王 肖，潘偉東，楊明宇，潘海峰?（承德醫(yī)學院，河北承德 067000）

一測多評法的應用及研究概況

王 肖，潘偉東，楊明宇，潘海峰△?
（承德醫(yī)學院，河北承德 067000）

一測多評法；中藥；質量控制

事物的發(fā)展都是由淺入深、由點到線、由線到面的漸進過程，一測多評法（quantitative analysis of multi-components by single-marker，QAMS）的發(fā)展亦然。自2006年王智民等［1］首次提出一測多評法至今不到十年的時間里，其研究應用已從中藥材、中藥飲片發(fā)展到中藥提取物、中藥制劑，從藥品領域發(fā)展到保健食品領域，從含量測定拓展到優(yōu)化提取工藝。到2014年6月，一測多評法相關文獻已有130余篇，其中采用一測多評法對黃連中表小檗堿、黃連堿、巴馬汀、小檗堿的含量測定已載入中國藥典2010年版一部。由此可見，該方法已然成為未來評價中藥質量的必然趨勢。

1 一測多評法的起源

中藥多組分、多功效的特點決定了單一組分的評價難以表達其質量，必須進行多組分的同步測定，而多組分同步測定所需的對照品就成為制約其發(fā)展的瓶頸，為了解決對照品貨源嚴重緊缺、不穩(wěn)定和價格高昂等問題，王智民等率先提出了一測多評法的中藥質量控制和評價方法。其研究思路起源于內標法、校正因子法、主成分自身對照法及紫外百分吸收系數(shù)法等幾個概念，即建立成分間的相對校正因子，通過測定一個易得的對照品實現(xiàn)多組分定量。該方法首次在中藥材木通中針對相對校正因子的耐用性、系統(tǒng)適用性、方法學驗證過程及計算值與實測值之間差異的科學合理性進行了系統(tǒng)研究。一測多評法的提出，得到了業(yè)內研究者的廣泛關注和認可，之后對其原理、適用范圍、方法學驗證等多方面的科學性和適用性又進行了更深入的研究和完善［2-5］。

2 一測多評法在中藥材、中藥提取物及中藥制劑中的應用

自2006年一測多評法提出之后，到2010年，先后在人參、三七、冠脈康膠囊、黃芩、黃連、吳茱萸連翹、黃芪、淫羊藿、柴胡、咽炎片中進行了多組分定量的探索，均得到了令人滿意的結果，之后，該方法廣泛受到業(yè)內學者的關注和認可。2011年，開始出現(xiàn)大量與該方法相關的文獻，其應用范圍覆蓋了原藥材、炮制品、中藥提取物、中藥單方制劑、中藥復方制劑，從測定同類型成分的含量拓展到了測定不同類型成分的含量。

2006年，王智民等首次以中藥材木通為研究對象，建立了木通中三種皂苷類成分的一測多評法，以皂苷PJI為內參物，建立其與百木通皂苷B和C間的相對校正因子，同時采用外標法實測三種成分的含量，用夾角余弦法評價計算值和實測值，結果表明，一測多評法與外標法所得結果無顯著性差異。到2014年6月止，一測多評法已在丹參、五味子、木瓜、穿心蓮等約50種中藥材中得到進一步的探索和應用。

2008年，鄒桂欣等［6］首次以中藥復方制劑冠脈康膠囊為研究對象進行了一測多評法的探索研究，結果表明，利用一測多評法在不同色譜柱的計算值與外標實測值之間沒有顯著性差異，適合中藥制劑的多指標質量評價模式的要求，可以用于控制冠脈康膠囊的質量。目前，一測多評法在中藥制劑質量評價中的探索已涉及多種劑型，包括膠囊劑、片劑、丸劑、口服液、顆粒劑、注射液及外用軟膏等，其中以膠囊和片劑居多。藥物組成從1味（如新清寧片、銀杏葉膠囊、丹參注射液）到17味（如大敗毒膠囊）不等，含1-3味中藥的制劑占多數(shù)［7-10］。

2010年，孔晶晶等［11］首次采用一測多評法測定多種不同類型成分的含量，重點探討了不同類型化合物之間一測多評法的準確性和可行性。結果表明，其計算值與實測值間無顯著性差異，可以在缺少對照品的情況下用于連翹中不同類型成分間的定量評價研究。這一探索擴大了一測多評法的適用范圍，更適用于成分復雜多樣的中藥的質量控制，因此，同行學者相繼在其它中藥材赤芍、虎杖、補骨脂、魚腥草、款冬花等建立不同類型成分間的相對校正因子中做了進一步的探索研究。

2012年，趙君穎等［12］首次以中藥材炮制品酒黃連、萸黃連、姜黃連為研究對象進行了一測多評法的探索研究，結果表明，此方法快捷、經(jīng)濟，可作為黃連不同炮制品的質量檢測方法。

2012年，安士影［13］等首次以中藥材提取物紫錐菊提取物為研究對象，用一測多評法對市售國內紫錐菊提取物中多酚的含量進行了測定，為其綜合質量評價提供研究依據(jù)。

到2014年6月，一測多評法在提取物中的應用有大黃地上部位提取物的質量控制研究、金銀花提取物中6種有機酸類成分的測定、丹參水溶性提取物中4個水溶性成分的含量測定、銀杏葉提取物中7種黃酮類成分的含量測定。

3 一測多評法在保健食品中的應用

2009年，魏峰等［14］首次以保健食品中6種大豆異黃酮類成分為對象進行了相關方法的探索和研究，結果表明，其結果與常規(guī)的含量測定方法測得的結果基本一致，可用于含大豆異黃酮類保健食品的質量控制。若能將經(jīng)濟、實用、快速、高效的一測多評法拓展應用到食品行業(yè)，在規(guī)范食品市場、減少假冒偽劣食品等方面將有很大的發(fā)展空間。

4 一測多評法在優(yōu)化提取工藝中的應用

2011年，汪坤等［15］首次應用一測多評法測定黃連中表小檗堿、黃連堿、巴馬汀、小檗堿的含量，以優(yōu)選黃連最佳提取工藝，之后又在優(yōu)選黃芩提取工藝［16］、優(yōu)選關黃柏生物堿的超聲提取工藝中得到應用［17］。

5 一測多評法結合指紋圖譜的應用

一測多評法的研究思路側重從量上闡明主要成分或藥效成分間的相互關系，是對指紋圖譜數(shù)據(jù)進一步定量挖掘分析，這正好可以彌補中藥指紋圖譜技術模糊性的缺陷。2012年，林芳等［18］首次將一測多評法與指紋圖譜結合起來，對杜仲進行了質量控制研究。2013年，何兵等［19］也將一測多評法結合指紋圖譜應用在對魚腥草的質量評價研究中。這兩種方法的結合有望成為適合中藥特點的質量評價模式，但目前該方向的探索研究還較少，且不夠深入，怎樣將指紋圖譜與一測多評更完美地結合起來仍需進一步的研究。

6 待測成分色譜峰的定位方法

應用一測多評法的關鍵問題之一是如何準確定位待測成分色譜峰。目前，常見的色譜峰定位方法有以下幾種：（1）保留時間差法。假定待測成分與內參物的保留時間差值恒定，以此來定位待測成分［1，6，7，16］。此法適用性較低，應用較少，不建議采用。（2）相對保留時間法。假定待測成分與內參物的保留時間比值恒定，以此來定位待測成分［8-12］。在一測多評法研究中，大部分研究者采用此法，此法誤差相對較小，為首選方法。（3）紫外光譜輔助法.對比待測成分的光譜圖與標準譜圖的方法，此法常結合相對保留時間法，可進一步提高定位準確度［20］。但此方法必須配備二極管陣列檢測器，且結構相似光譜圖差異較小者或無明顯特征峰者無法使用此法，在應用時會受到限制。（4）質譜輔助法.對比待測成分的母離子、碎片離子等質譜信息和標準質譜信息的方法［13，14］。此法定位準確度較高，但必須與質譜儀聯(lián)用，儀器價格、運行成本較高，因此目前采用的也很少。（5）定性對照品法.使用少量對照品對待測成分進行一一定位［21］，此法定位準確，檢測成本也顯著降低，但仍需提供所有的對照品，缺一不可，因此，本法未完全解決對照品的限制，應用很少，未能得到大面積推廣。（6）雙標線性校正法.在相同分析條件下，利用兩種對照品建立多組分在不同液相色譜系統(tǒng)或不同色譜柱上保留時間的線性關系［5，19，22］。該方法由王龍星等［22］為了提高色譜指紋圖譜保留時間重現(xiàn)性而首次提出，2012年，由何兵等［5］應用于一測多評法的色譜峰定位，結果表明，該方法明顯優(yōu)于相對保留時間法。此方法用一個定量對照品和一個定性對照品進行保留時間兩點線性校正，不會顯著增加對照品成本，定位又優(yōu)于應用廣泛的相對保留時間法，因此，該定位方法可能協(xié)助一測多評法以獲更廣的應用前景。

7 小結

一測多評法是一種方便、經(jīng)濟、高效的含量測定方法，它解決了中藥對照品匱乏的瓶頸問題，實現(xiàn)了中藥及其制劑的多組分定量，降低了實際生產(chǎn)中的檢測成本，提高了中藥及其制劑的質量標準，符合中藥質量控制和評價模式的發(fā)展趨勢，對推動中藥現(xiàn)代化具有重要意義。

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1004-6879（2015）02-0157-03

2014-09-12）