鄭靖陽，陳清，林鋒，瞿爾力，肖秀漫

（1.溫州市中心醫(yī)院，浙江 溫州325027；2.溫州醫(yī)科大學附屬育英兒童醫(yī)院，浙江 溫州325027）

血清IGF-I、bFGF水平與早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病的關(guān)系

鄭靖陽1，陳清1，林鋒1，瞿爾力1，肖秀漫2

（1.溫州市中心醫(yī)院，浙江 溫州325027；2.溫州醫(yī)科大學附屬育英兒童醫(yī)院，浙江 溫州325027）

目的探討血清中胰島素樣生長因子-I（IGF-I）、堿性成纖維細胞生長因子（bFGF）預測早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病（ROP）的診斷價值。方法胎齡≤31周和（或）體質(zhì)量≤1500g的早產(chǎn)兒進行間接眼底鏡篩查，根據(jù)ROP國際分類法診斷為ROP的患兒為實驗組，其中根據(jù)嚴重程度分為ROP I-IV期；對照組：選擇同期與ROP組胎齡、出生體質(zhì)量相匹配的非ROP早產(chǎn)兒。對所有研究對象在出生后1周或糾正胎齡31周時取靜脈血2mL，采用ELISA法檢測血清中IGFI、bFGF濃度。結(jié)果隨著ROP的進展，血清中IGF-I及bFGF逐漸降低；通過ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)，IGF-I的最佳閾值為28.08ng/mL，靈敏度為0.94，特異度為0.812，ROC曲線下最大面積為0.902；bFGF的最佳閾值320.65ng/L，靈敏度為0.84，特異度0.854，ROC曲線下最大面積為0.896。由此可見，IGF-I具有較好的預測和診斷價值，bFGF次之。結(jié)論臨床上如有胎齡≤31周和（或）出生體質(zhì)量≤1500g的早產(chǎn)兒，在其生后第1周或糾正胎齡31周時，若血清IGF-I明顯降低（＜28.08ng/mL），同時伴有bFGF降低（＜320.65ng/L），則預示ROP的發(fā)生率增加，需請眼科醫(yī)生行眼底篩查。

早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病；堿性成纖維細胞生長因子；胰島素樣生長因子-I；酶聯(lián)免疫吸附試驗

隨著新生兒救治水平的不斷提高，超早早產(chǎn)兒、極低出生體重兒存活率大幅上升，導致早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病（retinopathy of prematurity，ROP）的發(fā)病率明顯增加，嚴重者可導致永久性失明。由于眼底檢查比較復雜，有學者提出根據(jù)早產(chǎn)兒相關(guān)危險因素，在眼底檢查前進行臨床篩查工作[1]，找到ROP的預測指數(shù)，更早期發(fā)現(xiàn)ROP即成為迫切需要解決的問題。目前研究認為，ROP的發(fā)病機制主要為視網(wǎng)膜血管發(fā)育不良，繼而導致病理性異常增生血管的形成。視網(wǎng)膜新生血管（retinal neovascu lar izat ion，RNV）生成受很多生長因子的調(diào)控，其中堿性成纖維細胞生長因子（basic fibroblast growth factor，bFGF）是最為重要的因子之一。此外，胰島素樣生長因子-1（insulinlike growth factor-1，IGF-I）作為非氧調(diào)節(jié)因子參與ROP的發(fā)生與發(fā)展[2]。本研究通過比較ROP組與非ROP組血清IGF-I和bFGF的濃度差異，探討其能否作為ROP的預測指標，協(xié)助早期診斷ROP患兒。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2010年5月～2013年5月 48例早產(chǎn)兒患者（溫州市中心醫(yī)院18例，溫州醫(yī)科大學附屬育英兒童醫(yī)院30例），入選標準：胎齡≤31周和（或）體質(zhì)量≤1500g[3]。根據(jù)ROP國際分類法診斷為ROP的患兒為實驗組，根據(jù)ROP進展情況又分為ROP I期、II期、III期和IV期（本研究未發(fā)現(xiàn)V期患兒）；另選擇同期與ROP組患兒胎齡、出生體質(zhì)量相匹配的住院非ROP的早產(chǎn)兒50例為對照組（溫州市中心醫(yī)院20例，溫州醫(yī)科大學附屬育英兒童醫(yī)院30例）。排除標準：復雜型先天性心臟病、遺傳代謝性疾病、先天性多發(fā)畸形如先天性腹裂、腸閉鎖、食道閉鎖、食道氣管瘺、先天性膽道閉鎖等。兩組一般資料比較差異無統(tǒng)計學意義（均P＞0.05），詳見表1。

1.2方法 所有研究對象在其生后1周或糾正胎齡31周時取靜脈血2mL，置于普通消毒EP管內(nèi)，室溫下靜置30～60分鐘。以2000r/min離心10分鐘，吸取血清，分裝放入消毒EP管內(nèi)，于-20℃冰箱內(nèi)保存，避免反復凍融。待測血清采用ELISA檢測試劑盒（美國R&D公司），參照說明書檢測IGF-I和bFGF，經(jīng)自動酶標儀分別于405nm和480nm處

測定各孔的光密度（optical density，OD）值；以OD值為縱坐標，以標準品濃度為橫坐標，繪制標準曲線，根據(jù)樣品的OD值確定其濃度。

1.3統(tǒng)計學處理 全部數(shù)據(jù)經(jīng)SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行分析。

表1 兩組一般資料比較（）

組別n男/女 胎齡（d） 出生體質(zhì)量（g）Apgar評分（分）1分鐘5分鐘ROP組4831/17205.0±12.621229.69±232.376.0±2.008.0±1.00對照組5028/22205.8±8.081401.32±171.787.0±2.008.0±0.25

2 結(jié)果

2.1IGF-I和bFGF測定結(jié)果 隨著ROP的進展，血清中IGF-I及bFGF逐漸降低，詳見表2。

表2 兩組各期血清IGF-I、bFGF含量比較（）

與ROPI期比較▲▲P＜0.01，與ROP II期比較**P＜0.01，與ROP III期比較△△P＜0.01

組別nIGF-I（ng/mL）bFGF（ng/L）對照組5042.86±18.72391.61±93.24 ROP I期ROP II期ROP III期ROP IV期28 10 6 4 22.31±12.45 22.40±8.87 16.30±7.15**▲▲11.12±4.57△△▲▲**293.98±37.83 222.36±45.64▲▲182.34±46.54**▲▲134.24±48.04△△▲▲**

2.2ROC曲線 根據(jù)ROC曲線下面積在0.7～0.9有一定準確性，而＞0.9則有較高的準確性，IGF-I與bFGF的ROC曲線下面積分別為0.902和0.896，詳見圖1-2；IGF-I與bFGF診斷ROP的敏感性和特異性，詳見表3。

3 討論

ROP是目前世界范圍內(nèi)公認的兒童致盲最主要因素，一般在生后4～6周或糾正胎齡32周進行眼底ROP篩查。眼底ROP篩查比較復雜，主觀性強，患兒依從性較差，工作量很大，加上基層醫(yī)院沒有相關(guān)設備開展篩查工作。2005年美國一個由26個新生兒重癥監(jiān)護室（NICU）參與的多中心臨床研究（ETROP），篩查6998例出生體質(zhì)量＜1251g的早產(chǎn)兒，發(fā)現(xiàn)ROP發(fā)生率為68%，其中出生體質(zhì)量750～1000g者ROP發(fā)生率為75.8%，＜750g者ROP發(fā)生率為92.7%[4]。最近，瑞典進行ROP普查，納入全國胎齡＜27周的所有早產(chǎn)兒506例，ROP發(fā)生率72.7%，胎齡越小ROP發(fā)生率越高，其中胎齡＜22周ROP發(fā)生率為100%[5]。我國人口基數(shù)大，本組選

擇胎齡＜31周或出生體質(zhì)量＜1500g作為血液篩查的節(jié)點較為合適。

ROP的發(fā)病機制尚未完全清楚，早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜發(fā)育未成熟是最根本的原因[6]，最主要的病理表現(xiàn)為視網(wǎng)膜血管發(fā)育不全和大量異常新生血管的形成，其中異常新生血管的形成在ROP發(fā)病機制中占主導作用，是眾多血管生長因子相互協(xié)調(diào)的結(jié)果。IGF-I作為非氧調(diào)節(jié)因子參與ROP的發(fā)生與發(fā)展[2]。Kondo等[6]利用IGF-I受體基因敲除小鼠實驗發(fā)現(xiàn)，基因敲除小鼠視網(wǎng)膜新生血管的形成明顯較野生型ROP小鼠減少。研究表明IGF-I在視網(wǎng)膜新生血管形成中作為血管內(nèi)皮生長因子VEGF的正向調(diào)節(jié)因子，與VEGF協(xié)同起重要作用。一定濃度IGF-I的存在使VEGF能最大程度地誘導視網(wǎng)膜新生血管的生長，當IGF-I濃度不足時，即使有VEGF的存在也不能促進血管生長[7]。Hellstrm等[8]在隨訪84例胎齡24～32周早產(chǎn)兒時發(fā)現(xiàn)，低血清IGF-I與ROP發(fā)生率明顯相關(guān)，IGF-I降低的持續(xù)時間也與ROP的嚴重程度高度相關(guān)，由此提出早產(chǎn)兒血清IGF-I水平或許可以作為ROP篩查的指標，但單獨依靠IGF-I水平預測ROP的可靠性國內(nèi)外均存在質(zhì)疑，且其閾值存在爭議，若關(guān)注IGF-I低的持續(xù)時間則需要多次采血，增加感染的風險。目前有大量研究顯示，堿性成纖維細胞生長因子是一種促進血管發(fā)育和新生血管形成的重要生長因子，作用于新生血管形成的各個環(huán)節(jié)，在增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變、年齡相關(guān)性黃斑變性、非缺血性增生性視網(wǎng)膜病變的視網(wǎng)膜和脈絡膜的新生血管膜上均有bFGF和VEGF的表達[9]，但能否作為ROP的預測指標，國內(nèi)外鮮有報道。

目前，國外有研究發(fā)現(xiàn)如果早產(chǎn)兒生后第1周或在糾正胎齡31周時血清IGF-I濃度處于極低水平，或者血清IGF-I濃度持續(xù)低于30ng/mL時，預示著發(fā)生ROP的危險性增加，但其準確率存在質(zhì)疑，缺乏大樣本對照研究；杜鵑等[2]研究發(fā)現(xiàn)低血清IGF-I的持續(xù)時間較長，可能預示ROP的發(fā)生，但存在取血次數(shù)多，增加感染的風險。所以本研究除IGF-I外，增加引入bFGF作為輔助觀察指標。結(jié)果顯示，ROP I期IGF-I和bFGF均較對照組顯著降低（P＜0.01），且隨著ROP的進展，血清中IGF-I及bFGF呈現(xiàn)逐漸降低的趨勢。通過ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)，IGF-I的最佳閾值為28.08ng/mL，靈敏度為94%，特異度為81.2%，ROC曲線下最大面積為0.902；bFGF的最佳閾值320.65ng/L，靈敏度為84%，特異度85.4%，ROC曲線下最大面積為0.896。由此可見，IGF-I具有較好的預測和診斷價值，bFGF次之。

綜上所述，臨床上如有胎齡≤31周和（或）出生體質(zhì)量≤1500g的早產(chǎn)兒，在其生后第1周或糾正胎齡31周時若血清IGF-I明顯降低（＜28.08ng/mL），同時伴有bFGF降低（＜320.65ng/L），則預示ROP的發(fā)生率增加，需請眼科醫(yī)生行眼底篩查。

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溫州市科學技術(shù)局項目（Y20120078）；溫州市衛(wèi)生局資助項目（2010A004）