喬　鵬，袁　琦，李　佳，田小杏，楊　強，蒲曉輝

(河南大學 藥學院，河南 開封 475004)

瓦松顆粒劑制備工藝的研究

喬鵬，袁琦，李佳，田小杏，楊強，蒲曉輝*

(河南大學 藥學院，河南 開封 475004)

摘要：目的提取瓦松中的黃酮類有效成分，制備成顆粒劑，建立質量標準。方法運用不同方法來提取瓦松中的黃酮類成分，采用濕法制粒技術將其制成口服用的顆粒劑，并對其相關項目進行質量檢查。結果連續(xù)回流法與超聲提取法的平均出膏率分別為5.0%、11.1%；制備的顆粒劑粒度均勻，外觀良好，各項指標均符合要求。結論該顆粒劑制備工藝簡便，質量穩(wěn)定。

關鍵詞：瓦松；總黃酮；連續(xù)回流法；超聲法；顆粒劑；含量測定

瓦松(Orosta.chys fimbriatus(Turcz)Berg)為景天科瓦松屬植物，全國各地均有分布。全草均可入藥，味苦、性寒、有毒，具有抗炎、清熱解毒、止血、利濕、消腫之功效，用于吐血、鼻衄、血痢、瘧疾、痔瘡、濕疹、癰毒、疔瘡等癥[1]。該藥材經(jīng)過數(shù)千年的民間臨床應用，表現(xiàn)出了良好的效果，在民間有著廣泛的應用基礎?，F(xiàn)代藥理研究表明該植物具有抗病毒、抗癌、抗炎、抗菌、強心等作用，但國內外對其化學成分研究較少。

由于顆粒劑攜帶方便，依從性好，易溶解、易吸收，生物利用度優(yōu)于片劑，制備工藝又比片劑、針劑少，所以顆粒劑發(fā)展很快。中藥顆粒劑是由中藥提取物加適量輔料或部分藥材細粉而制成的一種劑型，中藥顆粒的制備工藝通常為：選料→處理→提取→濃縮→干燥→制粒。制粒是顆粒劑制備過程中關鍵的工藝技術，直接影響顆粒劑的質量。中藥顆粒劑技術主要分為：濕法制粒、干法制粒、快速攪拌制粒和流化噴霧制粒[2]。其中濕法制粒技術適用于對濕熱穩(wěn)定的藥物，水溶性中成藥顆粒一般選用濕法制粒，因此，我們實驗也采用濕法制粒。濕法制粒的關鍵技術步驟是制軟材[3]，而制備軟材通常需要一些輔料如稀釋劑、黏合劑等，有時根據(jù)需要加入崩解劑。

1儀器與試劑

1.1　儀器

托盤天平，蒸發(fā)皿，尼龍篩(20目)，燒杯，量筒，抽濾器，索氏提取器，超聲波清洗器，坩堝等；JY-3002型分析天平(福州華志科學儀器有限公司)；G2X-DH500-Ⅱ烘箱(北京中興偉業(yè)儀器有限公司)；UV-2000型紫外分光光度儀(上海洪富儀器儀表有限公司)；RE-2000型旋轉蒸發(fā)儀(上海洪旋實驗儀器有限公司)。

1.2　試劑

醋酸(天津市富宇精細化工有限公司，20120915)；三氯化鋁(東臺市永泰化工有限公司，20100325)；硬脂酸鎂(高密東方化工有限公司，20120910)；滑石粉(高密東方化工有限公司，20120608)；乙醇(天津市德恩化學試劑有限公司，20110712)；亞硝酸鈉(天津市福晨化學試劑廠，20121023)；氫氧化鈉(開封市東大化工有限公司試劑廠，20120618)；硝酸鋁(天津市福晨化學試劑廠，20121025)；蘆丁標準品(中國藥品生物制品檢定所，20110918)；淀粉(河南開封，20121106)；瓦松全草(購自安徽省毫州市和平藥業(yè)有限公司，由河南大學藥學院中藥教研室李欽教授鑒定為景天科植物瓦松Orosta.chys fimbriata(Turcz.)Berg.的干燥地上部分)。

2方法與結果

2.1　提取方法的篩選

2.1.1乙醇連續(xù)回流提取法取干燥的瓦松全草約20 kg，搗碎，包入濾紙，放入索氏提取器內，加石油醚400 mL加熱回流至提取液無色，放冷，棄去石油醚液。加體積分數(shù)95%乙醇200 mL，提取6 h，將提取液轉移到100 mL燒杯中，加熱濃縮，先稱取蒸發(fā)皿重量，將提取物轉入蒸發(fā)皿中，蒸干即得，并稱取總重。

2.1.2超聲提取法取干燥的瓦松全草約20 kg，搗碎，放入大燒杯中，加入1000 mL體積分數(shù)40%的乙醇浸沒24 h，再經(jīng)超聲波萃取45 min，將提取液轉移到100 mL燒杯中，加熱濃縮，先稱取蒸發(fā)皿重量，將提取物轉入蒸發(fā)皿中，蒸干即得，并稱取總重。

2.1.3 出膏率計算公式：

出膏率%=干浸膏重/藥材重量×100%(1)

經(jīng)測定，連續(xù)回流法與超聲提取法的平均出膏率分別為5.0%、11.1%。因此，超聲法提取物將被制成顆粒劑作進一步研究。

2.2　制粒

2.2.1處方瓦松提取物4.0 g，滑石粉16 g，淀粉10 g，淀粉漿10%8.6 g，體積分數(shù)70%乙醇水溶液23 mL，硬脂酸鎂2.0 g，制成100 g顆粒。

2.2.2顆粒劑的制備實驗取瓦松提取物浸膏干粉，與淀粉、滑石粉等處方中輔料混合均勻后，加入適量的黏合劑制軟材，將制得的軟材過20目篩制濕顆粒。顆粒立即干燥，在50~60 ℃干燥(約1 h)，以防止結塊或受壓變形。將干燥后的顆粒通過篩分法進行整粒與分級，一方面使結塊、粘連的顆粒散開，另一方面獲得均勻顆粒。

2.3　顆粒劑的質量檢查

2.3.1外觀顆粒干燥、均勻、色澤一致，無吸潮、軟化、結塊、潮解等現(xiàn)象。

2.3.2粒度取5袋包裝好的顆粒劑，稱定重量，分別置于一號篩和五號篩中過篩。取不能通過一號篩和能通過五號篩的顆粒及粉末，稱定重量，計算所占比例。

經(jīng)測定，實驗制得的顆粒劑不通過一號篩(2000 μm)和能通過五號篩(180 μm)的總和不超過供試量的15%，滿足藥典要求。

2.3.3水分中藥及其制劑、提取物都要檢查水分，因為水分含量過高，可結塊、霉變或有效成分的水解。我們實驗采用Chp2010一部附錄收載的烘干法進行水分測定。取供試品2~5g，平鋪于干燥至恒重的扁形稱量瓶中，厚度不超過5 mm，疏松供試品不超過10 mm，精密稱定，打開瓶蓋在100~105℃干燥5 h，將瓶蓋蓋好，移至干燥器中，冷卻30 min，精密稱定，再在上述溫度干燥1 h，冷卻，稱重，至連續(xù)2次稱重的差異不超過5 mg為止。根據(jù)減失的重量，計算供試品中的含水量(%)。

由結果可知：根據(jù)減失的重量計算可得供試品中的含水量為0.8%<6.0%，符合要求。(按照水分測定法測定，中藥顆粒劑的含水量不得超過6.0%。)

2.3.4溶化性依據(jù)溶化性的相關規(guī)定檢查，對所制得的顆粒劑的溶化性進行測定。取10 g所制得的顆粒劑，加入200 mL熱水，5 min后全部溶解，無異物存在，即所制得顆粒劑的溶化性符合規(guī)定。

2.3.5干燥失重按照干燥失重測定法要求，不含糖顆粒應于105 ℃干燥至恒重，含糖顆粒應在80 ℃減壓干燥，減失重量不得超過2.0%。我們實驗取供試品(大顆粒先研細)平鋪于扁形稱量瓶中，放入干燥箱在105 ℃進行干燥5 h，瓶蓋蓋好，移至干燥器中，冷卻30 min，精密稱定，再在上述溫度干燥1 h，冷卻，稱重，至連續(xù)2次稱重的差異不超過0.3 mg為止。根據(jù)減失的重量，按公式(2)計算得出供試品中的干燥失重，見表1。

干燥失重%=減失的重量/樣品重×100%

(2)

表1　水分的測定和干燥失重

注：按照干燥失重的計算公式可得供試品的干燥失重比為1.1%<2.0%，符合要求。

2.4　含量測定方法的建立

2.4.1樣品溶液的配制對照品溶液的配制：精密稱取在120 ℃干燥至恒重的蘆丁對照品25 mg，置于50 mL量瓶，加乙醇適量，超聲處理使溶解，放冷，加體積分數(shù)70%乙醇至刻度，搖勻。精密量取20 mL，置于50 mL量瓶中，加水至刻度，搖勻，制成每1 mL中含蘆丁0.2 mg的溶液。

供試品溶液的配制：取顆粒劑0.5 g，精密稱定，置于250 mL量瓶中，用乙醇100 mL超聲使溶解，放冷，加乙醇至刻度，搖勻，即得。

2.4.2線性關系考察精密量取上述對照品溶液1、2、3、4、5、6、7、8 mL分別置于25 mL量瓶中，各加水3 mL，加亞硝酸鈉溶液1 mL，搖勻，靜置6 min，加硝酸鋁溶液1 mL，搖勻，放置6 min，加入1.0 mol/L氫氧化鈉溶液10 mL，用蒸餾水定容至25 mL，放置15 min，以相應試劑為空白，在波長500 nm處測定吸光度，以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線[4]。結果表明，蘆丁在7.456 μg/mL～59.648 μg/mL范圍內線性關系良好，符合比爾定律，得線性回歸方程為：A=0.012 3C+0.033 7，相關系數(shù)r=0.9996。

2.4.3加樣回收率實驗精密稱取已知含量的供試品，精密加入對照品適量(高、中、低3個水平，各3份)，按2.4.2方法測定總黃酮含量[5]，計算回收率，結果見表2。

表2　總黃酮的加樣回收率

2.4.4精密度實驗取本品，按“供試品溶液的配制”項下制備供試品溶液，精密量取0.5 mL，置于25 mL量瓶中，按2.4.2“各加水3 mL”起依法操作，在波長500 nm處測定吸光度，重復操作5次，吸光度(A)的RSD為1.40%。

2.4.5穩(wěn)定性實驗取同一份供試品溶液0.5 mL，置于25 mL量瓶中，按“2.4.2各加水3 mL”起依法操作，分別在15、20、25、30、45 min時對其吸光度進行測定，RSD為1.62%，說明供試品溶液在制樣后45 min內穩(wěn)定。

2.4.6樣品含量的測定精密量取供試品溶液0.5 mL，置于25 mL量瓶中，按2.4.2“各加水3 mL”起依法操作，在波長500 nm處測定吸光度，并計算含量，結果見表3。

表3　含量測定結果

3討論

3.1　總黃酮的提取及測定

我們實驗所提取的黃酮類化合物溶液用顯色法測定時會產生渾濁現(xiàn)象，給測定結果帶來誤差，但可通過平行操作，多次測定求平均值等方法使結果更加準確。熒光分析法直接測定總黃酮含量雖然操作簡便，成本低，但熒光強度易受溶劑、pH值、表面活性劑和放置時間的影響。高效液相色譜法雖然使用較多，準確度相對可靠，但儀器比較昂貴，色譜柱易被污染，且污染后難于清洗，使色譜柱的使用壽命縮短，不便于大量樣品快速檢驗。我們采用紫外法測定，方法簡單，能滿足靈敏度及精密度的要求，且準確度高。

3.2　制備

①建立了瓦松顆粒劑的質量控制標準，從外觀、粒度、水分、溶化性、干燥失重5個方面全面評價瓦松顆粒劑的質量。②提取物中含有較多糖類物質，有較強的吸濕性，加入適量滑石粉以克服。③顆粒劑中常用的黏合劑有淀粉漿、纖維素衍生物等，本實驗采用淀粉漿，濃度范圍為5%~30%，并通過單因素篩選，確定選用濃度為10%淀粉漿；中藥顆粒劑中經(jīng)常用水或乙醇-水的混合液作為潤濕劑進行制粒，通過單因素篩選確定采用70%乙醇-水溶液。④黏合劑加入時，應少量多次加入，應控制使軟材達到以手握之可成團狀，手指輕壓時又可散裂而不成粉狀為度。將軟材擠壓過篩，制得的顆粒應以無長條狀、塊狀和過多的細粉為宜。通過對制得顆粒的質量檢查，可認定該處方制成顆粒劑的制備工藝是合理的。

參考文獻：

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[3] 崔福德，龍曉英．藥劑學[M]．北京：人民衛(wèi)生出版社, 2011： 248-250.

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[5] 董怡，林戀竹，趙謀明．光果甘草葉總黃酮測定方法[J]．食品科學, 2013, 34(06): 195-198.

[責任編輯李武營]

Study on granule of orosta.chys fimbriatus

QIAO Peng, YUAN Qi, LI Jia, TIAN Xiaoxing, YANG Qiang, PU Xiao-hui*

(PharmaceuticalCollegeofHenanUniversity,Kaifeng,Henan475004,China)

Abstract:ObjectiveThe flavonoids in Orosta.chys fimbriatus were extracted for preparing of granules, and Setting up quality standards. MethodsThe flavonoids in Orosta.chys fimbriatus were extracted by different methods, which made oral granules by wet granulation, and checked the quality of the relevant project. ResultsRespectively, the average extract rate were 5.0%, 11.1%, the prepared granules has uniform size, good appearance, the indicators were in line with requirements. Conclusion The preparation technology of granules was simple and stability.

Key words:Orosta.chys fimbriatus; total flavonoids; continuous reflux extraction; ultrasonic method; granules; determination

*通訊作者：蒲曉輝(1980-)，男，河南開封市人，博士，副教授，碩士生導師，從事藥物新劑型的研究工作。

作者簡介：喬鵬(1991-)，男，河南開封市人，碩士研究生，從事藥物新劑型的研究工作。

基金項目：河南省人才培養(yǎng)聯(lián)合基金資助項目(U1304826)；河南大學自然科學基礎研究項目(2010YB2R019)；河南大學2012年度大學生創(chuàng)新性試驗計劃項目(12NA013)。

收稿日期：2015-05-18

文章編號：1672-7606(2015)03-0171-04

中圖分類號：R944.27

文獻標識碼：A