霍妍明，陳國(guó)亮，薛曉霜，張東冉，邱殿銳，趙伍祥

（1.承德市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心河北承德067000；2.河北旅游職業(yè)學(xué)院河北承德067000；3.承德市畜牧研究所 河北承德067000）

規(guī)?；?chǎng)寒季消毒模式效果研究

霍妍明1，陳國(guó)亮1，薛曉霜2，張東冉1，邱殿銳3，趙伍祥3

（1.承德市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心河北承德067000；2.河北旅游職業(yè)學(xué)院河北承德067000；3.承德市畜牧研究所 河北承德067000）

通過(guò)對(duì)寒季規(guī)?；虉?chǎng)應(yīng)用三類(lèi)不同的消毒藥，比較消毒前、后細(xì)菌的變化規(guī)律，探討出效果較好的消毒藥種類(lèi)，并推薦出冬季最佳消毒間隔周期。試驗(yàn)結(jié)果表明：三類(lèi)消毒藥中，以含氯制劑效果最佳，其余依次為醛類(lèi)制劑、碘類(lèi)制劑；冬季最佳消毒間隔周期為6 d，可以起到較好的消毒效果并能夠做好圈舍保溫工作。

寒季；規(guī)?；虉?chǎng)；消毒藥；間隔周期

隨著應(yīng)用技術(shù)的不斷研究推廣，科學(xué)有效的預(yù)防疫病工作愈來(lái)愈受到重視。近些年來(lái)一些新建的規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)在進(jìn)行區(qū)域劃分時(shí)，特別重視消毒隔離區(qū)域建設(shè)，把其作為重要環(huán)節(jié)建設(shè)。但近些年來(lái)通過(guò)筆者走訪(fǎng)不同的養(yǎng)殖場(chǎng)時(shí)發(fā)現(xiàn)，很多養(yǎng)殖場(chǎng)消毒效果并不理想，究其原因很多，如：用藥單一、消毒程序混亂、特別是到了冬季使用何種消毒藥、幾天消一次毒能更好的控制疫病發(fā)生又能較好地做好畜舍保溫工作成為比較撓頭的事情。本試驗(yàn)本著廣譜、高效、低毒、低殘留、不會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染的原則[1]選擇三類(lèi)消毒藥[2]在北方冬季規(guī)模奶牛場(chǎng)圈舍開(kāi)展消毒試驗(yàn)。消毒前、后分別采樣，比對(duì)消殺效果，并摸索出冬季消毒間隔最佳周期。

1 試驗(yàn)材料

1.1 消毒劑

含氯消毒劑：84消毒液（次氯酸鈉制劑，工作濃度1∶100）；

醛類(lèi)消毒劑：醛滅靈（稀戊二醛溶液，工作濃度1∶1000）；

碘類(lèi)消毒劑：菌毒殺（聚維酮碘，工作濃度1∶1500）。

1.2 器材

一次性培養(yǎng)皿、臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)、滅菌棉簽、滅菌玻璃珠、移液器、振蕩器、EP管、恒溫培養(yǎng)箱、高溫高壓滅菌鍋、生理鹽水、溫濕度計(jì)、超凈工作臺(tái)。

1.3 場(chǎng)點(diǎn)選擇

選定河北省隆化縣旺興奶牛養(yǎng)殖有限公司、承德天添乳業(yè)有限公司（圍場(chǎng)）做試驗(yàn)場(chǎng)點(diǎn)。試驗(yàn)開(kāi)展于2013年11月15日，至2014年1月18日結(jié)束。試驗(yàn)期間最低溫度-29℃，最高氣溫1℃。

2 試驗(yàn)方法

2.1 空氣菌樣

2．1．1 樣品采集 消毒前將圈舍清掃，用噴霧器對(duì)舍內(nèi)進(jìn)行空氣進(jìn)行噴霧，將制備好的培養(yǎng)基分別選擇圈舍高（距地面2 m處）、中（距地面1.5 m處）、低（距地面1 m處）三部分代表圈舍不同高度，消毒前、后分別將已制備好的培養(yǎng)基按照不同高度放置，打開(kāi)培養(yǎng)皿蓋，使培養(yǎng)基表面暴露10 min，再將培養(yǎng)皿蓋蓋上后倒置，置于37℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24 h，菌落計(jì)數(shù)：按照奧氏計(jì)算公式計(jì)算菌落總數(shù)[3]。公式：C=5 0000 N/AT

C:每立方米菌落總數(shù) (cfu/m3）；N:每皿菌落數(shù)(個(gè))；A:培養(yǎng)皿面積（cm2）；T:采樣時(shí)間（min）

2．1．2 試驗(yàn)結(jié)果 試驗(yàn)具體結(jié)果見(jiàn)表1。

2．1．3 結(jié)果分析 表1試驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，三種消毒藥對(duì)空氣中的細(xì)菌殺滅率均達(dá)到了80%以上，效果較好，以84消毒液消毒效果最優(yōu)，消殺率平均為92.3%，其次為菌毒殺，消殺率為88.7%，醛滅靈的消殺率85%。

表1 牛舍空氣消毒試驗(yàn)結(jié)果（103cfu/m2）

2.2 圈舍地面菌樣采集

2．2．1 場(chǎng)點(diǎn)布樣及采樣 采用噴漆定位方式圈定采樣范圍，東西走向牛舍按照距離東門(mén)口、西門(mén)口各5 m處選定兩個(gè)采樣點(diǎn)，中間部位內(nèi)選定一個(gè)采樣點(diǎn)，采樣點(diǎn)面積1×1 m2，每個(gè)采樣點(diǎn)均設(shè)計(jì)為10×10 cm2的采樣小區(qū)，開(kāi)始前均進(jìn)行機(jī)械清掃地面污物及糞便，消毒前均采用自來(lái)水噴霧打濕地面0.5 h后再實(shí)施整棟圈舍噴霧消毒，分別在消毒前、消毒后的30 min用滅菌生理鹽水沾濕的滅菌棉簽直接滾動(dòng)涂抹采樣區(qū)并分別采集到EP管內(nèi)。采集好的樣品置于冰盒內(nèi)，在5 h內(nèi)運(yùn)送到實(shí)驗(yàn)室開(kāi)展工作。試驗(yàn)設(shè)置兩組同時(shí)進(jìn)行：①每天消毒組；②周期消毒組（第一天消毒，以后不消毒），通過(guò)每天采樣測(cè)算消殺率并根據(jù)細(xì)菌增值率推算出細(xì)菌增殖周期，得出冬季消毒間隔周期。

2．2．2 樣品處理將呈有樣品的EP管加入0.9%滅菌生理鹽水1 mL浸泡30 min，之后轉(zhuǎn)移到自制的處理管中，6 000 r/min離心1 min，靜置10 min。將處理好的菌液進(jìn)行倍比稀釋?zhuān)♂尯玫木喊凑彰繅K培養(yǎng)基10 μL的量采用滾珠法進(jìn)行均勻滾涂，置于37℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24 h，計(jì)數(shù)。

2．2．3 試驗(yàn)結(jié)果 畜舍消毒試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。

2．2．4 試驗(yàn)結(jié)果分析圖 對(duì)消毒所設(shè)置的每天消毒組和周期消毒組的細(xì)菌數(shù)量變化進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，統(tǒng)計(jì)如圖1、圖2。

表2 畜舍消毒試驗(yàn)結(jié)果（每天消毒組103cfu/m2）

2．2．5 結(jié)果分析

1）從表2數(shù)據(jù)和圖1看出：北方地區(qū)冬季（-29～-6℃）規(guī)?；膛?chǎng)以含氯消毒劑（84消毒液）消毒效果最理想，其余依次為醛類(lèi)消毒劑（醛滅靈）、碘類(lèi)消毒劑（菌毒殺）。

圖1 三種消毒劑每天消毒的殺滅率

圖2 三種消毒劑周期消毒細(xì)菌增值率

表3 畜舍消毒試驗(yàn)結(jié)果（周期消毒組 103cfu/m2）

2）表3試驗(yàn)數(shù)據(jù)和可見(jiàn)：消毒后的第六天細(xì)菌的恢復(fù)率已達(dá)到60.7%～65.1%之間，第七天時(shí)細(xì)菌的恢復(fù)力最高可達(dá)到82.6%，從這三種消毒藥細(xì)菌增值率（圖2中曲線(xiàn)斜率）可看出，第六天時(shí)細(xì)菌增值率最高，細(xì)菌在經(jīng)過(guò)第一天消毒后，從第二天開(kāi)始緩慢生長(zhǎng)，至第六天時(shí)生長(zhǎng)速度加快，一般在第九到第十天后細(xì)菌已經(jīng)增值到原始菌水平。

3）通過(guò)以上分析建議北方冬季奶牛場(chǎng)適宜的消毒周期為6 d，即第一天消毒后，第六天進(jìn)行第二次消毒，消毒間隔周期內(nèi)無(wú)需進(jìn)行消毒?！觯ň庉嫞旱一郏?/p>

[1] 杜曉光.影響消毒藥作用的八大因素[J].河南畜牧獸醫(yī),2010,31（11）:17-18.

[2] 耿建虎.奶牛場(chǎng)常用消毒劑及其應(yīng)用[J].中國(guó)牛業(yè)科學(xué),2012,38（4）:71-72.

[3] 李建鋒,羅沛宏,賀曉龍,等.三中消毒劑對(duì)育肥牛場(chǎng)圈舍消毒效果研究[J].青海大學(xué)學(xué)報(bào),2013(1):24-26+53.

10.3969/j.issn.1008-4754.2015.02.011

河北省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系奶牛產(chǎn)業(yè)創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)建設(shè)專(zhuān)項(xiàng)資金；承德市科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目（201422074）。