柳文271000山東省泰安市藥品不良反應(yīng)監(jiān)測中心

中藥治療骨質(zhì)疏松癥臨床前藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)述評

柳文
271000山東省泰安市藥品不良反應(yīng)監(jiān)測中心

骨質(zhì)疏松癥(OP)作為臨床上一種較為常見的系統(tǒng)性骨代謝紊亂疾病，多表現(xiàn)為骨組織微觀結(jié)構(gòu)退化、全身性骨量下降，進(jìn)而導(dǎo)致骨脆性上升、骨強(qiáng)度減少，于無創(chuàng)或輕、中度創(chuàng)傷下易增加骨折危險度。目前，就骨質(zhì)疏松癥而言，伴隨著其藥物臨床前藥效學(xué)研究力度的不斷加大，筆者從現(xiàn)階段有關(guān)申報治療(或介入骨質(zhì)疏松中藥新藥臨床前藥效學(xué)研究資料)角度出發(fā)，深入研究其中存在的問題，旨在指導(dǎo)臨床實(shí)踐。

骨質(zhì)疏松癥；藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)；系統(tǒng)性骨代謝紊亂

骨質(zhì)疏松屬于系統(tǒng)性骨代謝紊亂疾病，以骨微結(jié)構(gòu)損害、骨量下降為關(guān)鍵特征，易誘導(dǎo)骨脆性上升，增加骨折發(fā)生幾率。據(jù)有關(guān)研究資料顯示，骨質(zhì)疏松癥多見于中老年人，發(fā)生機(jī)制異常復(fù)雜，國內(nèi)對其防治研究尚不十分全面，而該病藥物臨床前藥效學(xué)研究尚存在諸多不足之處[1]。筆者綜合自身多年來實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，綜合相關(guān)中藥制劑審評中存在的一些問題，深入探究其藥物藥效學(xué)研究，現(xiàn)報告如下。

動物模型復(fù)制

就動物模型復(fù)制而言，往往擇取骨再建(非嚙齒類)或骨塑建(嚙齒類)動物開展實(shí)驗(yàn)。而高轉(zhuǎn)換型骨質(zhì)疏松模型主要涵蓋將卵巢切除的靈長類、雌性大鼠、家兔及維甲酸致小鼠骨質(zhì)疏松等；低轉(zhuǎn)換型骨質(zhì)疏松模型涵蓋老年小鼠、大鼠、狗及糖皮質(zhì)激素引起的骨質(zhì)疏松豬、羊、大鼠等。在選擇動物模型上，主要從藥物特征及適應(yīng)證出發(fā)，擇取高轉(zhuǎn)換或低轉(zhuǎn)換型模型。考慮到受試藥物適應(yīng)證具有明顯差異，故模型選擇也存在相同之處。從原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥病理機(jī)制出發(fā)，將其劃分為Ⅰ型、Ⅱ型，前者以高轉(zhuǎn)換型為主要病理特征，可選擇去卵巢模型，同時聯(lián)合其他高轉(zhuǎn)換模型開展實(shí)驗(yàn)；而后者以低轉(zhuǎn)換型為病理特點(diǎn)，故而選擇低轉(zhuǎn)換型模型，需綜合去卵巢模型對藥效學(xué)特征進(jìn)行考察。目前，以卵巢切除復(fù)制的雌性大鼠骨質(zhì)疏松模型已成為了一項(xiàng)金標(biāo)準(zhǔn)，應(yīng)用范圍廣泛。將3～8月齡大鼠復(fù)制成成年大鼠骨質(zhì)疏松模型較為適合，而7～8月齡最佳。

現(xiàn)階段，諸多研究證實(shí)，模型制備在藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)中具有十分重要的作用，故需提高造型成功率[2]。一般而言，去卵巢骨質(zhì)疏松大鼠模型椎骨灰重、干重及密度易下降，體重上升，且子宮極其容易顯現(xiàn)萎縮等現(xiàn)象，骨礦化沉積率增長，可反映骨形成、骨吸收等生化指標(biāo)變化情況。于審評中，易忽視模型制備成功考察，導(dǎo)致藥效學(xué)結(jié)果評價缺失科學(xué)的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。目前，骨質(zhì)疏松模型中可利用的動物種類相對較多，但并不能對人類骨質(zhì)疏松特征進(jìn)行完全復(fù)制。由此可見，在模型選擇上，需最大限度地顯示人類骨質(zhì)疏松特征，保證重復(fù)性良好。據(jù)最新研究表示，鼠類動物制備模型經(jīng)濟(jì)、方便，從人骨與動物骨組織結(jié)構(gòu)可比性角度出發(fā)，狗、羊較為實(shí)用，因其與人骨代謝速率相似，于密質(zhì)骨中存在哈佛氏系統(tǒng)。

臨床前藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)給藥

就實(shí)驗(yàn)給藥而而言，需綜合給藥目的，把握實(shí)驗(yàn)給藥起始時間。在預(yù)防實(shí)驗(yàn)中，可于動物造模后給藥，可規(guī)避骨丟失；在治療實(shí)驗(yàn)中，給藥需于骨質(zhì)疏松造模成功后實(shí)施，可詳細(xì)觀察其對骨丟失的恢復(fù)效果。針對劑量選擇而言，可擇取對某種動物較為適用的劑量，可考察其對骨骼的安全性與良性作用。從給藥周期角度來看，需將骨再建時間納入考慮范圍，同時需考慮模型特征、動物生理、受試藥物臨床定位等因素。通常狀況下，給藥時間＞3 min，靈長類可持續(xù)給藥12 min，大鼠達(dá)16 min[3]。

臨床前藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)檢測指標(biāo)

骨量：采用定量X線斷層照相術(shù)、雙光子骨密度儀、單光子骨密度儀、雙能X線骨密度儀，可對骨密度、質(zhì)量改變情況進(jìn)行檢測。除此之外，于骨組織局部可對骨直徑、長度、重量、骨干重及無機(jī)質(zhì)含量、皮質(zhì)骨厚度、骨灰重等進(jìn)行觀察。若擇取無機(jī)質(zhì)含量、骨灰重、骨干重等指標(biāo)，需進(jìn)行換算至單位體積內(nèi)重量。

生化指標(biāo)：生化指標(biāo)可反映骨形成、骨吸收情況。一般而言，骨吸收生化反映指標(biāo)主要包括尿吡啶交聯(lián)產(chǎn)物、抗酒石酸酸性磷酸酶等，而骨形成指標(biāo)主要包括骨鈣素、血清堿性磷酸酶等。此外，骨生長肽、降鈣素、甲狀旁腺素等可對血中磷、鈣水平及骨代謝進(jìn)行測定。當(dāng)應(yīng)用分析試劑盒時，需考察其對實(shí)驗(yàn)動物有無特異性。一般情況下，嚙齒類動物模型骨質(zhì)疏松多局限于松質(zhì)骨，故而生化指標(biāo)敏感性尚缺。

骨生物力學(xué)：骨生物力學(xué)作為骨強(qiáng)度的關(guān)鍵指標(biāo)，可對骨骼材料力學(xué)、結(jié)構(gòu)力學(xué)性質(zhì)進(jìn)行系統(tǒng)分析。具體而言，主要包括3個方面：①彎曲：對長骨3點(diǎn)(或4點(diǎn))彎曲最大應(yīng)變、應(yīng)力、載荷等進(jìn)行測定；②扭轉(zhuǎn)：一般情況下，對長骨抗扭轉(zhuǎn)強(qiáng)度進(jìn)行測定；③壓縮：通過借助樣品行壓縮承載能力測定。通常而言，可開展扭轉(zhuǎn)實(shí)驗(yàn)，能有效提高骨組織抗扭轉(zhuǎn)強(qiáng)度測定準(zhǔn)確性?？紤]到骨骼屬于一種硬組織，對外力引起的扭轉(zhuǎn)、彎曲及壓縮承受力，通常反應(yīng)骨組織韌性程度及剛性改變情況，而不同部位處的骨骼組織在力學(xué)特征上不盡相同。由此可見，在實(shí)驗(yàn)時，需立足于韌性、剛性等方面來進(jìn)行藥物藥理作用特征分析。

骨形態(tài)計量學(xué)：通?？蛇x擇偏振光顯微鏡、光學(xué)顯微鏡、熒光顯微鏡來對骨局部結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察，主要觀察指標(biāo)包括松質(zhì)骨、類骨質(zhì)、密質(zhì)骨、吸收表面、骨結(jié)構(gòu)、成骨細(xì)胞等。而形態(tài)計量學(xué)指標(biāo)主要涵蓋靜態(tài)指標(biāo)(骨小梁面積百分率、寬度、數(shù)量、分離度等)，動態(tài)指標(biāo)包括骨吸收參數(shù)(包括骨激活頻率、骨吸收周長百分率等)與骨形成參數(shù)(譬如骨礦化沉積率、類骨質(zhì)百分率、骨形成率等)，這類指標(biāo)對實(shí)驗(yàn)結(jié)果易產(chǎn)生較大的影響，故需保證標(biāo)本代表性、客觀性。

綜上所述，在藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果評價中，需全面分析骨密度結(jié)果、生物力學(xué)特征及骨形態(tài)學(xué)變化情況，正確應(yīng)用生化指標(biāo)，予以綜合對比及分析，保證藥效學(xué)結(jié)果評價的客觀性。目前，伴隨著對骨質(zhì)疏松癥研究力度的不斷加大，相信未來會發(fā)現(xiàn)更多安全性藥物，改善骨質(zhì)疏松癥患者預(yù)后。

[1]鄭世存,盛國良,林瀟,等.葛藤異黃酮提取物分散片對絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的療效觀察及作用機(jī)理研究[J].中國骨質(zhì)疏松雜志, 2012,23(11):1054-1057.

[2]杜貴友,曹春雨.中藥治療骨質(zhì)疏松癥實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展[J].中國中藥雜志,2011,21(4): 401-404.

[3]孫福榮,周信,郭楊,等.單味中藥對骨質(zhì)疏松影響的研究概述[J].中國骨質(zhì)疏松雜志, 2012,21(7):667-669.

Review of traditional Chinese medicine preclinical pharmacodynamic experiment in the treatment of osteoporosis

Liu Wen
Drug Adverse Reaction Monitoring Center of Tai'an City,Shandong Province 271000

Osteoporosis(OP)is a more common systemic bone metabolic disorders disease in clinic.It mainly manifests that bone tissue microstructure degradation,systemic bone mass decline,and leads to bone fragility rise,bone strength reduct.It is easy to increase the risk of fracture under a noninvasive or mild and moderate trauma.At present,for osteoporosis,with the increasing drug preclinical pharmacodynamic research efforts,the author deeply study the existing problems from this stage concerned declaration treatment(or interventional treatment of osteoporosis traditional Chinese medicine preclinical pharmacodynamics research data) point of view.It designes to guide the clinical practice.

Osteoporosis;Pharmacodynamic experiment;Systemic bone metabolic disorders

10.3969/j.issn.1007-614x.2015.8.6