鄭朋朋，李 珊，戚麗蓉，楊正濤，張 婷，敖新宇

（西南林業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，云南昆明650224）

山楂多糖的提取及其抗氧化性作用

鄭朋朋，李 珊，戚麗蓉，楊正濤，張 婷，敖新宇*

（西南林業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，云南昆明650224）

為確定大別山產(chǎn)山楂多糖的最佳提取工藝條件和多糖的抗氧化活性，在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，通過Plackett Burman試驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)篩選后，響應(yīng)面法進(jìn)行優(yōu)化；通過對1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基、羥自由基和2,2-聯(lián)氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二銨鹽（ABTS）自由基清除試驗(yàn)測定山楂多糖抗氧化活性。結(jié)果表明，山楂多糖最佳提取條件為液料比28∶1（mL∶g）、浸提溫度79℃，醇析乙醇體積分?jǐn)?shù)71%。在此條件下，山楂多糖的提取率為7.97%。結(jié)果表明，山楂多糖具有清除DPPH自由基、羥基自由基和ABTS自由基的能力。

山楂；多糖；響應(yīng)面法；抗氧化性

多糖在生物體內(nèi)承擔(dān)重要的生理功能，如細(xì)胞信號傳導(dǎo)、受體識別、免疫反應(yīng)等。另外多糖具有抗腫瘤、增強(qiáng)免疫力、抗疲勞等多種生物活性，成為近年研究的熱點(diǎn)之一[1-2]。

山楂（Crataegus pinnatifida）為薔薇科山楂屬植物，在中國已有悠久的食用和藥用歷史，是一種重要的植物資源[3-4]。山楂中主要含黃酮類、多酚類、多糖、三萜類、有機(jī)酸類、甾醇類、胡蘿卜素、氨基酸等化學(xué)成分及微量元素等[5-8]。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，山楂多糖具有降血壓、降血脂、增強(qiáng)免疫、抑菌等功能[9-11]。本研究通過PB試驗(yàn)對山楂多糖提取過程中的超聲處理時(shí)間、液料比、浸提溫度、提取時(shí)間、醇析乙醇體積分?jǐn)?shù)5個(gè)因素進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)篩選，響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn)進(jìn)一步優(yōu)化多糖提取條件，同時(shí)對山楂多糖體外抗氧化性作用進(jìn)行研究，從而為山楂的綜合開發(fā)利用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

山楂：采摘自安徽省安慶市岳西縣的野生山楂，新鮮山楂去核后放入60℃烘箱中烘至質(zhì)量恒定，粉碎機(jī)粉碎，過80目篩，放入廣口瓶，儲(chǔ)存于干燥瓶中備用。

1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl，DPPH）自由基、2,2-聯(lián)氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二銨鹽（2,2'-azinobis（3-ehtylbenzothiazolin-6-sulfnic acid）diammonium salt，ABTS）：美國Sigma公司；30%雙氧水、甲醇、乙醇、氯仿、正丁醇、濃硫酸、苯酚、葡萄糖：汕滇藥業(yè)有限公司；水楊酸、硫酸亞鐵、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、過硫酸鉀：國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。所有化學(xué)試劑均為分析純。

1.2 儀器與設(shè)備

DHG-9240A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱、HWS-12水浴鍋：上海一恒科學(xué)儀器有限公司；BS224S電子天平：德國Sartorius公司；M20粉碎機(jī)：KIKA-WERKE公司；B490真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀：瑞士Buchi公司；FD5-8冷凍干燥機(jī)：美國GoldSim公司；AS20500B超聲波清洗儀：臺(tái)灣信達(dá)電子儀器有限公司；TU-1901紫外分光光度計(jì)：北京普析通用儀器有限責(zé)任公司；5430R離心機(jī)：德國Eppendorf公司。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 多糖提取與測定

葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：準(zhǔn)確稱取100.0mg葡萄糖（105℃烘干至質(zhì)量恒定），溶解后定容至1 L，配制成100 μg/mL的葡萄糖儲(chǔ)備液；分別取0、0.2 mL、0.4 mL、0.6 mL、0.8 mL、1.0 mL葡萄糖儲(chǔ)備液于試管中，補(bǔ)水至1.0 mL，得質(zhì)量濃度為0、20μg/mL、40μg/mL、60μg/mL、80μg/mL、100μg/mL葡萄糖溶液，分別加入4%苯酚1.0 mL、濃硫酸5.0 mL，待冷卻后，在波長490 nm處測定吸光度值。

多糖提取：采用熱水浸提乙醇沉淀法提取山楂多糖。準(zhǔn)確稱取2.0 g山楂粉，置于100 mL的具塞三角瓶中，在選定的超聲時(shí)間（超聲功率520 W）、液料比、浸提溫度、提取時(shí)間和醇析乙醇體積分?jǐn)?shù)條件下水浴浸提；提取完成后5 000 r/min離心12min，將上清液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮為5 mL后，加一定量無水乙醇靜置沉淀12 h；6 000 r/min離心20 min、多糖沉淀復(fù)溶于水中，用Sevag法除蛋白后，冷凍干燥后，再配成水溶液，并定容到100 mL待測。

取1.0mL稀釋10倍后的多糖待測液，加入4%苯酚1.0mL、濃硫酸5.0 mL，放入水槽中冷卻10 min，待冷卻后，在波長490nm處測定吸光度值。多糖提取率計(jì)算公式如下：

式中：A為樣品待測液的吸光度值；m為樣品的質(zhì)量，g。

1.3.2 單因素試驗(yàn)

超聲處理時(shí)間：超聲處理時(shí)間分別在0、10min、20min、30 min、40 min、50 min，液料比40∶1（mL∶g）、浸提溫度60℃、提取時(shí)間120 min、醇析乙醇體積分?jǐn)?shù)80%的條件下，考察不同超聲處理時(shí)間對多糖提取率的影響。

液料比：液料比分別在10∶1、20∶1、30∶1、40∶1、50∶1、60∶1（mL∶g），超聲處理時(shí)間30 min、浸提溫度60℃、提取時(shí)間120 min、醇析乙醇體積分?jǐn)?shù)80%的條件下，考察不同液料比對多糖提取率的影響。

浸提溫度：浸提溫度分別在40℃、50℃、60℃、70℃、80℃、90℃，超聲處理時(shí)間30 min、液料比30∶1（mL∶g）、提取時(shí)間120 min、醇析乙醇體積分?jǐn)?shù)80%的條件下，考察不同浸提溫度對多糖提取率的影響。

提取時(shí)間：提取時(shí)間分別在60 min、90 min、120 min、150 min、180 min、210 min，超聲處理時(shí)間30 min、液料比30∶1（mL∶g）、浸提溫度80℃、醇析乙醇體積分?jǐn)?shù)80%的條件下，考察不同提取時(shí)間對多糖提取率的影響。

醇析乙醇體積分?jǐn)?shù)：乙醇體積分?jǐn)?shù)分別在40%、50%、60%、70%、80%、90%醇析，超聲處理時(shí)間30 min、液料比30∶1（mL∶g）、浸提溫度80℃、提取時(shí)間150 min的條件下，考察不同提取時(shí)間對多糖提取率的影響。

1.3.3 Plackett Burman試驗(yàn)

根據(jù)單因素試驗(yàn)，對超聲處理時(shí)間、液料比、浸提溫度、提取時(shí)間、醇析乙醇體積分?jǐn)?shù)5個(gè)因素進(jìn)行Plackett Burman試驗(yàn)設(shè)計(jì)[12-13]。以多糖提取率（Y）為響應(yīng)值；通過Design-Expert 8.0.6軟件對試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行主效應(yīng)分析。試驗(yàn)設(shè)計(jì)因素與水平見表1。

1.3.4 響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn)

根據(jù)單因素和Plackett Burman試驗(yàn)，選取液料比（A）、浸提溫度（B）和醇析乙醇體積分?jǐn)?shù)（C）3個(gè)因素，采用Box-Behnken中心組合設(shè)計(jì)原理設(shè)計(jì)3因素3水平的響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn)[14-15]，以-1、0、1代表因素的低中高3個(gè)水平，多糖提取率為響應(yīng)值。響應(yīng)面因素與水平設(shè)計(jì)見表2。

1.3.5 醇沉分級純化山楂多糖

按照最佳優(yōu)化條件提取山楂多糖，干燥得到粗多糖，波長190～400 nm范圍內(nèi)進(jìn)行紫外掃描，260～280 nm波段未出峰則說明粗多糖中蛋白質(zhì)除盡。

稱取5 g干燥的粗多糖復(fù)溶入50 mL蒸餾水中，加乙醇使其體積分?jǐn)?shù)為40%，沉淀12 h，6 000 r/min離心20 min，得到40%醇沉級分HPS1，上清液中繼續(xù)添加乙醇，使其體積分?jǐn)?shù)為60%，離心得到60%醇沉級分HPS2，上清液再加乙醇，使其體積分?jǐn)?shù)為80%，離心得到80%醇沉級分HPS3。

1.3.6 抗氧化性試驗(yàn)[16-19]

多糖清除DPPH自由基能力測定：將山楂多糖HPS1和HPS2用蒸餾水配制成質(zhì)量濃度10mg/mL的樣品儲(chǔ)備液，分別稀釋成不同質(zhì)量濃度梯度（1mg/mL、2mg/mL、3 mg/mL、4 mg/mL、5 mg/mL）后，取1.0 mL不同質(zhì)量濃度的樣品溶液（不同質(zhì)量濃度的VC溶液作為參比）于試管中，分別加入2.0 mL提前配制的DPPH溶液（0.004 0 g DPPH，甲醇定容至100 mL，4℃冰箱避光放置），振搖混勻后置于暗室中靜置40 min，于波長517 nm處測定吸光度值，1.0 mL不同質(zhì)量濃度的樣品溶液與2.0 mL甲醇混合液測定樣品本底吸光度值，2.0 mL DPPH與1.0mL甲醇混合液測定對照溶液吸光度值，DPPH自由基清除率計(jì)算公式如下：

式中：Ax為不同樣品溶液吸光度值；Ax0為樣品本底吸光度值；A0為對照溶液吸光度值。

多糖清除羥自由基能力測定：在試管中逐次加入9 mmol/L FeSO4溶液1.0 mL、9 mmol/L水楊酸-乙醇溶液1.0 mL、1.0 mL不同質(zhì)量濃度樣品溶液，最后加入8 mmol/L H2O2溶液1.0 mL啟動(dòng)反應(yīng)。將試管迅速移入37℃水浴鍋中，靜置反應(yīng)30 min后于波長510 nm處測定不同質(zhì)量濃度樣品液的吸光度值。用蒸餾水代替H2O2測得對應(yīng)質(zhì)量濃度樣品溶液的本底吸光度值，用蒸餾水代替樣品溶液測得對照吸光度值。·OH清除率計(jì)算公式如下：

式中：Ax為不同樣品溶液吸光度值；Ax0為樣品本底吸光度值；A0為對照溶液吸光度值。

多糖清除ABTS自由基測定：用蒸餾水溶解ABTS，使ABTS濃度為7 mmol/L，加入過硫酸鉀使過硫酸鉀的濃度為2.45mmol/L，然后將該溶液在室溫條件下避光反應(yīng)16 h。再將生成的ABTS+·溶液，用磷酸緩沖液（PBS，pH=7.4）適當(dāng)稀釋，使其在30℃、波長734 nm處的吸光度值在范圍內(nèi)，得到ABTS自由基儲(chǔ)備液。在試管中加入1.0 mL不同質(zhì)量濃度樣品溶液，再加入2.0 mL的ABTS溶液，混合搖勻，在室溫條件下反應(yīng)10 min后，在波長734 nm處測定其吸光度值。2.0 mL的蒸餾水代替ABTS溶液測定不同濃度樣品溶液的本底吸光值，用蒸餾水代替樣品溶液作為空白對照，ABTS自由基清除率計(jì)算公式如下：

式中：Ax為不同樣品溶液吸光度值；Ax0為樣品本底吸光度值；A0為對照溶液吸光度值。

2 結(jié)果與分析

2.1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立

以葡萄糖溶液質(zhì)量濃度（C）為橫坐標(biāo)，吸光度值（A）為縱坐標(biāo)繪制葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果見圖1。

由圖1可知，葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線線性回歸方程：A=0.00906C-0.004 81；相關(guān)系數(shù)R2=0.998，表明二者線性關(guān)系良好。

2.2 單因素試驗(yàn)

2.2.1 超聲時(shí)間對多糖提取率的影響

由圖2可知，超聲處理時(shí)間增加，山楂多糖的提取率開始不斷增加，超聲處理時(shí)間為30 min時(shí)的山楂多糖提取率最大，繼續(xù)增加超聲時(shí)間多糖提取率開始下降。超聲波具有較強(qiáng)的機(jī)械剪切作用，長時(shí)間和大功率的作用會(huì)使大分子多糖鏈斷裂，從而導(dǎo)致多糖提取率下降，表明最佳超聲處理時(shí)間為30 min。

2.2.2 液料比對多糖提取率的影響

由圖3可知，山楂多糖的提取率隨著液料比的增加而增大，當(dāng)液料比為30∶1（mL∶g）時(shí)，山楂多糖提取率達(dá)到最大值，液料比繼續(xù)增加，多糖提取率略有降低，說明最佳液料比為30∶1（mL∶g）。

2.2.3 浸提溫度對多糖提取率的影響

由圖4可知，溫度升高，山楂多糖的提取率隨之增加，溫度為80℃時(shí)，山楂多糖的提取率達(dá)到最大，溫度繼續(xù)升高，多糖提取率不增加，說明最佳浸提溫度為80℃。

2.2.4 提取時(shí)間對多糖提取率的影響

由圖5可知，提取時(shí)間延長，提取率隨之增大，提取時(shí)間為150 min時(shí)，山楂多糖的提取率達(dá)到最大，繼續(xù)延長時(shí)間，多糖提取率不增加，說明最佳提取時(shí)間為150 min。

2.2.5 醇析乙醇體積分?jǐn)?shù)對多糖提取率的影響

由圖6可知，隨著乙醇體積分?jǐn)?shù)增大，山楂多糖提取率先增加后降低，醇析乙醇體積分?jǐn)?shù)為70%時(shí)，山楂多糖的提取率達(dá)到最大，說明最佳醇析乙醇體積分?jǐn)?shù)為70%。

2.3 Plackett Burman試驗(yàn)

2.3.1 PB試驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果

PB試驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果見表3。

2.3.2 主效應(yīng)分析

通過Design-Expert8.0.6對PB試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行主效應(yīng)分析，分析結(jié)果見表4所示。PB試驗(yàn)所建立的模型顯著，R2= 0.985 5說明分析結(jié)果可靠。由表4中的P值和貢獻(xiàn)值可見，液料比、浸提溫度、醇析乙醇體積分?jǐn)?shù)對多糖提取率貢獻(xiàn)最大，其對多糖提取率的貢獻(xiàn)大小為液料比＞浸提溫度＞醇析乙醇體積分?jǐn)?shù)，而超聲處理時(shí)間、提取時(shí)間對多糖提取率的貢獻(xiàn)相對較小，由E值可知液料比、浸提溫度、醇析乙醇體積分?jǐn)?shù)均表現(xiàn)出正效應(yīng)，因此選取液料比、浸提溫度、醇析乙醇體積分?jǐn)?shù)設(shè)計(jì)響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn)逼近最佳提取條件，而超聲處理時(shí)間、提取時(shí)間則不進(jìn)行響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn)，在此后的試驗(yàn)中超聲處理時(shí)間為30 min，提取時(shí)間為150 min。

2.4 響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn)

2.4.1 響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果

采用Desigin-Expert8.0.6軟件中Box-Behnken中心組合設(shè)計(jì)響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn)，設(shè)計(jì)3因素3水平共15個(gè)試驗(yàn)點(diǎn)，其中12個(gè)為析因點(diǎn)，3個(gè)為零點(diǎn)，試驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果見表5。

2.4.2 回歸模型建立與方差分析

由Design-Expert8.0.6軟件對表5中的試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行多元回歸擬合，建立二次多項(xiàng)式回歸模型，并對模型進(jìn)行方差分析，結(jié)果如表6所示；對各因素進(jìn)行二次多項(xiàng)式回歸擬合后，得到二次項(xiàng)式回歸方程：

多糖提取率=8.03-0.24A-0.089B-0.036C+0.28AB-0.17AC+（7.00E-0.3）BC-0.48A2-0.47B2-0.088C2

由表6方差分析可知，該回歸模型的影響達(dá)到極顯著水平（P＜0.01）。模型中的A、A2、B2對響應(yīng)值影響極顯著（P＜0.01）；B、AB、AC對響應(yīng)值影響顯著（P＜0.05），其他項(xiàng)系數(shù)均不顯著（P＞0.05），這表明試驗(yàn)因素對響應(yīng)值不是簡單的線性關(guān)系。此模型的決定系數(shù)，說明響應(yīng)值的變化有98.44%來源于所選變量，該方程與實(shí)際情況擬合良好，實(shí)驗(yàn)誤差小，能夠正確反映多糖提取率與料液比、浸提溫度和醇析乙醇體積分?jǐn)?shù)之間的關(guān)系。失擬項(xiàng)，差異不顯著，表明建立的二次多項(xiàng)式回歸模型可運(yùn)用于山楂多糖提取條件的理論預(yù)測。

2.4.3 響應(yīng)面分析結(jié)果

圖7直觀反映了各因素對響應(yīng)值的影響，由圖7可知，液料比（A）與浸提溫度（B）及液料比（A）與醇析乙醇體積分?jǐn)?shù)（C）之間的交互作用最為顯著，其中，液料比對山楂多糖提取的影響最為顯著，表現(xiàn)為曲線較陡；浸提溫度次之；醇析乙醇體積分?jǐn)?shù)的影響相對最小，表現(xiàn)為曲線較為平滑，且隨其數(shù)值的增加或減少，響應(yīng)值變化較小。

2.4.4 驗(yàn)證試驗(yàn)

選擇合適的料液比、浸提溫度、醇析乙醇體積分?jǐn)?shù)可獲得較高的山楂多糖的提取率，通過Design-Expert8.0.6軟件分析，預(yù)測最佳提取條件為液料比28.41∶1（mL∶g）、浸提溫度79.06℃、醇析乙醇體積分?jǐn)?shù)70.89%，此條件下理論多糖提取率達(dá)8.08%?？紤]到實(shí)際操作的方便，將各因素修正為液料比28∶1（mL∶g）、浸提溫度79℃、醇析乙醇體積分?jǐn)?shù)71%，在修正條件下進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)，山楂多糖的提取率為7.97%，與理論預(yù)測值相比相對誤差為1.3%。因此，采用響應(yīng)面法優(yōu)化得到的提取條件準(zhǔn)確可靠，具有實(shí)用價(jià)值。

2.5 多糖的純化

對提取除蛋白的山楂多糖進(jìn)行紫外掃描，結(jié)果表明山楂多糖中不含有蛋白質(zhì)。采用乙醇分級沉淀對山楂多糖進(jìn)行純化，得到HPS1、HPS2、HPS3三個(gè)級分山楂純化多糖，其中獲得較多HPS1、HPS2兩個(gè)級分的純多糖，而HPS3級分較少，因此未對HPS3級分純化多糖進(jìn)行抗氧化性研究。HPS1、HPS2的多糖含量分別為51.7%和58.3%。

2.6 抗氧化性試驗(yàn)

2.6.1 山楂多糖對DPPH自由基的清除能力

從圖8可以看出，在試驗(yàn)質(zhì)量濃度范圍內(nèi)，隨著山楂多糖質(zhì)量質(zhì)量濃度的增加，HPS1、HPS2對DPPH自由基清除率呈逐漸上升趨勢，兩者對DPPH自由基清的除率基本一致，但是清除率均低于相同質(zhì)量濃度條件下VC對DPPH自由基的清除率；HPS1、HPS2在5.0 mg/mL時(shí)的清除率最大，分別為51.3%和48.5%。VC在質(zhì)量濃度0.2～1.0 mg/mL時(shí)，隨著質(zhì)量濃度的增加，其對DPPH自由基清除率增加迅速，超過1.0mg/mL后，清除率變化不大，維持在90%左右。整體來看，VC對DPPH自由基清除能力要強(qiáng)于山楂多糖。

2.6.2 山楂多糖對羥自由基（·OH）的清除能力

從圖9可以看出，在試驗(yàn)質(zhì)量濃度范圍內(nèi)，隨著山楂多糖質(zhì)量濃度的增加，HPS1、HPS2對·OH清除率呈逐漸上升趨勢，在1.5～3.0 mg/mL之間HPS2要略大于HPS1的清除率，而在3 mg/mL之后HPS1要略大于HPS2的清除率，但是清除率均低于相同質(zhì)量濃度條件下VC對·OH的清除率；HPS1、HPS2在5.0 mg/mL時(shí)的清除率最大，分別為53.7%和52.1%。VC在質(zhì)量濃度0.2～1.0 mg/mL時(shí)，隨著質(zhì)量濃度的增加，其對·OH清除率增加迅速，超過1.0 mg/mL后，清除率基本沒有變化，維持在83.6%。整體來看，VC對·OH清除能力要強(qiáng)于山楂多糖。

2.6.3 山楂多糖對ABTS自由基的清除能力

從圖10可以看出，在試驗(yàn)質(zhì)量濃度范圍內(nèi)，隨著山楂多糖質(zhì)量濃度的增加，HPS1、HPS2對ABTS自由基清除率呈逐漸上升趨勢，在3 mg/mL之前兩者對ABTS自由基清除率基本相同，而在3mg/mL之后HPS1逐漸大于HPS2的清除率，但是清除率均低于相同質(zhì)量濃度條件下VC對ABTS自由基的清除率；HPS1、HPS2在5.0 mg/mL時(shí)的清除率最大，分別為59.3%和48.8%。VC在質(zhì)量濃度0.2～2.0mg/mL時(shí)，隨著質(zhì)量濃度的增加，其對ABTS自由基清除率增加迅速，超過2.0mg/mL后，清除率基本沒有變化，維持在93%左右。整體來看，VC對ABTS自由基清除能力要強(qiáng)于山楂多糖。

3 結(jié)論

在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，運(yùn)用Plackett Burman試驗(yàn)和響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn)對山楂多糖提取工藝進(jìn)行優(yōu)化，獲得山楂多糖最佳提取條件為液料比28∶1（mL∶g）、浸提溫度79℃，醇析乙醇體積分?jǐn)?shù)71%。在此最佳條件下，山楂多糖的提取率為7.97%。結(jié)果表明，建立的回歸模型擬合程度良好，理論值和預(yù)測值基本一致；體外抗氧化性研究表明，山楂多糖具有一定清除DPPH自由基、羥自由基和ABTS自由基的能力。

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Extraction and antioxidant activity of hawthorn polysaccharides

ZHENG Pengpeng,LI Shan,QI Lirong,YANG Zhengtao,ZHANG Ting,AO Xinyu*
(College of Life Science,Southwest Forestry University,Kunming 650224,China)

In order to determine the optimum conditions for polysaccharides extraction from hawthorn and its antioxidant activity,on the basis of single factor experiments,the results were screened by Plackett Burman(PB)test and optimized by response surface methodology.The optimum conditions for polysaccharides extraction from hawthorn were liquid-material ratio 28:1(ml:g),temperature 79℃,ethanol concentration 71%.Under the optimum conditions,the extraction ratio of polysaccharides was 7.97%.The hawthorn polysaccharides had the capability of scavenging DPPH radical,hydroxyl free radical and ABTS radical.

hawthorn;polysaccharides;response surface methodology;antioxidant activity

R285

A

0254-5071（2015）06-0107-07

10.11882/j.issn.0254-5071.2015.06.024

2015-05-06

云南省優(yōu)勢特色重點(diǎn)學(xué)科生物學(xué)一級學(xué)科建設(shè)項(xiàng)目（50097505）

鄭朋朋（1990-），男，碩士研究生，研究方向?yàn)樯锘瘜W(xué)與分子生物學(xué)。

*通訊作者：敖新宇（1978-），男，副教授，碩士，研究方向?yàn)榉肿由飳W(xué)。