王志恒，楊維仁＊，郭寶林，王德海，劉曉明，張崇玉，趙麗芳

（1.山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，泰安271018；2.北京昕大洋科技發(fā)展有限公司，北京100081）

磷是動(dòng)物生命活動(dòng)所必需的礦物質(zhì)元素，具有重要的生理功能和代謝功能。但植物性飼料中60%～80%的磷是以植酸磷的形式存在，極少能被單胃動(dòng)物利用［1］。為了滿足畜禽對磷的需要，人們會(huì)在日糧中添加大量的磷酸氫鈣作為補(bǔ)充，增加了飼料成本。植酸酶可有效提高畜禽對植物性飼料中磷的利用率，減少飼料中無機(jī)磷的添加量［2］。前人研究發(fā)現(xiàn)，在日糧中添加植酸酶不僅能顯著提高豬對礦物元素、粗蛋白質(zhì)等養(yǎng)分的消化率，還可以在日糧降低磷酸氫鈣添加量的情況下改善豬的生長性能［3-5］。但是對于在日糧中添加植酸酶降低無機(jī)磷添加量的研究，目前主要是應(yīng)用在雞以及肥育豬上，在保育豬上的研究較少。

本試驗(yàn)全面系統(tǒng)地研究了在不同無機(jī)磷水平日糧中添加植酸酶對保育豬的營養(yǎng)效果，為保育豬養(yǎng)殖過程中合理應(yīng)用植酸酶及確定無機(jī)磷的最佳用量提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

植酸酶由北京昕大洋科技發(fā)展有限公司提供，酶活性為5 000 FTU·g-1。飼料級磷酸氫鈣，磷含量16.36%，鈣含量20.92%。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與試驗(yàn)日糧

選擇（40±2）日齡，平均初重為（9.12±0.29）kg，個(gè)體間體重?zé)o顯著差異的杜長大（杜洛克×長白×大白）三元雜交豬224頭，隨機(jī)分為7個(gè)處理組，每個(gè)處理組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)8頭豬。處理Ⅰ為對照組，飼喂基礎(chǔ)日糧（參照NRC（1998）配制，通過加入磷酸氫鈣滿足磷需要量），處理Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ組磷酸氫鈣水平分別為對照組的100%、75%、50%、25%、0%，并添加750 FTU·kg-1的植酸酶，處理Ⅶ組不添加磷酸氫鈣和植酸酶為陰性對照組?；A(chǔ)日糧組成與營養(yǎng)水平見表1。試驗(yàn)飼糧鈣、磷含量按試驗(yàn)要求調(diào)整。試驗(yàn)飼糧礦物質(zhì)水平及植酸酶添加水平見表2。

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)豬在同一圈舍內(nèi)統(tǒng)一飼養(yǎng)管理，試驗(yàn)期間控制舍內(nèi)溫度在（21±3）℃，相對濕度（80±3）%。預(yù)試7 d后正式試驗(yàn)開始，飼喂試驗(yàn)日糧，試驗(yàn)期35 d。試驗(yàn)豬自由采食飲水。

1.4 測定指標(biāo)及方法

1.4.1 生長性能指標(biāo) 試驗(yàn)第1和第35天早飼前稱重，試驗(yàn)期間每天記錄采食量，計(jì)算平均日增重和料重比。

1.4.2 血清生化指標(biāo) 試驗(yàn)第35天早飼前，在每個(gè)重復(fù)中選取一頭與平均體重相近，健康狀況良好的豬采集前腔靜脈血20 m L于離心管中，以3 000 r·min-1離心5 min，取上層血清，在-20℃下保存?zhèn)溆?。采用日?600全自動(dòng)生化分析儀測定血清鈣、磷濃度以及血清堿性磷酸酶（ALP）活性。

1.4.3 消化試驗(yàn)指標(biāo) 消化試驗(yàn)采用指示劑法，以鹽酸不溶灰分（AIA）為內(nèi)源指示劑。在試驗(yàn)第28～第34天早飼前收集糞樣150 g用于粗蛋白含量測定，100 g用于鈣磷含量測定，用于測定粗蛋白含量的糞樣每份鮮糞滴加15 m L硫酸（100 m L·kg-1）固氮，以避免糞中氨氮損失。收糞結(jié)束后將每個(gè)重復(fù)7 d收集的糞樣混合均勻；將用于測

定鈣磷含量的糞樣放在烘箱中65℃下烘干至恒重，經(jīng)室溫回潮24 h后粉碎制成烘干樣。采用凱氏定氮法測定飼料及糞中蛋白含量，高錳酸鉀滴定法測定飼料及糞中鈣含量，鉬黃比色法（WFJ-7200分光光度計(jì)）測定飼料及糞中磷含量。

表1 基礎(chǔ)日糧組成與營養(yǎng)水平Table 1 Compositions and nutrient levels of basal diets %

表2 試驗(yàn)飼糧礦物質(zhì)水平及植酸酶添加水平Table 2 Mineral composition and added phytase activity of experimental diets g·kg-1

1.5 統(tǒng)計(jì)方法

數(shù)據(jù)采用SAS 9.2軟件，進(jìn)行單因素方差分析（one-way ANOVA），差異顯著性采用Duncan氏多重比較檢驗(yàn)（P＜0.05者為差異顯著）。

2 結(jié) 果

2.1 不同無機(jī)磷水平日糧添加植酸酶對保育豬生長性能的影響

不同無機(jī)磷水平日糧添加植酸酶對保育豬生長性能的影響見表3。由表3可知，100%磷酸氫鈣加酶組的平均日采食量和平均日增重最高，但與75%、50%磷酸氫鈣加酶組及對照組差異不顯著（P＞0.05）；無磷酸氫鈣加酶組的平均日采食量和平均日增重與負(fù)對照組無顯著差異（P＞0.05）；隨日糧無機(jī)磷水平的降低，加酶組的平均日采食量和平均日增重呈線性（P＜0.01）和二次曲線（P＜0.01）降低。100%磷酸氫鈣加酶組的料重比最低，但與對照組及75%、50%、25%磷酸氫鈣加酶組無顯著差異（P＞0.05）；無磷酸氫鈣加酶組的料重比顯著低于陰性對照組（P＜0.05）。分析結(jié)果表明，本試驗(yàn)條件下，在日糧中添加750 FTU·kg-1的植酸酶同時(shí)降低25%～50%的磷酸氫鈣添加量對保育豬的生長性能沒有明顯影響；并且，在低無機(jī)磷日糧中添加植酸酶能顯著提高保育豬的生長性能。

表3 不同無機(jī)磷水平日糧對保育豬生長性能的影響Table 3 Effects of inorganic phosphorus with different levels on the growth performance in nursery pigs

2.2 不同無機(jī)磷水平日糧添加植酸酶對保育豬血清生化指標(biāo)的影響

不同無機(jī)磷水平日糧添加植酸酶對保育豬血清生化指標(biāo)的影響見表4。表4數(shù)據(jù)顯示，各組間血清鈣濃度無顯著差異（P＞0.05）。100%、75%磷酸氫鈣加酶組的血清磷濃度顯著低于對照組（P＜ 0.05），無磷酸氫鈣加酶組的血清磷濃度和ALP活性與陰性對照組無顯著差異（P＞0.05）；隨日糧磷水平的降低，加酶組血清磷濃度呈線性（P＜0.01）和二次曲線（P＜0.01）降低，ALP活性呈線性（P＜0.01）和二次曲線（P＜0.01）升高。25%磷酸氫鈣加酶組和無磷酸氫鈣組的血清磷濃度顯著低于對照組（P＜0.05），血清ALP活性顯著高于對照組（P＜0.05），說明日糧磷水平不足，無法滿足保育豬的生長需要。

表4不同無機(jī)磷水平日糧對保育豬血清生化指標(biāo)的影響Table 4 Effects of inorganic phosphorus with different levels on the serum biochemical parameters in nursery pigs

2.3 不同無機(jī)磷水平日糧添加植酸酶對保育豬養(yǎng)分消化率的影響

不同無機(jī)磷水平日糧添加植酸酶對保育豬養(yǎng)分表觀消化率的影響見表5。由表5可知，隨日糧磷水平降低，加酶組的鈣、磷、粗蛋白及干物質(zhì)的表觀消化率均呈線性（P＜0.01）和二次曲線（P＜0.01）升高。100%磷酸氫鈣加酶組的鈣、磷表觀消化率與對照組差異不顯著（P＞0.05）；無磷酸氫鈣加酶組的鈣、磷表觀消化率顯著高于陰性對照組（P＜0.05）；隨日糧磷水平降低，加酶組鈣表觀消化率較對照組分別提高了0.89%（P＞0.05）、7.70%（P＜0.05）、8.53%（P＜0.05）、8.22%（P＜0.05）、15.66%（P＜0.05）、磷表觀消化率較對照組分別提高了1.21%（P＞0.05）、3.07%（P＜0.05）、4.14%（P＜0.05）、4.99%（P＜0.05）、10.03%（P＜0.05）。100%磷酸氫鈣加酶組的粗蛋白及干物質(zhì)的表觀消化率與對照組無顯著差異（P＞0.05）；無磷酸氫鈣加酶組的粗蛋白及干物質(zhì)表觀消化率與陰性對照組差異不顯著（P＞0.05）；與對照組相比，加酶組粗蛋白表觀消化率分別提高了0.78%（P＞0.05）、0.33%（P＞0.05）、2.15%（P＜0.05）、2.34%（P＜0.05）、3.73%（P＜0.05），干物質(zhì)表觀消化率較對照組分別提高了0.21%（P＞0.05）、1.61%（P＞0.05）、2.06%（P＞0.05）、3.88%（P＜0.05）、4.94%（P＜0.05）。試驗(yàn)結(jié)果顯示，在保育豬日糧中添加750 FTU·kg-1的植酸酶，顯著提高了無磷酸氫鈣組的鈣、磷表觀消化率，而對100%磷酸氫鈣組各種養(yǎng)分的表觀消化率沒有明顯影響，說明植酸酶在低磷日糧中能更大限度的發(fā)揮作用。

3 討 論

3.1 不同無機(jī)磷水平日糧添加植酸酶對保育豬生長性能的影響

韓延明等［6］報(bào)道，在生長豬日糧中添加植酸酶替代部分磷酸氫鈣，豬的生長性能無顯著下降。X.G.Lei等［7］研究表明，在斷奶仔豬低磷日糧中添加植酸酶后，顯著提高了平均日增重和平均日采食量，飼料轉(zhuǎn)化率也有所改善。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在日糧添加植酸酶的情況下降低磷酸氫鈣添加量的25%～50%，保育豬的平均日增重、平均日采食量和料重比均無明顯下降，這進(jìn)一步說明了植酸酶可以提高保育豬對飼料中磷的利用率，改善生長性能。J.A.Jendza等［8］試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，豬飼喂含植酸酶不添加無機(jī)磷日糧的生長性能顯著低于含無機(jī)磷日糧組，這與本試驗(yàn)結(jié)果一致。本試驗(yàn)中，無磷酸氫鈣加酶組保育豬的平均日采食量和平均日增重較含磷酸氫鈣組明顯下降，其原因可能是試驗(yàn)日糧中的磷水平過低，保育豬的采食量下降，從而引起生長速度的下降［9］。

表5 不同無機(jī)磷水平日糧對保育豬養(yǎng)分表觀消化率的影響Table 5 Effects of inorganic phosphorus with different levels on the apparent digestibility of nutrients in nursery pigs %

本研究發(fā)現(xiàn)，在保育豬日糧中添加750 FTU·kg-1的植酸酶能顯著改善無磷酸氫鈣組的料重比，但是對100%磷酸氫鈣組的料重比無明顯影響。閆俊浩等［10］研究表明，在肥育豬日糧中添加750 FTU·kg-1植酸酶，低磷組料重比顯著降低，而常磷組料重比則無明顯變化，這與本試驗(yàn)結(jié)果相似。說明在低無機(jī)磷日糧中，植酸酶更容易發(fā)揮作用。而在常磷日糧中添加植酸酶的作用不明顯，這可能是因?yàn)橹菜崦笇⒅菜岱肿又械牧姿獬鰜碓斐闪走^量，過量的磷會(huì)由于細(xì)胞膜轉(zhuǎn)運(yùn)載體的飽和被排出體外而沒有得到利用，這也可以解釋常磷日糧添加植酸酶后使單位增重飼料成本增加的問題，因?yàn)樘砑恿酥菜崦付菜崦赣譀]起到作用，無形中增加了成本［10］。

3.2 不同無機(jī)磷水平日糧添加植酸酶對保育豬血清生化指標(biāo)的影響

E.M.Onyango等［11］研究發(fā)現(xiàn)，添加植酸酶后不同磷水平日糧處理對肉雞血清鈣濃度沒有影響。何欣等［12］將有效磷從0.24%降低到0.15%再添加植酸酶，豬的血清磷濃度顯著降低，血清ALP活性顯著升高。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在保育豬日糧中添加植酸酶的情況下降低無機(jī)磷水平，各組間血清鈣濃度無顯著差異，而25%磷酸氫鈣加酶組和無磷酸氫鈣組的血清磷濃度和ALP活性均顯著低于對照組，這說明日糧磷水平無法滿足保育豬的生長需要。血清ALP活性受血清磷濃度影響，血清磷濃度降低時(shí)，ALP釋放量升高。這是因?yàn)閯?dòng)物缺磷導(dǎo)致骨鹽動(dòng)員加速，破骨細(xì)胞增殖，大量骨質(zhì)被破壞，繼而成骨細(xì)胞活性升高，從而血清ALP活性升高［13］。

A.B.Carlos等［14］的研究表明，在蛋雞日糧中添加植酸酶不影響血清鈣濃度。項(xiàng)濤等［15］報(bào)道，在試驗(yàn)中添加植酸酶后，對血清ALP活性無顯著影響。L.G.Young等［16］在斷奶仔豬日糧中添加植酸酶，提高了血清磷的濃度。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在常磷日糧中添加植酸酶，保育豬的血清磷濃度顯著升高，說明在日糧中添加植酸酶能提高保育豬對飼料中磷的利用率。但是，在無機(jī)磷水平相同的日糧中添加植酸酶對保育豬的血清鈣濃度及ALP活性沒有明顯影響。血清中的鈣磷含量有互相調(diào)節(jié)的作用，能保持在一定的水平，血清中鈣濃度的下降會(huì)引起甲狀旁腺素的分泌及VD3合成增加，從而提高血清鈣濃度，而且，低血清鈣能引起骨鈣迅速動(dòng)員［17］。

3.3 不同無機(jī)磷水平日糧添加植酸酶對保育豬養(yǎng)分表觀消化率的影響

本試驗(yàn)結(jié)果表明，在低磷日糧中添加植酸酶能顯著提高鈣和磷的表觀消化率，這與前人的研究結(jié)論一致［18-19］。S.L.Johnston等［20］的試驗(yàn)結(jié)果表明，在日糧中添加植酸酶替代部分無機(jī)磷，豬的鈣、磷、粗蛋白質(zhì)等養(yǎng)分的回腸表觀消化率提高。劉自逵等［21］報(bào)道，用植酸酶替代0.5%的磷酸氫鈣顯著提高了生長豬的粗蛋白質(zhì)及干物質(zhì)的消化率。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，日糧中添加植酸酶后，顯著提高了無磷酸氫鈣組的鈣、磷表觀消化率，而且隨日糧無機(jī)磷水平的下降，保育豬的鈣、磷、粗蛋白及干物質(zhì)表觀消化率均呈現(xiàn)上升趨勢，這進(jìn)一步說明了在低無機(jī)磷日糧中添加植酸酶能顯著提高保育豬對飼料中營養(yǎng)物質(zhì)的利用效率。外源添加的植酸酶能水解其中的植酸，釋放出磷，被豬消化吸收。同時(shí)，植酸酶在分解植酸釋放磷的過程中，也將飼料中被植酸螯和的其他礦物質(zhì)及蛋白質(zhì)、氨基酸釋放出來，或者使蛋白酶被釋放，從而提高動(dòng)物對飼料中的鈣和蛋白質(zhì)的利用率［22］。植物性飼料中多數(shù)的磷是以難以被單胃動(dòng)物吸收利用的植酸磷的形式存在［1，23］。因此，豬對日糧原料磷的消化率低于對磷酸氫鈣的消化率。但是在本試驗(yàn)中，不添加磷酸氫鈣和植酸酶處理組的磷表觀消化率顯著高于100%磷酸氫鈣組，其原因可能是由于無磷酸氫鈣不加酶組日糧中的磷含量過低，采用指示劑法測定時(shí)產(chǎn)生了誤差，這個(gè)問題有待于進(jìn)一步深入研究。

4 結(jié) 論

在本試驗(yàn)條件下可以得出以下結(jié)論：（1）在日糧中添加植酸酶的情況下，75%和50%磷酸氫鈣組保育豬的生長性能與100%磷酸氫鈣組無明顯差異；隨日糧無機(jī)磷水平降低，保育豬的鈣、磷、粗蛋白及干物質(zhì)的表觀消化率顯著升高，低磷日糧中植酸酶的作用更為明顯。（2）綜合各項(xiàng)指標(biāo)，在保育豬日糧中添加750 FTU·kg-1的植酸酶可以降低磷酸氫鈣添加量的25%～50%。

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