覆盆子的補腎活性成分研究

籍艷秋

【摘要】目的 分析覆盆子的補腎活性成分。方法 覆盆子果實以70%乙醇提取，以腎陽虛模型測定和篩選覆盆子補腎活性成分，并以光譜法明確其化學(xué)結(jié)構(gòu)。結(jié)果 共得到5個單體，鑒定4個，分別為覆盆子素、葡萄糖苷、山奈酚和槲皮素，其中覆盆子素具有較高生物活性。結(jié)論 覆盆子素為新化合物，具有良好的天然生物活性，有望被開發(fā)為新的補腎藥物。

【關(guān)鍵詞】覆盆子；腎陽虛；補腎；活性成分

作者單位：136001 四平市中醫(yī)醫(yī)院

覆盆子屬于薔薇科植物，是一味常用的中藥，具有益腎固精、抗炎消毒之功效，可用于治療腎虛腰痛、陽痿早泄、尿頻等，該類藥物目前已經(jīng)開發(fā)和利用，但是關(guān)于其治療腎衰有效成分的報道并不多見，為進一步明確其臨床應(yīng)用價值，測定其補腎活性成分尤為必要［1］。本實驗通過建立腎陽虛模型，對覆盆子成分進行測定，現(xiàn)報道如下。

1　材料與方法

1.1實驗材料

購進63只6周齡小鼠作為實驗對象，均為雄性，體重26 g左右；受試樣品為覆盆子70%乙醇提取物，陽性對照藥物為甲睪酮片、黑褐色大蜜丸和金匱腎氣丸，選模型藥品為氫化可的松。

1.2實驗方法

1.2.1實驗分組和樣品配制 將63只小鼠隨機分為總提取物低、中、高劑量組，甲睪酮組、金匱腎氣丸組，模型組和空白組，共7組，分列Ⅰ～Ⅶ組，各9只，甲睪酮組、金匱腎氣丸組為對照組。覆盆子總提物均以1%西黃芪膠配制，低劑量組為13.5 mg/ml混懸液，中劑量組為40.5 mg/ml混懸液，高劑量組為121.5 mg/ml混懸液，對照組分別為30 mg/ml和150 mg/ml混懸液；依次對小鼠進行標(biāo)號，空白組注射生理鹽水，其余組均注射氫化可的松溶液，同時灌胃給藥，體積均為0.5 ml；2周后，眼眶取血并處理小鼠，取睪丸和腎臟，置入10%甲醛溶液中浸泡，組織切片，離心，取上層血清保存待測［2］。

1.2.2活性部位試驗及化學(xué)成分提取分離

稱取50 kg覆盆子果實，置于70%乙醇滲漉，合并滲漉后回收乙醇；取6.5 kg流浸膏，分別制備石油醚、二氯甲烷和正丁醇萃取部位及水部位，并按照使用劑量分為低、中、高劑量組，分別為2 g/kg、6 g/kg、18 g/kg，并對二氯甲烷和正丁醇部位進行提取和分離。

2　結(jié)果

2.1補腎活性分析

各組小鼠腎臟和睪丸重量比較差異無意義。以10%甲醛固定腎臟和睪丸，通過電子顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)，對照組和總提物中、高劑量組的細胞損傷要小于模型組和空白組，小鼠腎精虧損癥狀和睪丸病例損傷程度均有所減輕，其中總提物劑量組對血壓睪酮濃度降低起到了一定的抑制作用，高劑量組效果更為明顯。

2.2活性部位篩選和化學(xué)成分測定

通過對小鼠組織切片的觀察發(fā)現(xiàn)，正丁醇中、高劑量組的細胞損傷小于其他組，小鼠腎精虧損癥狀和睪丸損傷程度均有所減輕，高劑量組效果更為明顯。正丁醇部位化合物結(jié)構(gòu)鑒定結(jié)果為Y-11、Y-6、Y-9、Y-15，即覆盆子素、葡萄糖苷、山奈酚和槲皮素，均為黃色粉末，光譜法檢測為：（1）覆盆子素，分子量為248，分子式為C12H8O6，結(jié)構(gòu)呈環(huán)狀排列，波譜數(shù)據(jù)為：EI-MS m/z : 248［M］+（100），164（43）；UV（EtOH） : 364（10 143），299 （28 317），200（17 978）。（2）葡萄糖苷（4，5，7-三羥基黃酮醇-3-O-β-D-葡萄糖苷），分子量為594，波譜數(shù)據(jù)為：ES-MS m/z : 593［M］+，5 923［M］+（100）；HNMR苷元部分為8.00 （3H，H-2，6，），6.31（2H，H-8），6.13（1H，H-6）；糖部分為5.22 （1H，H-1），4.3（5H，m）；桂皮?；鶠?.32（2H，H-2，6，，），7.29 （1H，H-7，，）。13C-NMR在此不做列述。（3）山奈酚，分子量為286，ES-MS m/z : 284［M-H］+，285［M］+（15）。（4）槲皮素，分子量為302，甲睪酮組、金匱腎氣丸組ES-MS m/z : 300［M］+，（100），272（15），69（20）［3-4］。

3　討論

綜上所述，對于氫化可的松誘導(dǎo)的腎陽虛所致腎臟和睪丸病理病變，提取物中、高劑量組均有一定的改善，證實覆盆子提取物對腎陽虛能夠起到有效的保護作用，通過病理切片的觀察，確定其活性部位為正丁醇萃取部位，經(jīng)化合物結(jié)構(gòu)鑒定，其主要化學(xué)成分為覆盆子素、葡萄糖苷、山奈酚和槲皮素，前1種屬于香豆素類化合物，后3種屬于黃酮類成分，其中覆盆子素結(jié)構(gòu)較為新穎，生物活性較高，具有很好的藥物應(yīng)用價值，且該類資源較多、易獲得，開發(fā)利用前景廣闊。

參考文獻

［1］扈婧. 覆盆子活性物質(zhì)提取工藝的優(yōu)化［J］.食品科技，2014，3（11）:238-241.

［2］雷利芳. 覆盆子的抗氧化活性及其與化學(xué)成分和顯微特征常數(shù)的相關(guān)性研究［D］. 鄭州：鄭州大學(xué)，2013.

［3］李安良，楊淑琴，郭秀茹. 化妝品活性成分覆盆子酮葡糖苷的研究進展［J］.香料香精化妝品，2014，12（4）: 643-666.

［4］吳峰華，劉相真，楊虎清，等. 覆盆子醇提物及其不同極性部位抗氧化活性研究［J］. 中國食品學(xué)報，2012，12（2）：27-29.

Research the Active Components From the Fruits of Rubus Chingii Hu on Replenishing Kidney

JI YanqiuSiping Municipal Hospital of Traditional Chinese Medicine，Siping 136001，China

【Abstract】

Objective To analyze the active ingredients on replenishing kidney from the fruits of rubus chingii hu. Methods The fruits of rubus chingii hu was extracted with 70% ethanol，with kidney yang deficiency model determing and screening of the active ingredients of replenishing kidney and spectroscopy cleared its chemical structure. Results There were five monomers，identification of four，respectively，raspberry，glucoside，kaempferol and quercetin，including rubus chingii hu element had higher biological activity. Conclusion Rubus chingii hu element is a new compound， with good natural biological activity， and is expected to be developed as a new drug for replenishing kidney.

【Key words】Rubus chingii hu，Kidney yang deficiency，Replenishing kidney，Active ingredient

doi:10.3969/j.issn.1674-9316.2015.19.096

【中圖分類號】R692

【文獻標(biāo)識碼】B

【文章編號】1674-9316（2015）19-0125-02