孫夢希，劉 蟬(安徽省食品藥品檢驗研究院，安徽合肥 230051)

鹽酸乙胺丁醇片收錄于中國藥典2010年版二部(含鹽酸乙胺丁醇應(yīng)為標(biāo)示量的 95.0%～105.0%)，屬抗結(jié)核病藥。中國藥典2010年版二部采用非水溶液滴定法測定含量［1］，該法樣品前處理過程繁瑣，且可能在處理過程中損失一定量的樣品。為了對市場中的鹽酸乙胺丁醇片進行快速篩查和快速定量分析，本文建立近紅外光譜法，簡便、無損失的進行鹽酸乙胺丁醇片含量檢測，為假劣藥品的現(xiàn)場篩查提供有力的手段。

1 儀器與試藥

Sartorius電子天平，Matrix-F近紅外光譜儀(德國BRUKER公司)，OPUS 6.5分析軟件。鹽酸乙胺丁醇片:4個廠家，22批樣品，規(guī)格均為0.25 g。氫氧化鈉、氯化鈉、三氯甲烷、冰醋酸均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 非水溶液滴定法含量測定 按照中國藥典2010年版二部中鹽酸乙胺丁醇片含量測定法對鹽酸乙胺丁醇片進行含量測定［1］。22批鹽酸乙胺丁醇片的含量范圍為68.36% ～81.52%。

2.2 鹽酸乙胺丁醇片近紅外光譜的測定 近紅外光譜分辨率為8 cm－1，掃描范圍為12 000～4 000 cm－1，共掃描32次，每批樣品測定6片，分別得到6張原始光譜，計算平均光譜。

圖1 鹽酸乙胺丁醇片近紅外平均光譜圖

2.3 建模方法、譜段和預(yù)處理方法的確定［2－5］將所有非鋁塑鹽酸乙胺丁醇片的近紅外平均光譜用于建立模型，圖1中7 500～6 500、5 500～4 500 cm－1這兩段譜段，是各廠家差異較大的以及滑石粉的光譜區(qū)域，去掉這兩段譜段區(qū)域，再將所有平均光譜作為校正集采用交叉驗證法(Cross Validation)，通過使用 OPUS進行自動優(yōu)化，得到譜段9 701.4 ～7 502.6 cm－1。預(yù)處理方法為最小最大歸一化(Min－Max normalization)+一階導(dǎo)數(shù)化+減去一條直線，采用交叉驗證法(Cross Validation)建模。

2.4 驗證結(jié)果 驗證該譜段和預(yù)處理方法。首先以所有樣本為校正集進行內(nèi)部交叉驗證，計算得到R2為 92.49%，均方根誤差(RMSECV)為 0.82;然后將樣本的一部分作為校正集、另一部分作為驗證集，進行外部驗證，得到R2為96.12%，均方根誤差(RMSEP)為0.632。結(jié)果見表1、圖1、3。藥典方法測定值與NIR預(yù)測值相比較，NIR法的平均偏差為0.71%，最大偏差為 1.49%。

圖2 鹽酸乙胺丁醇片定量分析模型內(nèi)部驗證參考值與預(yù)測值結(jié)果圖

圖3 鹽酸乙胺丁醇片定量分析模型外部驗證參考值與預(yù)測值結(jié)果圖

2.5 模型重復(fù)性考察 隨機在22批樣品中抽取1批，用近紅外光譜儀進行光譜測定，連續(xù)測定6次，結(jié)果NIR含量測定值分別為74.415%、74.538%、74.581%、74.209%、74.761%、73.907%，平均為74.40%，RSD為0.5%，表明本模型重復(fù)性良好。藥典方法含量測定值為74.41%。

2.6 模型中間精密度考察 不同的分析人員，在不同的日期，選擇5批樣品，分別采集近紅外光譜圖，計算平均光譜。用這5張平均光譜進行模型的中間精密度考察，見表2，結(jié)果表明本模型精密度良好。

3 討論

通過對22批樣品的預(yù)測結(jié)果與藥典方法含量測定結(jié)果比較，其平均相對偏差為0.71%，模型測定的結(jié)果與藥典方法的相對偏差大多數(shù)在2% 以內(nèi)，在快速分析的接受范圍，故該通用定量模型具有一定的實用價值［6］。

表1 鹽酸乙胺丁醇片近紅外定量模型測定結(jié)果及偏差

表2 鹽酸乙胺丁醇片近紅外定量模型測定結(jié)果及偏差

本文應(yīng)用近紅外光譜法對鹽酸乙胺丁醇片進行定量測定，方法準(zhǔn)確可靠，方便快捷。在基層的打假治劣中，就可以利用藥品快檢車在抽驗現(xiàn)場對鹽酸乙胺丁醇片真?zhèn)芜M行篩選，提高了工作效率，將藥品的技術(shù)監(jiān)督與行政監(jiān)督有機融為一體，提高了假劣藥檢出率與抽驗靶向率，大大節(jié)省了檢驗成本［7－10］。當(dāng)然在實際檢驗中，由于各個廠家的制備工藝、輔料和樣品均勻程度等方面存在一定差異，同時樣品的厚度、溫度、殘留溶劑、含水量和光學(xué)性質(zhì)等方面也有所不同，這些都可以對近紅外光譜產(chǎn)生一定的影響，因此還需要對近紅外定量模型進行補充與完善。

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