)的關(guān)鍵因素，因此應(yīng)用益生菌治療IBD成為一種新的臨床治療思維方式。

美沙拉嗪是一種5-氨基水楊酸制劑，在腸道釋放后主要通過抑制白三烯等炎性物質(zhì)的釋放，從而減少炎癥反應(yīng)[8]，同時(shí)該藥物還能清除腸道的自由基，較少引發(fā)不良反應(yīng)，患者能夠持續(xù)治療[9]?？梢娒郎忱耗芎芎玫匾种苹颊吣c黏膜的炎性反應(yīng)，促進(jìn)損傷腸壁愈合。在應(yīng)用美沙拉嗪治療IBD的同時(shí)適當(dāng)補(bǔ)充益生菌能夠平衡IBD患者的腸道菌群，不僅更加有效地抑制了IBD的炎癥反應(yīng)，而且可以明顯改變腸道的微生物環(huán)境[10]，這是基于腸道天然免疫與正常菌群間的異常免疫反應(yīng)，最終都表現(xiàn)在細(xì)胞因子的表達(dá)異常[11]。

從本實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，單用美沙拉嗪能夠明顯抑制大鼠模型血清中的炎癥因子，這也說明這一藥物治療IBD的有效性，但是同時(shí)也可以看出，在于模型組存在明顯區(qū)別的同時(shí)，該組與正常對(duì)照組的炎癥因子的表達(dá)也是明顯存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。當(dāng)益生菌與美沙拉嗪聯(lián)合應(yīng)用時(shí)，可以發(fā)現(xiàn)大鼠血清中三種炎癥的含量的表達(dá)繼續(xù)下降，不僅三項(xiàng)內(nèi)容都與模型組存在明顯差異，同時(shí)與正常對(duì)照組在TNF-α和IFN-γ這兩項(xiàng)已無明顯差異，這可能是源于益生菌通過上調(diào)腸道局部的免疫功能，促進(jìn)機(jī)體免疫恢復(fù)，從而有效糾正了抑炎和抗炎動(dòng)態(tài)失衡，降低炎癥反應(yīng)，并最終下調(diào)白細(xì)胞的計(jì)數(shù)，減少了炎性因子的釋放[12]?？傊瑥膶?shí)驗(yàn)結(jié)果的數(shù)據(jù)中充分體現(xiàn)出了兩種藥物聯(lián)用的優(yōu)勢(shì)。

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