和文博，付 囡，趙 蕊，陳茂偉（廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院感染性疾病科，南寧 530021）

全球攜帶丙型肝炎病毒（HCV）者約有1.7億人，慢性丙型肝炎（CHC）是肝硬化及肝細(xì)胞癌的常見病因［1］。由于乙型肝炎疫苗在嬰幼兒中廣泛接種，近年來乙型肝炎病毒的流行急劇下降［2］。這就使得HCV感染發(fā)展形成的慢性肝病顯得突出，但HCV感染慢性化的機(jī)制目前尚未明確。白介素-18（IL-18）主要由巨噬細(xì)胞、樹突細(xì)胞等抗原提呈細(xì)胞分泌，能夠誘導(dǎo)Th1細(xì)胞分化成熟并促進(jìn)Th1細(xì)胞主導(dǎo)的細(xì)胞免疫，與Th1／Th2細(xì)胞共同作用于病毒的清除、疾病的慢性化等過程。有研究表明IL-18在抗病毒方面具有潛在價(jià)值［3］。本研究通過檢測(cè)CHC患者IL-18的表達(dá)情況及其與病毒復(fù)制、肝功能損害的關(guān)系，以探討IL-18在CHC病程中的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料選擇2012年12月至2013年4月本院門診及住院CHC患者47例為研究對(duì)象，其中男24例，女23例，年齡11月至50歲，平均年齡（29.19±11.74）歲，所有患者均符合2004年中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì)、傳染病與寄生蟲病學(xué)分會(huì)聯(lián)合發(fā)布的《丙型肝炎防治指南》中CHC診斷標(biāo)準(zhǔn)［4］。選擇同期高校體檢學(xué)生20例為健康對(duì)照組，其中男10例，女10例，年齡20～29歲，平均年齡（26.55±2.41）歲。以上納入研究對(duì)象均排除甲、乙、丁、戊型肝炎及心腦疾病、腎病、糖尿病等重大疾病。兩組一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2試劑與儀器采用湖北武漢華美生物工程有限公司定量檢測(cè)人血清IL-18的酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）試劑盒（檢測(cè)范圍：7.8～500pg／mL；產(chǎn)品編號(hào)：CSB-E07450h），嚴(yán)格按照說明書步驟操作；采用中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司的HCV核酸檢測(cè)試劑盒（聚合酶鏈反應(yīng)-熒光探針法）檢測(cè)HCV-RNA，檢測(cè)下限1.0×103copy／mL；全自動(dòng)免疫分析儀（機(jī)器型號(hào)：ARCHITECT i2600sr，正常參考值：0.00～1.00S／CO）檢測(cè)HCV抗體（HCV-Ab）；全自動(dòng)生化儀檢測(cè)丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）（機(jī)器型號(hào)：HITACHI 7600-020，正常參考范圍9～60 U／L）。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，服從偏態(tài)分布的計(jì)量資料采用中位數(shù)（四分位間距）表示，兩組均數(shù)比較采用秩和檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；采用Spearman相關(guān)分析，r=1表示兩變量呈完全正相關(guān)，r=-1表示兩變量呈完全負(fù)相關(guān)，r接近0表示兩變量順序關(guān)聯(lián)性很小。

2 結(jié) 果

2.1 IL-18在CHC患者組與健康對(duì)照組中的表達(dá)情況CHC患者組血清IL-18的濃度為118.52pg／mL高于對(duì)照組的11.09pg／mL，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

2.2 CHC患者IL-18表達(dá)情況與HCV-RNA的相關(guān)性47例CHC患者中HCV-Ab陽(yáng)性20例，HCV-Ab陰性27例。HCV-Ab陽(yáng)性患者IL-18水平為123.61pg／mL（P25、P75為60.31、160.45pg／mL）；HCV-Ab陰 性 患 者IL-18水 平 為118.52pg／mL（P25、P75為59.24、237.18pg／mL）。兩者間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=-0.320，P＞0.05）。HCV-RNA陽(yáng)性患者定量檢測(cè)結(jié)果與IL-18水平進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果顯示兩者間無顯著相關(guān)性（r=0.085），見圖1。

圖1 HCV-RNA陽(yáng)性患者定量檢測(cè)結(jié)果與IL-18相關(guān)性分析

2.3 CHC患者IL-18表達(dá)情況與HCV-Ab的相關(guān)性47例CHC患者中HCV-RNA陽(yáng)性15例、HCV-RNA陰性32例。HCV-RNA陽(yáng)性患者IL-18水平為138.44pg／mL（P25、P75為92.20、162.06pg／mL）；HCV-RNA陰性患者IL-18水平為111.02pg／mL（P25、P75為56.11、211.07pg／mL）。兩者間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

2.4 CHC患者IL-18表達(dá)情況與ALT的相關(guān)性47例CHC患者ALT與IL-18采用Spearman秩相關(guān)分析，結(jié)果顯示兩者無顯著相關(guān)性（r=0.291），見圖2。

圖2 CHC患者IL-18表達(dá)情況與ALT的相關(guān)性

3 討 論

HCV感染導(dǎo)致的慢性肝病是嚴(yán)重威脅人類健康的全球性問題。免疫機(jī)制被認(rèn)為在CHC發(fā)病中占有重要位置，其中HCV可通過抑制宿主免疫細(xì)胞如細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞（CTL）等導(dǎo)致HCV持續(xù)感染［5］。CTL是機(jī)體感染HCV后的主要效應(yīng)細(xì)胞，需在Th細(xì)胞分泌的相關(guān)細(xì)胞因子調(diào)節(jié)下發(fā)揮作用。Gigi等［6］研究結(jié)果顯示，在CHC患者血清中Th1分泌的干擾素-γ（IFN-γ）降低，Th2分泌的IL-10呈現(xiàn)高表達(dá)。Th細(xì)胞除自身分泌的細(xì)胞因子外還與抗原提呈細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子共同作用于機(jī)體感染病毒后的免疫反應(yīng)，在病毒清除及疾病發(fā)展中共同發(fā)揮作用。IL-18是抗原提呈細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子之一，可誘導(dǎo)Th1細(xì)胞的分化成熟并促進(jìn)Th1細(xì)胞主導(dǎo)的細(xì)胞免疫。另外，IL-18可以增強(qiáng)CTL細(xì)胞毒性活性，又作為IFN-γ的誘導(dǎo)因子，由此有學(xué)者提出IL-18可能與抗病毒有一定關(guān)系［3］。

目前國(guó)內(nèi)外對(duì)IL-18在CHC患者中的表達(dá)及意義少有研究，且結(jié)論也不統(tǒng)一。本研究結(jié)果顯示，IL-18在CHC患者血清中表達(dá)高于健康人（P＜0.05），表明血清IL-18表達(dá)水平的升高與CHC感染密切相關(guān)。IL-18的升高可能通過促進(jìn)Th1細(xì)胞主導(dǎo)的細(xì)胞免疫、誘導(dǎo)機(jī)體IFN-γ的產(chǎn)生，從而促進(jìn)HCV的清除。本研究的結(jié)果與Yue等［7］、張琳等［8］學(xué)者的研究結(jié)果一致。但Schvoerer等［9］研究結(jié)果表明，CHC患者與健康組對(duì)照組IL-18水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

國(guó)外研究結(jié)果顯示，HCV-RNA陽(yáng)性患者IL-18的表達(dá)水平較HCV-RNA陰性患者顯著升高，提出IL-18水平升高可對(duì)病毒在肝臟中的持續(xù)表達(dá)及復(fù)制產(chǎn)生抑制作用［10］。本研究中為了解HCV病毒復(fù)制情況與IL-18的關(guān)系，比較了HCVRNA陽(yáng)性患者與陰性患者間IL-18的濃度差異，結(jié)果顯示兩組間無明顯差異（P＞0.05），通過HCV-RNA定量檢測(cè)結(jié)果與IL-18含量的相關(guān)性分析，結(jié)果顯示兩者間無顯著相關(guān)性（r=0.085，P＞0.05），提示IL-18與病毒復(fù)制情況無明顯關(guān)系。

IL-18是機(jī)體促炎因子之一，國(guó)內(nèi)外的研究結(jié)果提示HCV會(huì)刺激機(jī)體巨噬細(xì)胞分泌IL-1β和IL-18，從而導(dǎo)致肝臟炎癥、肝功能損傷，而且IL-18升高水平與ALT升高呈正相關(guān)［10-12］。本研究對(duì)ALT正常與異常組的CHC患者IL-18水平進(jìn)行Spearman相關(guān)分析，結(jié)果顯示ALT與IL-18無明顯相關(guān)性（r=0.291，P＞0.05）。結(jié)論與之前研究報(bào)道有所不同，可能與本次研究納入的ALT正常和輕度異常病例數(shù)占總病例數(shù)的比例偏高，導(dǎo)致數(shù)據(jù)偏倚有關(guān)。因此，關(guān)于ALT和IL-18的關(guān)系有待擴(kuò)大ALT中重度異常病例比例，進(jìn)一步分析研究。

綜上所述，本研究中CHC患者血清IL-18呈現(xiàn)高表達(dá)，提示IL-18可能在丙型肝炎慢性感染過程中發(fā)揮一定作用。另外，IL-18與HCV復(fù)制及其所致的肝損傷無明顯關(guān)系。

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