趙巍

[摘要] 目的 對不同產(chǎn)地黃芩樣品中的主要有效成分進(jìn)行對比研究。 方法 分別選取河北、內(nèi)蒙古、甘肅三產(chǎn)地的黃芩樣品進(jìn)行分析，選用HPLC法對三組樣品進(jìn)行重復(fù)性、穩(wěn)定性、回收率、線性關(guān)系考察及樣品含量測定。 結(jié)果 三個(gè)產(chǎn)地的黃芩樣品都具有很好的重復(fù)性、穩(wěn)定性、回收率，黃芩樣品中黃芩苷、漢黃芩苷的含量 河北>內(nèi)蒙古>甘肅，而黃芩素、漢黃芩素的含量內(nèi)蒙古>河北>甘肅。 結(jié)論 不同產(chǎn)地的黃芩樣品中的主要成分不同，在制劑中應(yīng)根據(jù)不同作用選擇合適產(chǎn)地的黃芩入藥。

[關(guān)鍵詞] 黃芩苷；漢黃芩苷：黃芩素；漢黃芩素

[中圖分類號] R284.2 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] B [文章編號] 2095-0616（2014）23-79-03

資料顯示[1]，黃芩別名山茶根、土金茶根，是唇形科黃芩屬的一種多年生草本植物，藥用部位取其干燥根，味苦、性寒、有清熱燥濕、瀉火解毒、止血、安胎功效。黃芩的臨床抗菌應(yīng)用效果優(yōu)于黃連，并且沒有抗藥性，故在臨床上應(yīng)用廣泛[2]。藥用中應(yīng)用的黃芩主要成分有黃芩素、漢黃芩素、黃芩苷、漢黃芩苷等，但由于產(chǎn)地不同，會(huì)導(dǎo)致黃芩中的成分的差異[3]，現(xiàn)對常用的河北、內(nèi)蒙、甘肅三產(chǎn)地黃芩進(jìn)行含量測定比較，將結(jié)果報(bào)道如下。

1 實(shí)驗(yàn)儀器與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑

Agilentl10高效液相色譜儀（配DAD檢測器），色譜柱：DiamondC柱（以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑）；測定黃芩中苷類以甲醇-水-磷酸（47∶53∶0.2）為流動(dòng)相；測定苷元類用甲醇-乙腈-0.4%的冰醋酸水溶液（30∶20∶50）為流動(dòng)相；檢測波長為280nm；流速10mL·min-1，柱溫25℃，理論板數(shù)按黃芩苷峰計(jì)算應(yīng)不低于2500。甲醇（色譜純）；磷酸（分析純）；水為超純水；對照品黃芩苷、漢黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素均購自中國藥品生物制品檢定所，純度為99%。

藥材黃芩藥材分別選自河北、內(nèi)蒙古、甘肅三地，經(jīng)吉林省食品藥品檢驗(yàn)所鑒定均為唇形科植物黃芩的干燥根。

1.2 方法

1.2.1 對照品溶液的制備 分別精密稱取在60℃減壓干燥4h的黃芩素、漢黃芩素、黃芩苷、漢黃芩苷對照品適量，精密稱定，分別加甲醇制成每lmL含60μg的溶液，用微孔濾膜過濾得對照品溶液。

1.2.2 供試品溶液的制備 參照2010版藥典標(biāo)準(zhǔn)[4]，黃芩苷、漢黃芩苷供試品制備[5]：選自三個(gè)產(chǎn)地的黃芩分別在60℃減壓干燥至恒重，過40目篩，精密稱取樣品0.3g。經(jīng)加熱回流、過濾、定容等操作制得供試品溶液。黃芩素、漢黃芩素供試品制備[6]：精密稱取三產(chǎn)地的黃芩樣品各自0.3g，過40目篩，60℃減壓干燥至恒重，經(jīng)提取、蒸發(fā)、溶解、定容等步驟制得。

1.2.3 重復(fù)性實(shí)驗(yàn) 取同一批次樣品3份，按照上述供試品配制方法進(jìn)行制備。

1.2.4 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 取供試品溶液，分別于0、2、4、8、16h進(jìn)樣10μL，分別記錄峰面積。

1.2.5 回收率實(shí)驗(yàn) 精密稱取4份過40目篩的60℃減壓干燥至恒重的黃芩樣品0.15g，分別精密稱取黃芩素、漢黃芩素、黃芩苷、漢黃芩苷對照品0.15g，按照2.2方法每份樣品制成5份，測定4種主要成分的峰面積。

1.2.6 線性關(guān)系考察 線性關(guān)系考察：分別將4種對照品溶液1、2、3、4、5、6μL，依次進(jìn)樣。

1.2.7 樣品含量測定 用液相攝譜儀，測定峰面積，帶入回歸方程計(jì)算含量，取3次測定結(jié)果的平均值。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料采用x2檢驗(yàn)，P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 重復(fù)性試驗(yàn)

按2.7方法進(jìn)行測定，依據(jù)結(jié)果計(jì)算RSD<3%，說明樣品重復(fù)性很好。

2.2 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)

黃芩素、漢黃芩素、黃芩苷、漢黃芩苷RSD值分別為0.76%、0.97%、1.12%、0.62%，表明供試品在制備后16h內(nèi)穩(wěn)定。

2.3 回收率實(shí)驗(yàn)

測定黃芩苷、漢黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素的峰面積。平均回收率分別為99.6%、98.7%、99.5%、99.1%，RSD分別為0.89%、1.64%、0.96%、1.25%。

2.4 線性關(guān)系考察

得線性回歸方程，見表1。

2.5 樣品含量測定

用液相攝譜儀，測定峰面積，帶入回歸方程計(jì)算含量，取3次測定結(jié)果的平均值，P<0.05，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，見表2。

由表可看出：黃芩樣品中黃芩苷、漢黃芩苷的含量 河北>內(nèi)蒙古>甘肅，而黃芩素、漢黃芩素的含量內(nèi)蒙古>河北>甘肅，P<0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 討論

中藥黃芩為多年生草本，根莖肥厚，肉質(zhì)，徑達(dá)2cm，伸長而分枝。黃芩抗旱力較強(qiáng)[7-8]。遇嚴(yán)重干旱或追肥后可適當(dāng)澆水，一般不用常澆水。主要分布在中國河北、山西北部、內(nèi)蒙古中東部及東北三省大部[9]。黃芩中含有多種黃酮類化合物，其主要活性成分是黃芩苷、漢黃芩苷、黃芩素和漢黃芩素。其活性成分的多寡也是評價(jià)黃芩優(yōu)劣的指標(biāo)[10-11]。

現(xiàn)代藥理學(xué)指出，黃芩具有抗炎、抗菌、抗病毒、鎮(zhèn)靜、解毒、解熱、降壓等功效，黃芩煮水又具有清熱止血效果，此外黃芩配山梔、桔梗、當(dāng)歸、人參等制成湯劑對糖尿病也有一定的療效，在臨床應(yīng)用比較廣泛。由于黃芩生長的地理位置，光照、土壤酸堿度及溫度等因素的影響，所以不同產(chǎn)地的黃芩藥材中的主要有效成分也有所差別[12]。

故本研究選取河北、內(nèi)蒙古、甘肅三產(chǎn)地黃芩樣品，按照《中國藥典》2010版一部標(biāo)準(zhǔn)，對三產(chǎn)地樣品進(jìn)行黃芩素、漢黃芩素、黃芩苷、漢黃芩苷有效成分的測定，測定結(jié)果顯示黃芩樣品中黃芩苷、漢黃芩苷的含量河北>內(nèi)蒙古>甘肅，而黃芩素、漢黃芩素的含量內(nèi)蒙古>河北>甘肅，所以根據(jù)研究結(jié)果在臨床制劑中應(yīng)根據(jù)不同藥用作用選擇合適產(chǎn)地的黃芩入藥。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 劉紅宇，廖建萍，周新蓓，等.不同產(chǎn)地的黃芩野生藥材與栽培藥材質(zhì)量比較[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2010，7（25）：37-39.

[2] 國家藥典委員會(huì).中國藥典：一部[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：282.

[3] 田建紅.不同產(chǎn)地黃芩中的有效成份含量分析[J].海峽藥學(xué)，2009，21（3）：57-59.

[4] 馬嘉，李蔚，韓晗.不同產(chǎn)地黃芩的質(zhì)量對比[J].安徽醫(yī)藥，2012，16（2）：1759-1761.

[5] 徐丹洋，陳佩東，張麗，等.黃芩的化學(xué)成分研究[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2011，17（1）：78-80.

[6] 丁芳林，張雯杰，陳波，等.HPLC測定不同產(chǎn)地黃芩中黃酮化合物的含量[J].中國現(xiàn)代中藥，2008，10（7）：25-27.

[7] 李韋，李化，楊濱，等.栽培黃芩和野生黃芩化學(xué)成分比較研究[J].中國中藥雜志，2008，33（12）：1425-1428.

[8] 李玉山.黃芩的化學(xué)成分及黃芩苷的提取方法[J].西北藥學(xué)雜志，2008，23（6）：410-411.

[9] 劉慧明.高效液相色譜技術(shù)及其在藥物分析中的應(yīng)用[J].中國現(xiàn)代醫(yī)生，2007，45（20）：152-154.

[10] 溫華珍，肖盛元，王義明，等.HPLC法測定不同規(guī)格并頭黃芩的黃芩苷和漢黃芩苷含量J].中草藥，2005，36（4）：600-602.

[11] 趙亮，王新霞，呂磊，等.HPLC法測定清肝散結(jié)顆粒中黃芩苷、漢黃芩苷、野黃芩苷、黃芩素及漢黃芩素[J]. 中成藥，2014，36（2）：313-318.

[12] 李春紅，梅志強(qiáng)，何兵，等.HPLC同時(shí)測定龍膽瀉肝制劑中黃芩苷、漢黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素的含量[J].生物學(xué)通報(bào)，2012，47（4）：60-62.

（收稿日期：2014-10-21）endprint

[摘要] 目的 對不同產(chǎn)地黃芩樣品中的主要有效成分進(jìn)行對比研究。 方法 分別選取河北、內(nèi)蒙古、甘肅三產(chǎn)地的黃芩樣品進(jìn)行分析，選用HPLC法對三組樣品進(jìn)行重復(fù)性、穩(wěn)定性、回收率、線性關(guān)系考察及樣品含量測定。 結(jié)果 三個(gè)產(chǎn)地的黃芩樣品都具有很好的重復(fù)性、穩(wěn)定性、回收率，黃芩樣品中黃芩苷、漢黃芩苷的含量 河北>內(nèi)蒙古>甘肅，而黃芩素、漢黃芩素的含量內(nèi)蒙古>河北>甘肅。 結(jié)論 不同產(chǎn)地的黃芩樣品中的主要成分不同，在制劑中應(yīng)根據(jù)不同作用選擇合適產(chǎn)地的黃芩入藥。

[關(guān)鍵詞] 黃芩苷；漢黃芩苷：黃芩素；漢黃芩素

[中圖分類號] R284.2 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] B [文章編號] 2095-0616（2014）23-79-03

資料顯示[1]，黃芩別名山茶根、土金茶根，是唇形科黃芩屬的一種多年生草本植物，藥用部位取其干燥根，味苦、性寒、有清熱燥濕、瀉火解毒、止血、安胎功效。黃芩的臨床抗菌應(yīng)用效果優(yōu)于黃連，并且沒有抗藥性，故在臨床上應(yīng)用廣泛[2]。藥用中應(yīng)用的黃芩主要成分有黃芩素、漢黃芩素、黃芩苷、漢黃芩苷等，但由于產(chǎn)地不同，會(huì)導(dǎo)致黃芩中的成分的差異[3]，現(xiàn)對常用的河北、內(nèi)蒙、甘肅三產(chǎn)地黃芩進(jìn)行含量測定比較，將結(jié)果報(bào)道如下。

1 實(shí)驗(yàn)儀器與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑

Agilentl10高效液相色譜儀（配DAD檢測器），色譜柱：DiamondC柱（以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑）；測定黃芩中苷類以甲醇-水-磷酸（47∶53∶0.2）為流動(dòng)相；測定苷元類用甲醇-乙腈-0.4%的冰醋酸水溶液（30∶20∶50）為流動(dòng)相；檢測波長為280nm；流速10mL·min-1，柱溫25℃，理論板數(shù)按黃芩苷峰計(jì)算應(yīng)不低于2500。甲醇（色譜純）；磷酸（分析純）；水為超純水；對照品黃芩苷、漢黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素均購自中國藥品生物制品檢定所，純度為99%。

藥材黃芩藥材分別選自河北、內(nèi)蒙古、甘肅三地，經(jīng)吉林省食品藥品檢驗(yàn)所鑒定均為唇形科植物黃芩的干燥根。

1.2 方法

1.2.1 對照品溶液的制備 分別精密稱取在60℃減壓干燥4h的黃芩素、漢黃芩素、黃芩苷、漢黃芩苷對照品適量，精密稱定，分別加甲醇制成每lmL含60μg的溶液，用微孔濾膜過濾得對照品溶液。

1.2.2 供試品溶液的制備 參照2010版藥典標(biāo)準(zhǔn)[4]，黃芩苷、漢黃芩苷供試品制備[5]：選自三個(gè)產(chǎn)地的黃芩分別在60℃減壓干燥至恒重，過40目篩，精密稱取樣品0.3g。經(jīng)加熱回流、過濾、定容等操作制得供試品溶液。黃芩素、漢黃芩素供試品制備[6]：精密稱取三產(chǎn)地的黃芩樣品各自0.3g，過40目篩，60℃減壓干燥至恒重，經(jīng)提取、蒸發(fā)、溶解、定容等步驟制得。

1.2.3 重復(fù)性實(shí)驗(yàn) 取同一批次樣品3份，按照上述供試品配制方法進(jìn)行制備。

1.2.4 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 取供試品溶液，分別于0、2、4、8、16h進(jìn)樣10μL，分別記錄峰面積。

1.2.5 回收率實(shí)驗(yàn) 精密稱取4份過40目篩的60℃減壓干燥至恒重的黃芩樣品0.15g，分別精密稱取黃芩素、漢黃芩素、黃芩苷、漢黃芩苷對照品0.15g，按照2.2方法每份樣品制成5份，測定4種主要成分的峰面積。

1.2.6 線性關(guān)系考察 線性關(guān)系考察：分別將4種對照品溶液1、2、3、4、5、6μL，依次進(jìn)樣。

1.2.7 樣品含量測定 用液相攝譜儀，測定峰面積，帶入回歸方程計(jì)算含量，取3次測定結(jié)果的平均值。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料采用x2檢驗(yàn)，P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 重復(fù)性試驗(yàn)

按2.7方法進(jìn)行測定，依據(jù)結(jié)果計(jì)算RSD<3%，說明樣品重復(fù)性很好。

2.2 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)

黃芩素、漢黃芩素、黃芩苷、漢黃芩苷RSD值分別為0.76%、0.97%、1.12%、0.62%，表明供試品在制備后16h內(nèi)穩(wěn)定。

2.3 回收率實(shí)驗(yàn)

測定黃芩苷、漢黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素的峰面積。平均回收率分別為99.6%、98.7%、99.5%、99.1%，RSD分別為0.89%、1.64%、0.96%、1.25%。

2.4 線性關(guān)系考察

得線性回歸方程，見表1。

2.5 樣品含量測定

用液相攝譜儀，測定峰面積，帶入回歸方程計(jì)算含量，取3次測定結(jié)果的平均值，P<0.05，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，見表2。

由表可看出：黃芩樣品中黃芩苷、漢黃芩苷的含量 河北>內(nèi)蒙古>甘肅，而黃芩素、漢黃芩素的含量內(nèi)蒙古>河北>甘肅，P<0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 討論

中藥黃芩為多年生草本，根莖肥厚，肉質(zhì)，徑達(dá)2cm，伸長而分枝。黃芩抗旱力較強(qiáng)[7-8]。遇嚴(yán)重干旱或追肥后可適當(dāng)澆水，一般不用常澆水。主要分布在中國河北、山西北部、內(nèi)蒙古中東部及東北三省大部[9]。黃芩中含有多種黃酮類化合物，其主要活性成分是黃芩苷、漢黃芩苷、黃芩素和漢黃芩素。其活性成分的多寡也是評價(jià)黃芩優(yōu)劣的指標(biāo)[10-11]。

現(xiàn)代藥理學(xué)指出，黃芩具有抗炎、抗菌、抗病毒、鎮(zhèn)靜、解毒、解熱、降壓等功效，黃芩煮水又具有清熱止血效果，此外黃芩配山梔、桔梗、當(dāng)歸、人參等制成湯劑對糖尿病也有一定的療效，在臨床應(yīng)用比較廣泛。由于黃芩生長的地理位置，光照、土壤酸堿度及溫度等因素的影響，所以不同產(chǎn)地的黃芩藥材中的主要有效成分也有所差別[12]。

故本研究選取河北、內(nèi)蒙古、甘肅三產(chǎn)地黃芩樣品，按照《中國藥典》2010版一部標(biāo)準(zhǔn)，對三產(chǎn)地樣品進(jìn)行黃芩素、漢黃芩素、黃芩苷、漢黃芩苷有效成分的測定，測定結(jié)果顯示黃芩樣品中黃芩苷、漢黃芩苷的含量河北>內(nèi)蒙古>甘肅，而黃芩素、漢黃芩素的含量內(nèi)蒙古>河北>甘肅，所以根據(jù)研究結(jié)果在臨床制劑中應(yīng)根據(jù)不同藥用作用選擇合適產(chǎn)地的黃芩入藥。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 劉紅宇，廖建萍，周新蓓，等.不同產(chǎn)地的黃芩野生藥材與栽培藥材質(zhì)量比較[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2010，7（25）：37-39.

[2] 國家藥典委員會(huì).中國藥典：一部[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：282.

[3] 田建紅.不同產(chǎn)地黃芩中的有效成份含量分析[J].海峽藥學(xué)，2009，21（3）：57-59.

[4] 馬嘉，李蔚，韓晗.不同產(chǎn)地黃芩的質(zhì)量對比[J].安徽醫(yī)藥，2012，16（2）：1759-1761.

[5] 徐丹洋，陳佩東，張麗，等.黃芩的化學(xué)成分研究[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2011，17（1）：78-80.

[6] 丁芳林，張雯杰，陳波，等.HPLC測定不同產(chǎn)地黃芩中黃酮化合物的含量[J].中國現(xiàn)代中藥，2008，10（7）：25-27.

[7] 李韋，李化，楊濱，等.栽培黃芩和野生黃芩化學(xué)成分比較研究[J].中國中藥雜志，2008，33（12）：1425-1428.

[8] 李玉山.黃芩的化學(xué)成分及黃芩苷的提取方法[J].西北藥學(xué)雜志，2008，23（6）：410-411.

[9] 劉慧明.高效液相色譜技術(shù)及其在藥物分析中的應(yīng)用[J].中國現(xiàn)代醫(yī)生，2007，45（20）：152-154.

[10] 溫華珍，肖盛元，王義明，等.HPLC法測定不同規(guī)格并頭黃芩的黃芩苷和漢黃芩苷含量J].中草藥，2005，36（4）：600-602.

[11] 趙亮，王新霞，呂磊，等.HPLC法測定清肝散結(jié)顆粒中黃芩苷、漢黃芩苷、野黃芩苷、黃芩素及漢黃芩素[J]. 中成藥，2014，36（2）：313-318.

[12] 李春紅，梅志強(qiáng)，何兵，等.HPLC同時(shí)測定龍膽瀉肝制劑中黃芩苷、漢黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素的含量[J].生物學(xué)通報(bào)，2012，47（4）：60-62.

（收稿日期：2014-10-21）endprint

[摘要] 目的 對不同產(chǎn)地黃芩樣品中的主要有效成分進(jìn)行對比研究。 方法 分別選取河北、內(nèi)蒙古、甘肅三產(chǎn)地的黃芩樣品進(jìn)行分析，選用HPLC法對三組樣品進(jìn)行重復(fù)性、穩(wěn)定性、回收率、線性關(guān)系考察及樣品含量測定。 結(jié)果 三個(gè)產(chǎn)地的黃芩樣品都具有很好的重復(fù)性、穩(wěn)定性、回收率，黃芩樣品中黃芩苷、漢黃芩苷的含量 河北>內(nèi)蒙古>甘肅，而黃芩素、漢黃芩素的含量內(nèi)蒙古>河北>甘肅。 結(jié)論 不同產(chǎn)地的黃芩樣品中的主要成分不同，在制劑中應(yīng)根據(jù)不同作用選擇合適產(chǎn)地的黃芩入藥。

[關(guān)鍵詞] 黃芩苷；漢黃芩苷：黃芩素；漢黃芩素

[中圖分類號] R284.2 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] B [文章編號] 2095-0616（2014）23-79-03

資料顯示[1]，黃芩別名山茶根、土金茶根，是唇形科黃芩屬的一種多年生草本植物，藥用部位取其干燥根，味苦、性寒、有清熱燥濕、瀉火解毒、止血、安胎功效。黃芩的臨床抗菌應(yīng)用效果優(yōu)于黃連，并且沒有抗藥性，故在臨床上應(yīng)用廣泛[2]。藥用中應(yīng)用的黃芩主要成分有黃芩素、漢黃芩素、黃芩苷、漢黃芩苷等，但由于產(chǎn)地不同，會(huì)導(dǎo)致黃芩中的成分的差異[3]，現(xiàn)對常用的河北、內(nèi)蒙、甘肅三產(chǎn)地黃芩進(jìn)行含量測定比較，將結(jié)果報(bào)道如下。

1 實(shí)驗(yàn)儀器與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑

Agilentl10高效液相色譜儀（配DAD檢測器），色譜柱：DiamondC柱（以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑）；測定黃芩中苷類以甲醇-水-磷酸（47∶53∶0.2）為流動(dòng)相；測定苷元類用甲醇-乙腈-0.4%的冰醋酸水溶液（30∶20∶50）為流動(dòng)相；檢測波長為280nm；流速10mL·min-1，柱溫25℃，理論板數(shù)按黃芩苷峰計(jì)算應(yīng)不低于2500。甲醇（色譜純）；磷酸（分析純）；水為超純水；對照品黃芩苷、漢黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素均購自中國藥品生物制品檢定所，純度為99%。

藥材黃芩藥材分別選自河北、內(nèi)蒙古、甘肅三地，經(jīng)吉林省食品藥品檢驗(yàn)所鑒定均為唇形科植物黃芩的干燥根。

1.2 方法

1.2.1 對照品溶液的制備 分別精密稱取在60℃減壓干燥4h的黃芩素、漢黃芩素、黃芩苷、漢黃芩苷對照品適量，精密稱定，分別加甲醇制成每lmL含60μg的溶液，用微孔濾膜過濾得對照品溶液。

1.2.2 供試品溶液的制備 參照2010版藥典標(biāo)準(zhǔn)[4]，黃芩苷、漢黃芩苷供試品制備[5]：選自三個(gè)產(chǎn)地的黃芩分別在60℃減壓干燥至恒重，過40目篩，精密稱取樣品0.3g。經(jīng)加熱回流、過濾、定容等操作制得供試品溶液。黃芩素、漢黃芩素供試品制備[6]：精密稱取三產(chǎn)地的黃芩樣品各自0.3g，過40目篩，60℃減壓干燥至恒重，經(jīng)提取、蒸發(fā)、溶解、定容等步驟制得。

1.2.3 重復(fù)性實(shí)驗(yàn) 取同一批次樣品3份，按照上述供試品配制方法進(jìn)行制備。

1.2.4 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 取供試品溶液，分別于0、2、4、8、16h進(jìn)樣10μL，分別記錄峰面積。

1.2.5 回收率實(shí)驗(yàn) 精密稱取4份過40目篩的60℃減壓干燥至恒重的黃芩樣品0.15g，分別精密稱取黃芩素、漢黃芩素、黃芩苷、漢黃芩苷對照品0.15g，按照2.2方法每份樣品制成5份，測定4種主要成分的峰面積。

1.2.6 線性關(guān)系考察 線性關(guān)系考察：分別將4種對照品溶液1、2、3、4、5、6μL，依次進(jìn)樣。

1.2.7 樣品含量測定 用液相攝譜儀，測定峰面積，帶入回歸方程計(jì)算含量，取3次測定結(jié)果的平均值。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料采用x2檢驗(yàn)，P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 重復(fù)性試驗(yàn)

按2.7方法進(jìn)行測定，依據(jù)結(jié)果計(jì)算RSD<3%，說明樣品重復(fù)性很好。

2.2 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)

黃芩素、漢黃芩素、黃芩苷、漢黃芩苷RSD值分別為0.76%、0.97%、1.12%、0.62%，表明供試品在制備后16h內(nèi)穩(wěn)定。

2.3 回收率實(shí)驗(yàn)

測定黃芩苷、漢黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素的峰面積。平均回收率分別為99.6%、98.7%、99.5%、99.1%，RSD分別為0.89%、1.64%、0.96%、1.25%。

2.4 線性關(guān)系考察

得線性回歸方程，見表1。

2.5 樣品含量測定

用液相攝譜儀，測定峰面積，帶入回歸方程計(jì)算含量，取3次測定結(jié)果的平均值，P<0.05，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，見表2。

由表可看出：黃芩樣品中黃芩苷、漢黃芩苷的含量 河北>內(nèi)蒙古>甘肅，而黃芩素、漢黃芩素的含量內(nèi)蒙古>河北>甘肅，P<0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 討論

中藥黃芩為多年生草本，根莖肥厚，肉質(zhì)，徑達(dá)2cm，伸長而分枝。黃芩抗旱力較強(qiáng)[7-8]。遇嚴(yán)重干旱或追肥后可適當(dāng)澆水，一般不用常澆水。主要分布在中國河北、山西北部、內(nèi)蒙古中東部及東北三省大部[9]。黃芩中含有多種黃酮類化合物，其主要活性成分是黃芩苷、漢黃芩苷、黃芩素和漢黃芩素。其活性成分的多寡也是評價(jià)黃芩優(yōu)劣的指標(biāo)[10-11]。

現(xiàn)代藥理學(xué)指出，黃芩具有抗炎、抗菌、抗病毒、鎮(zhèn)靜、解毒、解熱、降壓等功效，黃芩煮水又具有清熱止血效果，此外黃芩配山梔、桔梗、當(dāng)歸、人參等制成湯劑對糖尿病也有一定的療效，在臨床應(yīng)用比較廣泛。由于黃芩生長的地理位置，光照、土壤酸堿度及溫度等因素的影響，所以不同產(chǎn)地的黃芩藥材中的主要有效成分也有所差別[12]。

故本研究選取河北、內(nèi)蒙古、甘肅三產(chǎn)地黃芩樣品，按照《中國藥典》2010版一部標(biāo)準(zhǔn)，對三產(chǎn)地樣品進(jìn)行黃芩素、漢黃芩素、黃芩苷、漢黃芩苷有效成分的測定，測定結(jié)果顯示黃芩樣品中黃芩苷、漢黃芩苷的含量河北>內(nèi)蒙古>甘肅，而黃芩素、漢黃芩素的含量內(nèi)蒙古>河北>甘肅，所以根據(jù)研究結(jié)果在臨床制劑中應(yīng)根據(jù)不同藥用作用選擇合適產(chǎn)地的黃芩入藥。

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（收稿日期：2014-10-21）endprint