方明娟 楊任民 吳君霞 王翼潔 程 楠 胡文彬 胡紀(jì)源 韓詠竹

肝豆?fàn)詈俗冃曰颊哐Ｒ?guī)檢驗(yàn)結(jié)果分析

方明娟 楊任民 吳君霞 王翼潔 程 楠 胡文彬 胡紀(jì)源 韓詠竹

目的觀察肝豆?fàn)詈俗冃?HLD)及不同臨床分型患者血常規(guī)各項(xiàng)指標(biāo)水平，探討其相關(guān)病理機(jī)制。方法對(duì)493例HLD患者和153例正常對(duì)照組用sysmex XT-2000五分類血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀檢測(cè)19項(xiàng)血常規(guī)項(xiàng)目。結(jié)果HLD組WBC、NEUT%、RBC、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、PLT、PCT 與正常對(duì)照組比較均顯著降低，而 LYMPH%、MONO%、EO%、RDW-CV%與正常組相比均升高，且差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。MPV、PDW、PLCR與正常組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)(P＞0.05);HLD患者肝型、腦型、腦內(nèi)臟型3種臨床分型血常規(guī)分析:3種臨床分型以WBC、RBC、HGB、PLT水平降低比較明顯，其中腦內(nèi)臟型患者WBC、PLT低于標(biāo)準(zhǔn)的異常率明顯高于其他兩組。結(jié)論HLD患者血細(xì)胞各項(xiàng)指標(biāo)均有異常，對(duì)臨床的診斷、治療有指導(dǎo)價(jià)值。

肝豆?fàn)詈俗冃?靜脈血細(xì)胞;白細(xì)胞;血小板

血細(xì)胞分析儀具有準(zhǔn)確、快捷等優(yōu)點(diǎn)，在臨床中得到廣泛應(yīng)用，為臨床診斷和治療提供了可靠的實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。肝豆?fàn)詈俗冃?hepatolenticular degeneration，HLD)是一種常染色體隱性遺傳性銅代謝障礙疾病，其發(fā)病機(jī)制為銅離子在機(jī)體各個(gè)組織的慢性沉積，而尤其以肝臟和大腦豆?fàn)詈说炔课欢嘁姡灾鲁霈F(xiàn)以肝臟和(或)腦的損害為主的臨床表現(xiàn)。既往有文獻(xiàn)［1，2］對(duì)肝豆?fàn)詈俗冃缘幕颊呤褂萌诸愌?xì)胞分析儀進(jìn)行血細(xì)胞分析，目前很少有關(guān)于五分類血細(xì)胞分析儀分析HLD靜脈血的相關(guān)報(bào)道，考慮驅(qū)銅藥物大多有抑制白細(xì)胞、血小板的作用，故筆者對(duì)2011年10月至2013年2月首次入院的HLD患者使用五分類血細(xì)胞分析儀進(jìn)行血細(xì)胞分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 HLD組為首次入院的493例(男性300例，女性193例)患者，年齡3～58歲，平均(20.09±9.21)歲;病程最短為2 d，最長(zhǎng)為29年。采用楊任民HLD分型標(biāo)準(zhǔn)［3］分為肝型161例、腦型252例、腦內(nèi)臟混合型80例，所有病例均符合HLD診斷標(biāo)準(zhǔn)。正常對(duì)照組為153例同期體檢健康者，其中男性57例，女性96例;年齡19～83歲，平均(30.39±9.46)歲;體檢時(shí)無(wú)炎癥或病毒感染，肝腎功能正常、甲肝抗體、乙肝7項(xiàng)、丙肝抗體均為陰性，B超檢查無(wú)肝脾腫大;在體檢前1周內(nèi)未服用影響血常規(guī)的藥物。

1.2 研究方法

1.2.1 標(biāo)本采集 HLD患者為入院后第2天早晨空腹、治療前采集靜脈血2 mL，置于含K2-EDTA真空采血管中立即混勻8次，室溫下保存，4 h內(nèi)完成檢測(cè)。正常對(duì)照者為早晨空腹采集的靜脈血。

1.2.2 檢測(cè)儀器 日本sysmex XT-2000，所用的稀釋液和溶血素為sysmex原裝配套試劑。

1.2.3 質(zhì)量控制 檢測(cè)儀器經(jīng)sysmex提供的配套質(zhì)控物高、中、低值測(cè)定均在控后，再檢測(cè)血標(biāo)本。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用 SPSS 17.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。計(jì)量數(shù)據(jù)采用±s表示，若符合正態(tài)分布，組間比較使用方差分析。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HLD組與正常對(duì)照組靜脈血細(xì)胞分析的比較HLD 組 WBC、NEUT%、RBC、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、PLT、PCT與正常對(duì)照組比較均顯著降低，而LYMPH%、MONO%、EO%、RDW-CV%與正常組相比均升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。MPV、PDW、PLCR與正常組比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。詳見表1。

表1 HLD組與正常對(duì)照組靜脈血細(xì)胞分析的比較(±s)

表1 HLD組與正常對(duì)照組靜脈血細(xì)胞分析的比較(±s)

注:與對(duì)照組比較，*P＜0.05

項(xiàng)目 HLD組(n=493) 正常對(duì)照組(n=153)WBC(×109/L) 4.96 ±1.99*5.97 ±1.43 NEUT% 52.06 ±11.54* 56.14 ±7.81 LYMPH% 37.40 ±10.76* 35.27 ±7.29 MONO% 7.50 ±2.46* 6.04 ±1.50 EO% 2.83 ±3.58* 2.26 ±2.03 BASO% 0.34 ±0.26* 0.29 ±0.17 RBC(×1012/L) 4.44 ±0.56* 4.69 ±0.47 HGb(g/L) 127.37 ±14.59* 139.34 ±14.54 HCT% 38.97 ±4.23* 41.94 ±3.77 MCV(fL) 88.36 ±5.82* 89.73 ±4.52 MCH(pg) 28.87 ±2.10* 29.79 ±1.79 MCHC(g/L) 326.73 ±9.61* 331.87 ±9.18 RDW －SD(fL) 42.13 ±4.80* 40.99 ±2.66 RDW-CV% 13.67 ±8.00* 12.73 ±1.08 PLT(×109/L) 157.14 ±85.94* 208.59 ±49.82 PCT% 0.17 ±0.08* 0.23 ±0.05 MPV(fL) 11.38 ±1.17 11.21 ±1.02 PDW(fL) 14.41 ±2.86 14.31 ±2.66 PLCR% 35.16 ±8.27 34.26 ±7.09

2.2 HLD患者肝型、腦型、腦內(nèi)臟型3種臨床分型血常規(guī)分析 3種臨床分型以WBC、RBC、HGB、PLT水平降低比較明顯，其中腦內(nèi)臟型患者WBC、PLT低于標(biāo)準(zhǔn)的異常率明顯高于其他兩組，考慮其與神經(jīng)系統(tǒng)及肝臟、腎臟、脾臟等多個(gè)臟器損害有關(guān)。肝型、腦型、腦內(nèi)臟型三者之間兩兩比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的為NEUT%、HGB、PCT(P ＜0.05);肝型與腦型、肝型與腦-內(nèi)臟型比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的為 LYMPH%、MPV、PLCR、PDW、RDWSD(P ＜0.05);肝型與腦-內(nèi)臟型、腦型與腦內(nèi)臟型比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的為WBC、RDWCV、MONO(P ＜0.05)、PLT(P ＜0.05)。詳見表2。

表2 HLD患者3種臨床分型靜脈血細(xì)胞分析的比較(±s)

表2 HLD患者3種臨床分型靜脈血細(xì)胞分析的比較(±s)

注:與肝型相比，*P＜0.05;與腦型相比，#P＜0.05

項(xiàng)目 肝型(n=161) 腦型(n=252) 腦內(nèi)臟型(n=80)WBC(×109/L) 5.27 ±2.30 4.86 ±1.70 4.63 ±2.12*#NEUT% 45.70 ±11.40 55.97 ±9.65* 52.14 ±12.03*#LYMPH% 43.08 ±11.10 34.13 ±9.05* 36.27 ±10.49*MONO% 7.33 ±2.13 7.24 ±1.99 8.66 ±3.77*#EO% 3.31 ±2.33 2.60 ±4.48 2.61 ±2.05 BASO% 0.40 ±0.26 0.30 ±0.23 0.33 ±0.31 RBC(×1012/L) 4.33 ±0.61 4.53 ±0.48 4.36 ±0.66 HGb(g/L) 122.84 ±13.88 130.54 ±13.13*126.46 ±17.67*#HCT% 37.51 ±3.95 40.03 ±3.78 38.56 ±5.14 MCV(fL) 87.53 ±6.62 88.65 ±4.89 89.11 ±6.61 MCH(pg) 28.64 ±2.25 28.90 ±1.71 29.23 ±2.76 MCHC(g/L) 327.35 ±9.74 326.02 ±8.74 327.75 ±11.70 RDW-SD(fL) 41.93 ±5.54 41.53 ±3.54* 44.47 ±5.91*RDW-CV% 13.40 ±1.30 13.74 ±11.11 13.99 ±1.77*#PLT(×109/L)194.89 ±105.18 141.44 ±58.31 130.60 ±91.60*#PCT% 0.20 ±0.10 0.16 ±0.06* 0.15 ±0.10*#MPV(fL) 11.01 ±1.19 11.55 ±1.13* 11.59 ±1.07*PDW(fL) 13.48 ±2.83 14.78 ±2.78* 15.06 ±2.78*PLCR% 32.42 ±8.51 36.37 ±7.85* 36.84 ±7.77*

2.3 HLD患者血常規(guī)異常率 493例HLD患者中低于正常參考標(biāo)準(zhǔn)［4］的 WBC、RBC、HGb和 PLT的例數(shù)分別為 103例(21.0%)、41例 (8.3%)、79例(16.0%)和131例(26.6%)。最低點(diǎn)WBC計(jì)數(shù)為1.2×109/L，PLT計(jì)數(shù)為25×109/L。

2.4 HLD患者3種臨床分型血常規(guī)異常率 在肝型、腦型和腦內(nèi)臟型3種臨床分型HLD患者中:WBC低于正常參考標(biāo)準(zhǔn)的分別有28例(17.4%)、45例(17.8%)和27例(33.8%);HGb低于正常參考標(biāo)準(zhǔn)的分別有 32例(19.9%)、26例(10.3%)和 18例(22.5%)，PLT低于正常參考標(biāo)準(zhǔn)的分別有37例(23.0%)、57例(22.6%)和33例(41.3%)。腦內(nèi)臟型患者血常規(guī)異常率明顯高于其他兩型。

3 討論

HLD患者由于ATP7B基因突變導(dǎo)致P型銅轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶功能喪失，使得銅原子無(wú)法與脫輔基的銅藍(lán)蛋白結(jié)合形成全銅藍(lán)蛋白，引起銅藍(lán)蛋白合成障礙以及膽汁中銅排泄受限致使銅在細(xì)胞漿內(nèi)過(guò)量沉積，而引起各種肝臟、腎臟損害及神經(jīng)、精神癥狀等臨床表現(xiàn)［5］。HLD的實(shí)驗(yàn)室診斷指標(biāo)［6］主要為血清銅、銅藍(lán)蛋白、銅氧化酶、尿銅、肝活檢、角膜K-F環(huán)及影像學(xué)改變。本研究旨在探討血細(xì)胞分析是否可能作為HLD患者疾病嚴(yán)重程度和療效判斷的輔助指標(biāo)。

本結(jié)果顯示，HLD 患者 WBC、RBC、HGB、PLT水平均低于正常對(duì)照組。HLD患者肝臟損害使得凝血因子及血小板減少。肝臟損害后影響食欲，長(zhǎng)期導(dǎo)致造血物質(zhì)攝入不足，肝功能嚴(yán)重?fù)p害者常合并慢性失血，引起貧血。HLD患者銅代謝存在異常，銅的生理過(guò)程參與影響造血功能，而銅藍(lán)蛋白可促進(jìn)鐵從細(xì)胞內(nèi)進(jìn)入血液中，影響鐵代謝，有研究指出［7，8］HLD 存在鐵代謝異常，鐵過(guò)載等可抑制骨髓造血功能，當(dāng)肝細(xì)胞損傷或壞死時(shí)，貯存鐵(鐵蛋白和舍鐵血黃素)從損傷的肝細(xì)胞溢出并進(jìn)入血液。

胡紀(jì)源等［9］報(bào)道，HLD患者脾大、脾功能亢進(jìn)及肝大發(fā)生率明顯高于正常人，脾功能亢進(jìn)后衰老的細(xì)胞易受氧化劑、金屬離子的影響，使其易在脾內(nèi)被單核-吞噬細(xì)胞系統(tǒng)所破壞和吞噬，影響白細(xì)胞和紅細(xì)胞并使其降低。脾腫大時(shí)，血漿總?cè)萘靠赡軙?huì)增加，因此血液被稀釋而致血細(xì)胞減少。同時(shí)脾功能亢進(jìn)可能致使紅細(xì)胞破壞增加，鐵從紅細(xì)胞中釋放，以致周圍血中紅細(xì)胞明顯減少，外周血中鐵濃度顯著增加［10］。血小板主要來(lái)自于骨髓中的巨核細(xì)胞，2/3存在于血液循環(huán)中，其他存在于脾臟等血管外組織，兩者間自由交換，主要可參與止血機(jī)制并發(fā)揮重要作用。血小板的生成下降、破壞增多和血液稀釋可導(dǎo)致其減少。脾臟是血小板破壞發(fā)生的主要場(chǎng)所。蔣孝華等［11］指出脾臟大小與血小板呈負(fù)相關(guān)。脾臟腫大導(dǎo)致功能增加，由此產(chǎn)生血小板數(shù)量的減少［12］。楊軻勇等［13］報(bào)道，脾臟增大及自身抗體產(chǎn)生，兩者共同作用導(dǎo)致血小板減少。因此HLD患者脾功能亢進(jìn)時(shí)可影響其靜脈血白細(xì)胞、紅細(xì)胞及血小板等水平。

HLD 3種臨床分型比較時(shí)，腦內(nèi)臟型患者PLT低于標(biāo)準(zhǔn)的異常率明顯高于其他兩組。本研究為首診患者，入組患者中肝型患者部分僅為肝功能損害，對(duì)PLT無(wú)明顯影響。腦型入組患者無(wú)明顯肝功能異常及脾功能亢進(jìn)，入組以神經(jīng)癥狀為主，對(duì)PLT無(wú)明顯影響。而腦內(nèi)臟型患者則同時(shí)累及神經(jīng)系統(tǒng)及肝臟、腎臟、脾臟等多個(gè)臟器，PLT的減低可能與脾功能亢進(jìn)、及癥狀較重患者免疫力低下等相關(guān)。

HLD是發(fā)病率較高的可治性遺傳病，需長(zhǎng)期或終身服藥，而目前的驅(qū)銅藥如青霉胺、二巰丁二酸等常引起白細(xì)胞及血小板降低，影響療效和預(yù)后，所以需在臨床治療時(shí)定時(shí)復(fù)查血常規(guī)。HLD患者常存在血常規(guī)指標(biāo)的異常，當(dāng)不明原因的白細(xì)胞、血小板降低，或貧血，且同時(shí)合并肝功能損害時(shí)，需考慮HLD。HLD患者血常規(guī)對(duì)臨床的診斷、治療有指導(dǎo)價(jià)值。

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Analysis of routine blood test in patients with hepato-lenticular degeneration

Fang Mingjuan，Yang Renmin，Wu Junxia，et al
Affiliated Neurological Hospital of Anhui University of Chinese Medicine，Hefei 230061，China

ObjectiveTo observe the change of routine blood test indicators＇levels in patients with hepato-lenticular degeneration and to discuss the underlying pathomechanism.MethodsNineteen items of routine blood were tested with sysmex XT-2000 blood analyzer in the experimental group of patients with HLD(n=493)and the control group of healthy people(n=153).ResultsThe levels of WBC，NEUT%，RBC，HGB，HCT，MCV，MCH，MCHC，PLT，PCT of HLD patients were significantly below the normal range.The levels of LYMPH%，MONO%，EO%，RDW-CV were significantly higher than the normal range，they showed the difference compared with normal control(P ＜0.01)，while no difference in MPV，PDW，PLCR(P ＜0.05).Routine blood test analysis of three clinical types of HLD:WBC，RBC，HGB，PLT levels of three clinical types were decreased obviously;the abnormal rate of brain-viscus type's WBC and PLT levels lower than the standard was higher than that in the other two groups;it was related with the nervous system and the liver，kidney，spleen and other multiple organ damage.ConclusionIndicators of HLD's routine blood are abnormal，which may guide the clinical diagnosis and treatment.

Hepato-lenticular degeneration;Venous blood cell;White blood cell;Platelet

10.3969/j.issn.1000 －0399.2015.05.002

國(guó)家自然科學(xué)基金資助面上項(xiàng)目(編號(hào):81473535)

230061 合肥 安徽中醫(yī)藥大學(xué)神經(jīng)病學(xué)研究所附屬醫(yī)院

楊任民，yrm724120@sina.com

(2014－11－14收稿 2015－03－12修回)