李 釗，王雄彪

(上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬普陀醫(yī)院，上海 200062)

綜 述

淫羊藿甙的研究進(jìn)展

李 釗，王雄彪

(上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬普陀醫(yī)院，上海 200062)

淫羊藿甙；生物活性；人工制備

淫羊藿甙(icariin，ICA)來(lái)源于小檗科植物朝鮮淫羊藿(epimdium koreanum)和心葉淫羊藿(epimdium berberidaceae maxim)的地上部分。淫羊藿是我國(guó)傳統(tǒng)的補(bǔ)益類中藥，具有補(bǔ)腎陽(yáng)、強(qiáng)筋骨、祛風(fēng)濕的作用，主治陽(yáng)痿遺精、虛冷不育、尿頻失禁、腎虛喘咳、腰膝酸軟、風(fēng)濕痹痛、半身不遂等病癥。淫羊藿甙為淫羊藿黃酮類提取物的主要成分，也是淫羊藿中主要的抗氧化活性成分[1]。其化學(xué)結(jié)構(gòu)屬黃酮類化合物，具有體內(nèi)體外多種生物活性[2]，有增強(qiáng)人體免疫力，抗腫瘤抗氧化，促進(jìn)組織蛋白質(zhì)合成，促進(jìn)成骨細(xì)胞生長(zhǎng)和抑制破骨細(xì)胞活性等雙向調(diào)節(jié)骨代謝的作用?，F(xiàn)將淫羊藿甙的研究進(jìn)展綜述如下。

1 淫羊藿甙性質(zhì)

淫羊藿甙的分子式為C33H42O16，相對(duì)分子質(zhì)量694.65。其易溶于吡啶，可溶于甲醇、乙醇、乙醇乙酯，難溶于醚、苯、丙酮、氯仿等；遇堿黃色加深，Molish反應(yīng)生成棕色，F(xiàn)eCl3反應(yīng)顯墨綠色，HCl-Mg反應(yīng)呈粉紅色。

2 淫羊藿甙的生物活性

2.1抗腫瘤作用 近年來(lái)研究表明，淫羊藿甙具有抗腫瘤作用。淫羊藿甙可能通過(guò)增加G0/G1期細(xì)胞、減少S期細(xì)胞來(lái)抑制HepG2．2．15細(xì)胞的增殖[3]。淫羊藿甙還可以抑制腫瘤分泌免疫抑制因子TGF-β2，逆轉(zhuǎn)TGF-β2的免疫抑制作用，恢復(fù)殺傷細(xì)胞的殺傷活性，抑制腫瘤細(xì)胞對(duì)外基質(zhì)的黏附性及侵袋力以及抑制人白血病HL-60、K562、U-937細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)HL-60細(xì)胞分化、凋亡，抑制其端粒酶活性。顧欣等[4]研究發(fā)現(xiàn)淫羊藿甙可以通過(guò)下調(diào)ld-1 mRNA水平來(lái)激活p21基因的表達(dá)來(lái)逆轉(zhuǎn)人甲狀腺癌SW579細(xì)胞系的惡性表型。

淫羊藿及其主要有效成分能在不同環(huán)節(jié)、不同程度地增強(qiáng)機(jī)體的抗腫瘤免疫反應(yīng),通過(guò)增強(qiáng)免疫器官、免疫細(xì)胞和免疫因子的活性及腫瘤細(xì)胞的抗原性,達(dá)到抗腫瘤的目的;同時(shí),該藥及其主要成分通過(guò)誘導(dǎo)癌細(xì)胞分化、凋亡,抑制癌細(xì)胞生長(zhǎng)、侵襲、轉(zhuǎn)移及免疫抑制因子(TGF-β2)、炎性細(xì)胞因子、腫瘤端粒酶等活性,從而逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞的生物學(xué)行為,與其他藥聯(lián)用有更好的療效[5],可增強(qiáng)某些藥物的抗腫瘤活性[6]。淫羊霍甙可抑制腫瘤轉(zhuǎn)移的2個(gè)重要的決定因素:腫瘤細(xì)胞黏附與運(yùn)動(dòng)，從而發(fā)揮有效抗腫瘤轉(zhuǎn)移作用。張京偉[7]證明淫羊藿甙可以抑制胃癌細(xì)胞株SGG-7901細(xì)胞黏附、移動(dòng)及侵襲,增加細(xì)胞內(nèi)PKA活性,從而發(fā)揮逆轉(zhuǎn)其惡性表型的作用。

2.2調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)，提高免疫力 現(xiàn)代免疫藥理學(xué)研究表明，淫羊藿甙對(duì)機(jī)體免疫系統(tǒng)具有明顯的調(diào)節(jié)作用，可提高試驗(yàn)所致免疫低下小鼠的免疫水平，其機(jī)制可能是淫羊藿甙能增加脾臟中脾細(xì)胞的絕對(duì)數(shù)量和相對(duì)數(shù)量，提高機(jī)體免疫細(xì)胞的數(shù)量，并能激發(fā)骨髓有核細(xì)胞的增殖，從而發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用[8]。機(jī)體免疫功能的增強(qiáng)除了免疫細(xì)胞數(shù)量增多外，免疫細(xì)胞活性的增強(qiáng)也具有重要意義。劉婧等[9]研究表明淫羊藿甙對(duì)小鼠免疫功能的調(diào)節(jié)不以免疫組織的結(jié)構(gòu)改變?yōu)榛A(chǔ)而是通過(guò)增強(qiáng)免疫細(xì)胞的活性來(lái)實(shí)現(xiàn)。同種異基因皮片移植模型是移植排斥的經(jīng)典模型之一，也是研究免疫抑制劑對(duì)于細(xì)胞免疫反應(yīng)的影響模型。滕菲等[10]研究表明CSA與淫羊藿甙聯(lián)合應(yīng)用能抑制移植造成的免疫排斥反應(yīng)，可能是通過(guò)抑制受體小鼠的反應(yīng)性T細(xì)胞的活化增殖來(lái)降低細(xì)胞免疫反應(yīng)。另外，研究表明淫羊藿甙可以促進(jìn)神經(jīng)干細(xì)胞的重建和自我更新，從而增強(qiáng)老齡大鼠的學(xué)習(xí)和記憶能力[11]。同時(shí)，淫羊藿甙可以改善快速老化小鼠的記憶能力[12]。

2.3促進(jìn)成骨細(xì)胞生長(zhǎng)和抑制破骨細(xì)胞活性等雙向調(diào)節(jié)骨代謝 骨組織在發(fā)育、形成和正常生理過(guò)程中,不僅存在著細(xì)胞的增殖、分化,而且伴隨著細(xì)胞凋亡，同時(shí)細(xì)胞凋亡也是腫瘤、畸形、自身免疫性疾病等疾病的重要發(fā)病機(jī)制。淫羊藿甙可通過(guò)多個(gè)信號(hào)通路參與抗骨質(zhì)疏松，成骨的調(diào)節(jié)，抗破骨細(xì)胞，促軟骨、血管生成和抗炎[13]。缺氧能抑制成骨細(xì)胞的增殖,促進(jìn)成骨細(xì)胞凋亡，而淫羊藿甙可促進(jìn)護(hù)骨因子的表達(dá)[14]，對(duì)其具有保護(hù)作用，且淫羊藿甙在體外仍具有促進(jìn)成骨細(xì)胞分化能力[15]。另外，淫羊藿甙對(duì)運(yùn)動(dòng)引起的氧化應(yīng)激具有保護(hù)作用[16]。

淫羊藿甙在治療假體置換術(shù)后疼痛、增加骨密度方面有獨(dú)特療效。肖強(qiáng)兵等[17]通過(guò)研究表明淫羊藿甙可以降低假體周圍炎性細(xì)胞因子的含量，從而防治假體松動(dòng)，緩解術(shù)后疼痛。淫羊藿甙促成骨細(xì)胞成熟突出表現(xiàn)在2個(gè)方面：①淫羊藿甙可以增加堿性磷酸酶的活性和上調(diào)成骨細(xì)胞核因子受體的表達(dá)；②淫羊藿甙可以上調(diào)骨形態(tài)發(fā)生蛋白的表達(dá)[18]，減少關(guān)節(jié)炎的臨床癥狀[19]。淫羊藿甙可以有效提高大鼠峰值骨密度和骨質(zhì)量，防止糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)骨細(xì)胞凋亡[20]，有效預(yù)防骨質(zhì)疏松發(fā)生[21]。

2.4抗動(dòng)脈粥樣硬化 藥理作用機(jī)制的微觀研究表明，淫羊藿甙可通過(guò)抑制誘導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的凋亡來(lái)保護(hù)心血管，并可通過(guò)促進(jìn)增殖血管平滑肌細(xì)胞凋亡的作用而發(fā)揮抗動(dòng)脈粥樣硬化療效[22]。趙君玫等[23]利用淫羊藿甙誘導(dǎo)培養(yǎng)的兔血管平滑肌細(xì)胞凋亡，組織原位雜交觀察凋亡基因GRF78在兔斑塊組織中的表達(dá)水平，表明淫羊藿甙可能是通過(guò)上調(diào)葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78基因的表達(dá)促進(jìn)平滑肌細(xì)胞凋亡，從而抗動(dòng)脈粥樣硬化。淫羊藿甙還可以通過(guò)在中央膽堿能電路增強(qiáng)CREB的磷酸化改善中風(fēng)后癡呆癥[24]。

2.5其他 淫羊藿甙不僅可以促成骨細(xì)胞成熟，還可以通過(guò)miRNA-21抗細(xì)胞凋亡從而促胚胎發(fā)育[25]，并用于治療性功能障礙[26]，改善糖尿病引起的勃起功能障礙[27]等并發(fā)癥，并可以增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞對(duì)放療的敏感性[28]。

3 制 備

《中國(guó)藥典》(2010年版)規(guī)定以淫羊藿甙為對(duì)照進(jìn)行總黃酮和淫羊藿甙含量的測(cè)定，以朝藿定C為對(duì)照進(jìn)行巫山淫羊藿含量的測(cè)定。淫羊藿甙和朝藿定A、B、C是淫羊藿中重要的活性成分，高明哲等[29]應(yīng)用工業(yè)制備高效液相色譜從淫羊藿粗提物中分離制備了這4個(gè)成分。淫羊藿粗提物經(jīng)大孔吸附樹(shù)脂粗分離獲得相應(yīng)的組分后，利用工業(yè)制備高效液相色譜完成精制純化。此方法通過(guò)2步分離即可實(shí)現(xiàn)這4種成分的完全分離，具有快速高效、產(chǎn)品純度高的特點(diǎn)，適于淫羊藿中淫羊藿甙、朝藿定A、B、C系列對(duì)照品的規(guī)模制備。

王嬙等[30]以箭葉淫羊藿中總黃酮進(jìn)行水提取，以淫羊藿甙為對(duì)照，用紫外分光光度法在270 nm處測(cè)定淫羊藿總黃酮含量，通過(guò)正交試驗(yàn)確定淫羊藿總黃酮的最佳提取工藝。結(jié)果顯示，2%Na2CO3水溶液15倍量，提取3次，每次1.5 h，淫羊藿總黃酮的提取率為97.92%，該工藝簡(jiǎn)便、可行，生產(chǎn)成本低，并可用色譜分析的方法進(jìn)行客觀質(zhì)量控制。

4 展 望

淫羊藿甙具有多種生物活性和藥理作用，尤其是抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫功能、促進(jìn)促成骨細(xì)胞生長(zhǎng)方面人們已經(jīng)進(jìn)行了大量的研究。隨著研究的深入，淫羊藿甙的其他藥理功能將越來(lái)越多地被人們發(fā)現(xiàn)。利用高分辨質(zhì)譜法(HPLC-HRMS)和質(zhì)譜光譜樹(shù)相似度濾波(MTSF)技術(shù)，可以得到淫羊藿的代謝途徑和代謝圖譜[31]。但現(xiàn)有的研究大多集中于分子水平，藥效等還建立在體外動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方面，對(duì)于其臨床應(yīng)用前景、安全性、有效性的研究也較少，對(duì)淫羊藿甙衍生物的藥理藥效的研究也不是很多，這些都可以作為以后研究的主要方向。另外淫羊藿甙的生物技術(shù)工業(yè)化大生產(chǎn)也可作為一個(gè)研究方向。

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A

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2014-05-30