黃慧 黃傳生 劉志良 楊文萍

兒童伯基特淋巴瘤的預(yù)后影響因素初步研究

黃慧 黃傳生 劉志良 楊文萍

目的探討兒童伯基特淋巴瘤(BL)臨床病理參數(shù)和染色體13q14．3缺失與其預(yù)后的關(guān)系。方法收集33例術(shù)后進(jìn)行化療的BL患者臨床病理資料，采用免疫組化SP法檢測bcl-6、MUMl和P53蛋白的表達(dá)，熒光原位雜交(FISH)技術(shù)檢測染色體13q14．3。結(jié)果33例BL臨床分期:Ⅰ+Ⅱ期12例、Ⅲ+Ⅳ期16例、無法分期5例;隨訪時間為4～120個月，其中生存27例、死亡6例(均為Ⅲ或Ⅳ期);臨床分期為進(jìn)展期(P=0．024)和低白蛋白血癥(P=0．053)者預(yù)后相對較差;bcl-6、MUMl和P53陽性率分別為90．9%(30例)、21．2%(7例)、30．3%(10例)，其表達(dá)均與預(yù)后無關(guān)(P＞0．05)。染色體13q14．3缺失8例，與染色體13q14．3正常者相比，生存期無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0．137)。結(jié)論兒童BL的預(yù)后與臨床分期與血清白蛋白水平有關(guān)，染色體13q14．3缺失和其免疫表型與其預(yù)后關(guān)系還需進(jìn)一步研究。

伯基特淋巴瘤;免疫組織化學(xué);熒光原位雜交;預(yù)后

(The Practical Journal of Cancer，2015，30:1143～1145)

伯基特淋巴瘤(burkitt lymphoma，BL)是兒童最常見的B細(xì)胞淋巴瘤［1］，雖然BL的治愈率逐步提高，但仍有少部分患者復(fù)發(fā)而死亡［2］。影響B(tài)L的預(yù)后因素較多，本實(shí)驗(yàn)收集33例手術(shù)后進(jìn)行化療的BL患者臨床資料，應(yīng)用免疫組化和熒光原位雜交(FISH)技術(shù)，進(jìn)行bcl-6、MUMl、P53蛋白和染色體13q14．3檢測，初步探討其與預(yù)后的關(guān)系。

1 資料與方法

1．1 病例來源

收集江西省兒童醫(yī)院和江西省腫瘤醫(yī)院2000年-2013年12月根據(jù)形態(tài)學(xué)結(jié)合免疫組化和分子遺傳學(xué)特征進(jìn)行診斷的33例術(shù)后進(jìn)行化療的BL患者的臨床病理資料，診斷標(biāo)準(zhǔn)參照2008年WHO淋巴造血系統(tǒng)腫瘤分類標(biāo)準(zhǔn)［3］。采用電話或查閱病例形式進(jìn)行隨訪，隨訪截止時間為2014年8月31日。

1．2 免疫組化

免疫組化染色采用SP法，所用一抗bcl-6、MUMl和P53均購自北京中杉金橋有限公司，操作按照說明書進(jìn)行，當(dāng)腫瘤陽性細(xì)胞＞30%時判斷為陽性［4］。

1．3 熒光原位雜交(FISH)

針對染色體13q14．3的D13S319探針購自美國Vysis公司，操作步驟參考文獻(xiàn)［2］，結(jié)果判讀參考文

獻(xiàn)［5］。

1．4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 17．0統(tǒng)計(jì)學(xué)分析軟件，率的比較采用χ2檢驗(yàn)，生存曲線分析采用Kaplan-Meier法。

2 結(jié)果

2．1 臨床資料

33例BL中男性27例、女性6例;年齡2～13歲，平均年齡5．8歲;發(fā)病部位:腹腔30例、頸部淋巴結(jié)2例、睪丸1例;臨床分期:Ⅰ+Ⅱ期12例、Ⅲ+Ⅳ期16例、無法分期5例。隨訪時間為4～120個月，其中生存27例、死亡6例(均為Ⅲ或Ⅳ期，病例4和5瘤體廣泛浸潤未完整切除且未做骨髓穿刺)。血清白蛋白＜35 g/L 10例，臨床分期為進(jìn)展期(P=0．024)和低白蛋白血癥(P=0．053)者預(yù)后相對較差(表2)。6例死亡患者的臨床資料見表1。

表1 6例死亡患者的臨床資料和免疫表型

2．2 免疫組化和FISH結(jié)果

33例BL中bcl-6、MUMl和P53陽性表達(dá)率分別為90．9%(30例)、21．2%(7例)、30．3%(10例)，其表達(dá)均與預(yù)后無關(guān)(P=0．078、0．093、1．000)。染色體13q14．3缺失8例(其中死亡患者為病例1、2、6)，與染色體13q14．3正常者相比，生存期無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0．137)(表2)。

表2 臨床病理參數(shù)和染色體13q14．3缺失與BL預(yù)后的關(guān)系/例

3 討論

BL是1種腫瘤細(xì)胞倍增時間短的高度惡性淋巴瘤，為了避免患者進(jìn)一步惡化，在外科手術(shù)后需立即進(jìn)行化療。BL對化療非常敏感，是其主要治療手段，雖然BL的治愈率達(dá)到80%～90%，但仍有10%～20%的患兒復(fù)發(fā)或死亡［2-3］。目前的治療方案容易使患兒在化療早期出現(xiàn)急性腫瘤溶解綜合征而導(dǎo)致死亡，即使患者度過了危險期，在規(guī)律化療后停藥也可出現(xiàn)復(fù)發(fā)［6］。影響B(tài)L預(yù)后的臨床因素包括乳酸脫氫酶(LDH)血清水平、臨床分期和腫瘤直徑等［3］。血清白蛋白水平是反應(yīng)機(jī)體營養(yǎng)狀況的重要指標(biāo)之一，低蛋白血癥患者對手術(shù)或化療的耐受性下降，感染的幾率也增高，因此低蛋白血癥腫瘤患者預(yù)后相對較差［7］。本組實(shí)驗(yàn)患者臨床分期為進(jìn)展期和低蛋白血癥患者預(yù)后相對較差，與文獻(xiàn)報(bào)道的一致。

MUM1表達(dá)于正常組織中的漿細(xì)胞、一小部分發(fā)育后期的生發(fā)中心細(xì)胞和活化的T細(xì)胞，在B細(xì)胞向漿細(xì)胞分化階段起著重要作用，可以作為生發(fā)中心晚期和生發(fā)中心后B細(xì)胞標(biāo)記物［8］。BL是起源于生發(fā)中心或生發(fā)中心后B細(xì)胞的侵襲性淋巴瘤［3］，MUM1在BL中陽性率表達(dá)的報(bào)道不一致，Tumwine等［9］的實(shí)驗(yàn)中未發(fā)現(xiàn)陽性病例，但Gualco等［10］報(bào)道MUM1在兒童和成人BL中的陽性率分別為43%和38%。MUM1作為1種癌基因蛋白，陽性表達(dá)者具有更高的侵襲性在多種淋巴瘤中得到證實(shí)，如MUM1在3級濾泡性淋巴瘤中陽性率比1～2級明顯高，作者推測MUMl陽性濾泡性淋巴瘤特征可能類似于非生發(fā)中心

B細(xì)胞起源的高度惡性淋巴瘤［11］。在外周T細(xì)胞淋巴瘤中MUM1陰性者中位生存期和中位無進(jìn)展生存期比陽性者長［12］。bcl-6是生發(fā)中心B細(xì)胞標(biāo)記物，我們的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)MUM1陽性和bcl-6陰性患者預(yù)后相對較差，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，其表達(dá)意義和機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

MDM2-P53-P21WAF1/CIP1信號通路是P53基因通路中的重要通路，P53基因在BL中發(fā)生突變可使其促凋亡功能喪失，同時MDM2過表達(dá)又可抑制P53蛋白的表達(dá)，這些蛋白的異常表達(dá)導(dǎo)致BL細(xì)胞周期調(diào)控紊亂［13］。P53蛋白的表達(dá)與彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤的預(yù)后差有關(guān)［4，14］，遺憾的是，本組實(shí)驗(yàn)未發(fā)現(xiàn)P53蛋白表達(dá)與BL預(yù)后差有關(guān)。

染色體13q14．3缺失與預(yù)后的關(guān)系最先在多發(fā)性骨髓瘤和慢性淋巴細(xì)胞白血病中發(fā)現(xiàn)，之后Nelson等［15］運(yùn)用FISH方法檢測90例BL標(biāo)本，發(fā)現(xiàn)染色體13q缺失率為42%，其中單獨(dú)染色體13q14．3缺失為14%，染色體13q34缺失率為8%，兩者同時缺失率為20%。生存分析顯示，染色體13q14．3基因缺失與預(yù)后差有關(guān)，在死于疾病進(jìn)展的6例患者中，5例存在染色體13q14．3基因缺失。本組實(shí)驗(yàn)8例(24．2%)存在染色體13q14．3缺失，死亡的6例患者中3例存在染色體13q14．3缺失，但與正常者相比，生存期無差異，可能與部分病例隨訪時間短和樣本量較小有關(guān)。

我們初步對33例手術(shù)后進(jìn)行化療的BL患者預(yù)后影響因素進(jìn)行了分析，發(fā)現(xiàn)臨床分期和血清白蛋白水平是影響患者預(yù)后的因素。免疫表型和基因異常與BL的預(yù)后有關(guān)，在今后的實(shí)驗(yàn)中有待進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)。

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Study of Prognostic Factors of Burkitt Lymphoma in Children

HUANG Hui，HUANG Chuansheng，LIU Zhiliang，et al．Jiangxi Children＇s Hospital，Nanchang，330006

ObjectiveTo analyze the clinicopathological features and 13q14．3 deletion in burkitt lymphoma(BL)in children and relationship with prognosis．MethodsThe clinicopathological data of 33 patients with BL who received chemotherapy after surgery were retrospectively analyzed．The expression of bcl-6，MUM1 and P53 was detected by immunohistochemistry，and 13q14．3 deletions by fluorescence in situ hybridization(FISH)．ResultsIn 33 cases，12 cases were stageⅠandⅡ，16 cases were stageⅢandⅣ，5 cases were unable to stage．Follow up time was 4～120 months，survival 27 cases，death 6 cases(all in stageⅢandⅣ)．Advanced clinical stage and low serum albumin level were associated with poor diagnosis(P=0．024 and 0．053，respectively)．The positive rates of bcl-6，MUMl and P53 were 90．9%(30 cases)、21．2%(7 cases)、30．3%(10 cases)，and there was no significant correlation with prognosis．13q14．3 deletion were 8 cases，compared with normal cases there had no significant difference in overall survival(P=0．137)．ConclusionClinical stage and serum albumin level are associated with poor diagnosis of BL，its relation with 13q14．3 deletion needs further study．

Burkitt lymphoma;Immunohistochemistry;Fluorescence in situ hybridization;Prognosis(FISH)

10．3969/j．issn．1001-5930．2015．08．011

R733．4

A

1001-5930(2015)08-1143-03

2014-10-16

2015-02-12)

(編輯:吳小紅)

江西省衛(wèi)生廳課題項(xiàng)目(編號:20143177)

330006江西省兒童醫(yī)院病理科(黃慧，楊文萍); 330029江西省腫瘤醫(yī)院病理科(黃傳生，劉志良)

黃傳生