王林麗，楊巧虹，李卓恒，盧來(lái)春，呂金勝

（1.中國(guó)人民解放軍第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院藥學(xué)部，重慶 400042； 2.重慶醫(yī)療器械質(zhì)量檢驗(yàn)中心，重慶 401147）

乳寧口服液治療乳腺增生大鼠的藥效學(xué)研究

王林麗1，楊巧虹2，李卓恒1，盧來(lái)春1，呂金勝1

（1.中國(guó)人民解放軍第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院藥學(xué)部，重慶 400042； 2.重慶醫(yī)療器械質(zhì)量檢驗(yàn)中心，重慶 401147）

目的 研究乳寧口服液對(duì)大鼠乳腺增生的治療作用。方法 建立乳腺增生大鼠模型，灌胃給藥乳寧口服液，觀察低、中、高劑量[0.5，2.5，5.0 mL/(kg·d)]組大鼠的行為學(xué)改變、乳房情況，以及血液中激素水平的變化。結(jié)果 低、中、高劑量乳寧口服液均能顯著改善乳腺增生大鼠模型行為學(xué)異常、乳房情況，以及血液中雌二醇（E2)、孕酮（P)、催乳素（PRL)水平（P＜0.01），且呈一定的量效關(guān)系。結(jié)論 乳寧口服液對(duì)乳腺增生有一定治療作用。

乳寧口服液；乳腺增生；大鼠模型；性激素

乳寧口服液為治療乳腺增生癥的醫(yī)院復(fù)方制劑，主要由香附、川芎、夏枯草、王不留行、麥芽、白芍、當(dāng)歸、丹參 、延胡索、橘核、柴胡、瓜蔞、甘草等藥材組方[1]。本研究中考察了乳寧口服液對(duì)乳腺增生模型大鼠的治療作用，旨在為臨床用藥提供進(jìn)一步的藥理學(xué)試驗(yàn)依據(jù)。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 儀器、試藥與動(dòng)物

DU650型紫外分光光度計(jì)。乳寧口服液(第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院自制，批號(hào)為101206)。SD大鼠，體重（200±20）g，由第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供；動(dòng)物受試環(huán)境為第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，實(shí)驗(yàn)設(shè)施使用合格證號(hào)為 SYXK-(軍)2010-032，動(dòng)物質(zhì)量合格證號(hào)為SCXK-(軍)2010-008；飼料、飲水和墊料均符合實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。

1.2 方法

乳腺增生大鼠模型的建立[2-4]：取健康雌性未孕SD大鼠，后腿肌肉交替注射苯甲酸雌二醇 0.5 mg/kg，每日1次，連續(xù)25 d后改用黃體酮4 mg/kg肌肉注射，每日1次，連續(xù)5 d，建立乳腺增生病模型，造模期間每天觀察各組大鼠乳頭變化情況。造模第30天肉眼觀察可見(jiàn)模型組大鼠乳頭較空白組大鼠明顯增大，同時(shí)隨機(jī)處死模型組大鼠10只，取第2對(duì)乳頭制作病理切片。結(jié)果高倍鏡下可見(jiàn)腺泡和導(dǎo)管上皮明顯增生，乳腺腺泡直徑增大，乳腺腺泡數(shù)量增加，乳腺小葉平均直徑增大，乳腺小葉數(shù)增加，證明造模成功。于造模第21天開(kāi)始給予相應(yīng)藥物。

分組與給藥：取造模成功雌性大鼠60只，隨機(jī)分為5組，每組12只，即乳寧口服液高、中、低劑量組（R1，R2，R3組），給藥劑量分別為0.5，2.5，5.0 mL/（kg·d），相當(dāng)于臨床日用量的1，5，10倍；三苯氧胺陽(yáng)性對(duì)照組（S組），給藥劑量為2.5 mL/(kg·d)；模型對(duì)照組（M組）。另取健康雌性未孕大鼠12只，作為空白對(duì)照組（K組）。各給藥組采取等容不等濃度法灌胃給藥，M組和K組給予等量生理鹽水，每日給藥1次，連續(xù)給藥30 d后處死動(dòng)物。

取材處理[5-7]：造模結(jié)束后，大鼠禁食24 h，稱(chēng)重、脫毛，用游標(biāo)卡尺測(cè)量大鼠左側(cè)腋窩下第2對(duì)乳頭的直徑，隨后摘取眼球并取血5～6 mL，放置15 min后，用低溫離心機(jī)離心15 min，分離出血清，置冰箱內(nèi)保存，用放射免疫法測(cè)定生殖激素3項(xiàng)。再用脫頸椎法處死所有大鼠，用打孔器取下左側(cè)第二對(duì)完整乳房，直徑約8 mm，測(cè)量乳頭的直徑、高度。

2 結(jié)果

2.1 對(duì)大鼠行為學(xué)的影響

K組大鼠皮毛光澤，形態(tài)活潑，反應(yīng)敏捷，食量、糞便均正常，體重增長(zhǎng)正常，無(wú)死亡。M組大鼠豎毛，皮毛欠光澤，精神不振或煩躁不安、易激惹，反應(yīng)遲鈍，食量減少或亢進(jìn)，糞便時(shí)稀軟，身體嚴(yán)重消瘦或體重增長(zhǎng)迅速，進(jìn)食、排便、活動(dòng)減少或增加，死亡2只。乳寧口服液給藥組（R1，R2，R3組）及陽(yáng)性對(duì)照組（S組）大鼠皮毛尚可，大鼠體形均接近K組，飲食較正常，糞便正常，無(wú)動(dòng)物死亡。

2.2 對(duì)大鼠乳房情況的影響

結(jié)果見(jiàn)表1。造模后，M組大鼠的乳頭高度及直徑明顯增大，各用藥組大鼠的乳頭高度同M組相比有不同程度的變化，乳寧口服液給藥組（R1，R2，R3組）乳頭高度明顯降低(P＜0.01)，乳頭直徑均縮小(P＜0.01)，3個(gè)劑量組呈一定的量效關(guān)系。

表1 乳寧口服液對(duì)乳腺增生大鼠乳頭高度及直徑的影響（±s，mm，n=12）

表1 乳寧口服液對(duì)乳腺增生大鼠乳頭高度及直徑的影響（±s，mm，n=12）

注:與M組比較， P＜0.01。下表同。

組別K組M組R1組R2組R3組S組劑量[mL/(kg·d)] 0.25 5.0 2.5 0.5 2.5乳頭高度0.79±0.03 1.24±0.02 0.86±0.03 0.99±0.05 1.12±0.04 0.95±0.03乳頭直徑1.17±0.05 1.91±0.08 1.45±0.04 1.52±0.09 1.59±0.05 1.50±0.03

2.3 對(duì)大鼠血清性激素水平的影響

結(jié)果見(jiàn)表2。造模后大鼠血清雌二醇（E2）、催乳素（PRL）含量顯著高于K組，孕酮（P）則顯著低于K組，高、中、低劑量乳寧口服液均能顯著降低大鼠的E2及PRL水平，升高孕激素水平(P＜0.01)，并呈一定的量效關(guān)系。

表2 乳寧口服液對(duì)大鼠血清性激素水平的影響±s，n=12）

表2 乳寧口服液對(duì)大鼠血清性激素水平的影響±s，n=12）

組別K組M組R1組R2組R3組S組劑量[mL/(kg·d)] 0.25 5.0 2.5 0.5 2.5 E2（pg/mL）67.80±2.55 106.01±2.90 78.34±2.13 88.68±1.99 96.07±1.16 77.01±1.72 P（ng/mL）38.32±1.07 26.06±0.85 35.75±1.14 31.06±0.77 29.22±1.17 34.35±1.41 PRL（ng/mL）12.59±0.96 21.26±0.86 14.75±0.84 17.66±0.69 19.40±0.59 15.55±0.73

3 討論

乳腺增生癥是女性常見(jiàn)的乳房疾病，2%～4%的患者可發(fā)生囊性增生而引起癌變[7-8]，臨床多用雄性激素或雌激素拮抗劑治療，療效雖好，但不良反應(yīng)較大。對(duì)于乳腺增生癥，中醫(yī)藥以疏肝解郁、活血通絡(luò)、補(bǔ)腎壯陽(yáng)、消炎散結(jié)為治療原則[9]。

乳寧口服液處方為醫(yī)院臨床長(zhǎng)期使用的治療乳腺增生的中醫(yī)驗(yàn)方。本研究中通過(guò)建立乳腺增生大鼠模型，觀察乳寧口服液對(duì)模型大鼠的行為學(xué)狀況、乳房情況（包括乳頭的高度和直徑），以及血清E2，P，PRL水平的影響。研究結(jié)果顯示，低、中、高劑量乳寧口服液均能顯著改善模型大鼠的行為學(xué)異常、乳房情況以及血清E2，P，PRL水平的異常。這表明了乳寧口服液對(duì)乳腺增生模型大鼠具有顯著的治療作用，而是否還能改善其他乳腺增生相關(guān)指標(biāo)的異常，有待進(jìn)一步研究。

[1]陳彥清，康啟仁，崔金楠，等.乳寧口服液的制備及質(zhì)量控制[J].中華醫(yī)藥薈萃雜志，2003，2(4)：30-31.

[2]陳 奇.中藥藥理研究方法學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，1993：541-649.

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Pharmacodynamic Study of Runing Oral Liquid in Treating Hyperplasia of Mammary Glands in Rats

Wang Linli1,Yang Qiaohong2,Li Zhuoheng1,Lu Laichun1,Lyu Jinsheng1
(1.Department of Pharmacy,Daping Hospital,Third Military Medical University,Chongqing,China 400042; 2.Chongqing Quality Testing and Inspection Center for Medical Devices,Chongqing,China 401147)

Objective To study the effect of Runing Oral Liquid in treating hyperplasia of mammary glands in rats.M ethods The rat model of hyperplasia of mammary glands s was established.The behavioral changes,mammary tissue and levels of serum hormones in rats were observed after administration of Runing Oral Liquid[0.5,2.5,5.0 mL/(kg·d)]by gavage.Results The low-,medium-, high-dose of Runing Oral Liquid could remarkably improve the behavioral abnormality,breast status and levels of serum estradiol(E2), progesterone(P)and prolactin(PRL)in rats with hyperplasia of mammary glands(P＜0.01).Conclusion Runing Oral Liquid has certain therapeutic effect on hyperplasia of mammary glands.

Runing Oral Liquid；hyperplasia of mammary glands;rat model;sex hormone

王林麗，女，大學(xué)本科，副主任藥師，研究方向?yàn)橹兴幹苿┑难芯颗c開(kāi)發(fā)，（電子信箱）wll20126＠163.com；楊巧虹，女，大學(xué)本科，主要從事醫(yī)療器械質(zhì)量檢驗(yàn)工作，本文通訊作者，（電子信箱）87831702＠q.com。

2014-05-14；

2014-09-10)

R285.5；R286

A

1006-4931(2015)13-0016-02