王瑩杜靜

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液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)在中藥復方研究中的應(yīng)用

王瑩杜靜

液質(zhì)聯(lián)用；中藥復方；應(yīng)用進展

中藥復方包含中醫(yī)藥醫(yī)理、思辨和配伍規(guī)律，是中醫(yī)臨床用藥的精髓。中藥復方臨床療效來源于其內(nèi)在物質(zhì)基礎(chǔ)，研究中藥復方的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，可以進一步闡釋中醫(yī)藥理論，明確中藥復方的配伍規(guī)律和作用機制。液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)不僅擁有液相色譜的優(yōu)越分離能力和檢測靈敏度，還擁有質(zhì)譜的高選擇性和強大的定性專屬性，被廣泛應(yīng)用于中藥復方成分的結(jié)構(gòu)鑒定、含量測定及體內(nèi)代謝等諸多方面。本文對液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)在中藥復方研究中的應(yīng)用進行綜述。

1 液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)在中藥復方結(jié)構(gòu)鑒定中的應(yīng)用

液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)具有強大的分離能力和結(jié)構(gòu)鑒定特點，通過對已知同類化合物的質(zhì)譜裂解規(guī)律以及未知化合物質(zhì)譜信息的分析，再參考未知成分的保留時間、紫外光譜等信息，可實現(xiàn)對未知化合物的結(jié)構(gòu)進行合理推測[1-2]。汪祺等[3]采用LC-MS聯(lián)用儀通過比較五味子中間體及8家企業(yè)生產(chǎn)的生脈注射液樣品發(fā)現(xiàn)，五味子中間體的主要成分為木脂素類，并建立生脈注射液中木脂素類成分的分析方法。Wang等[4]運用LC-ESI-MSn根據(jù)相對分子量信息和多級質(zhì)譜碎片信息從復方龍膽瀉肝湯中分離鑒定了51個黃酮類化合物，并對主要成分的質(zhì)譜裂解行為進行了研究。Zheng等[5]運用UPLC-ESI-QTOF-MS從中藥復方溫脾湯中鑒定出59個化合物，這些化合物主要為酚類、三萜皂苷、生物堿和黃酮苷四大類化合物。張靖等[6]采用UPLC-LTQ-MS定性分析方法比較了復方三芪口服液與黃芪及三七單味藥質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫，對組方質(zhì)譜圖中39個主要成分峰進行了快速鑒別，為該組方活性成分的體內(nèi)外快速分析研究提供實驗依據(jù)。

2 液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)在中藥復方含量測定分析中的應(yīng)用

液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)高靈敏度、高選擇性的優(yōu)點非常適合對中藥復方中化學成分進行定量分析。中藥復方的定量分析多采用液相與單重四級桿（LC/MS）或液相與三重四級桿（LC/MS/MS）聯(lián)用技術(shù)，通過選擇離子檢測（SIM）、選擇反應(yīng)監(jiān)測（SRM）或多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）等模式同時定量測定多種化學成分[1-2]。Chang等[7]建立了一種能快速準確同時定量測定中藥復方生脈散中包括人參中的皂苷及五味子中的木脂素成分的8個活性成分的HPLC-MS分析方法，該法簡單、靈敏、準確、快速，有利于進一步完善復方生脈散質(zhì)量控制研究。Wang等[8]對葛根芩連片中的葛根素、鹽酸小檗堿和黃芩苷三種化學成分進行了含量測定，建立了一種簡單快速、重復性好的UPLC-ESIMS（SIM）方法。張藝竹等[9]采用液相-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對中藥復方制劑參甘冠心合劑中異甘草苷、毛蕊花糖苷、芍藥苷、阿魏酸等11種有效成分同時定量測定，為該方劑療效物質(zhì)基礎(chǔ)的確定提供了科學依據(jù)。

3 液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)在中藥復方藥物代謝研究中的應(yīng)用

中藥復方有效成分復雜，真正產(chǎn)生藥理作用的可能是單個組分，也可能是多個組分，或者是各組分相互作用產(chǎn)生的新物質(zhì)，利用液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)，不僅可以避免復雜、煩瑣、耗時的分離純化樣品工作，而且能分離鑒定過去難以檢測到的痕量藥物代謝產(chǎn)物。由于藥物的代謝產(chǎn)物往往保持著原藥的母核結(jié)構(gòu)，因此原藥與其代謝產(chǎn)物具有相似的質(zhì)譜碎裂過程和特征碎片離子，可以據(jù)此來推斷代謝物的結(jié)構(gòu)[10]。因此，液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)在中藥復方藥物代謝研究方面具有廣闊的前景。Deng等[11]研究大鼠灌服清火通竅片后血漿中的化學成分，并建立同時定量測定血漿中三七皂苷R1、人參皂苷Re、人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1及淫羊藿苷五種成分的分析方法；Wang等[12]建立了一種UPLC/Q-TOF-MS/MS方法，大鼠在灌服茵陳蒿湯后，血漿中檢測到21個色譜峰，經(jīng)過鑒定推測其中2個為代謝產(chǎn)物；左冉等[13]采用LC-ICR-MS法深入研究黃連解毒湯體內(nèi)發(fā)揮藥效的作用的物質(zhì)基礎(chǔ)，通過與黃連解毒湯提取物和混合對照品的保留時間和高分辨質(zhì)譜信號比較分析，在血漿樣品中共發(fā)現(xiàn)38個入血成分，包括22個原形成分和16個代謝產(chǎn)物，結(jié)果表明，黃連解毒湯主要成分的代謝產(chǎn)物在大鼠體內(nèi)多以硫酸化和葡糖醛酸等二相代謝產(chǎn)物形式存在。Xu等[14]通過LC-ESI-MS方法，驗證該法能應(yīng)用于大鼠灌服大承氣湯后大鼠血漿中5種化學成分的藥代動力學研究；辛楊等[15]利用超高效液相色譜-高分辨質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)法，定性分析大鼠灌服“甘草附子湯”和“術(shù)附湯”后血漿中的次烏頭堿，結(jié)果表明，“甘草附子湯”和“術(shù)附湯”中次烏頭堿體內(nèi)吸收程度不同，兩復方功效差異可能來源于次烏頭堿在體內(nèi)吸收程度的不同。王佩瑤等[16]利用LCTOF-MS測定雙龍方（人參、丹參）中10種原形成分和一種代謝物在大鼠體內(nèi)的藥代動力學參數(shù)，結(jié)果表明丹酚酸與人參皂苷有協(xié)同作用，臨床上使用雙龍方時，每隔8h服用1次即可維持所需藥效濃度。

4 小結(jié)

液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)將高效液相超強的分離能力和質(zhì)譜的高靈敏度和專屬特異性強的優(yōu)點融合在一起，有效解決了中藥及復方成分復雜、內(nèi)源性雜質(zhì)較多、且活性成分及代謝物在生物樣品中濃度較低等問題，已成為中藥各類成分分析的重要手段，為中藥及中藥復方的體內(nèi)過程研究和代謝產(chǎn)物的分析奠定了基礎(chǔ)。

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（收稿：2015-01-23 修回：2015-03-10）

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