邵迎春，楊 慧，錢 琤，王 貝，丁慶莉，韓 娟，劉亭亭，劉 芳，任傳路

（解放軍第一○○醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇蘇州 215007）

肝素和乙二胺四乙酸二鉀對(duì)TSGF檢測(cè)的影響

邵迎春，楊 慧，錢 琤，王 貝，丁慶莉，韓 娟，劉亭亭，劉 芳，任傳路△

（解放軍第一○○醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇蘇州 215007）

目的探討抗凝劑肝素、乙二胺四乙酸二鉀（EDTA－K2）對(duì)檢測(cè)血標(biāo)本惡性腫瘤特異性生長(zhǎng)因子（TSGF）的影響。方法選取2014年1～6月惡性腫瘤患者50例（惡性腫瘤組）和體檢健康者50例（健康對(duì)照組），均采用肝素、EDTA－K2、分離膠采集3份外周血，離心分離后用全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果與健康對(duì)照組比較，惡性腫瘤患者TSGF水平升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。在惡性腫瘤組與健康對(duì)照組，與分離膠采血相比，肝素抗凝血TSGF水平均偏低（P＜0.05），EDTA－K2抗凝血TSGF水平均偏高（P＜0.05）。結(jié)論檢測(cè)TSGF時(shí)盡量選用分離膠管采集血液標(biāo)本。

惡性腫瘤特異度生長(zhǎng)因子； 肝素； 乙二胺四乙酸二鉀； 分離膠

腫瘤特異度生長(zhǎng)因子（TSGF）是惡性腫瘤及周邊毛細(xì)血管大量擴(kuò)增產(chǎn)生的一類多肽物質(zhì)，在進(jìn)行腫瘤篩查的體檢人群中應(yīng)用廣泛［1］。研究表明，TSGF與其他腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)，可大大提高早期腫瘤檢出率［2］。本文采用速率法對(duì)用抗凝劑肝素、乙二胺四乙酸二鉀（EDTA－K2）及分離膠采集的血液進(jìn)行TSGF檢測(cè)，以明確使用抗凝劑是否對(duì)TSGF檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2014年1～6月解放軍一零零醫(yī)院診斷明確且暫未治療的初診腫瘤患者50例設(shè)為惡性腫瘤組，男32例，女18例；平均年齡（65.6±5.7）歲；其中血液系統(tǒng)腫瘤8例，消化系統(tǒng)腫瘤10例，呼吸系統(tǒng)腫瘤9例，婦科腫瘤7例，動(dòng)脈及生殖系統(tǒng)腫瘤12例，其他腫瘤4例。另選取同期體檢健康者50例設(shè)為健康對(duì)照組，男29例，女21例，平均年齡（63.5±4.9）歲。排除檢驗(yàn)室檢查中有異常指標(biāo)，影像學(xué)檢查異常者。

1.2 儀器與試劑 BS－800全自動(dòng)生化分析儀（邁瑞公司）。試劑均購自福建新大陸生物技術(shù)股份有限公司，主要成分:R1［磷酸二氫鈉、乙二胺四乙酸二鈉（EDTA－Na2）、凱松、4－羥乙基哌嗪乙磺酸（HEPPS）］；R2（顯色劑、凱松、枸櫞酸鈉、甘油）。

1.3 方法 所有研究對(duì)象均分別抽取3份血液，分別采用肝素抗凝、EDTA－K2抗凝及分離膠，離心后采用生化儀速率法檢測(cè)TSGF水平，具體方法參照文獻(xiàn)［3］。以上均排除明顯黃疸、脂血及溶血標(biāo)本。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析；計(jì)量資料以表示，組間比較采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)或配對(duì)t檢驗(yàn)；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 兩組TSGF表達(dá)水平比較 惡性腫瘤組患者肝素抗凝、EDTA－K2抗凝及分離膠采血的TSGF表達(dá)水平均高于健康對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），提示惡性腫瘤患者TSGF表達(dá)水平升高。見表1。

2.2 不同采血方法TSGF檢測(cè)結(jié)果比較 在惡性腫瘤組與健康對(duì)照組，肝素抗凝血TSGF水平均低于分離膠采血，EDTAK2抗凝血TSGF水平均高于分離膠采血，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表1 不同采血方法兩組TSGF表達(dá)水平比較（，U/mL）

＊:P＜0.05，與健康對(duì)照組比較。

組別肝素EDTA－K2分離膠惡性腫瘤組77.52±13.58＊85.86±11.15＊82.3±10.38＊健康對(duì)照組40.27±5.23 47.28±4.98 45.21±4.41

表2 不同采血方法TSGF檢測(cè)結(jié)果比較（，U/m L）

＊:P＜0.05，與惡性腫瘤組分離膠比較；#:P＜0.05，與健康對(duì)照組分離膠比較。

組別肝素EDTA－K2分離膠惡性腫瘤組－3.73±2.96＊＋3.01±2.14＊0.00±0.00健康對(duì)照組－3.94±3.07#＋3.11±2.37#0.00±0.00

3 討 論

惡性腫瘤已經(jīng)成為繼心、腦血管疾病以外，嚴(yán)重威脅人類健康的疾病之一，其治療的關(guān)鍵是早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷和早期治療，以降低其病死率［4］。TSGF對(duì)腫瘤的檢測(cè)具有早期性和廣譜性，是與其他腫瘤標(biāo)志物不相關(guān)的獨(dú)立物質(zhì)，具有腫瘤特異度而不具備臟器特異度，可為惡性腫瘤的早期診斷提供科學(xué)依據(jù)［5］。本室前期研究發(fā)現(xiàn)不同抗凝劑對(duì)檢測(cè)結(jié)果確實(shí)存在較大影響［6］。因此本文研究了肝素和EDTA－K2對(duì)TSGF檢測(cè)的影響。

本研究結(jié)果顯示，與健康對(duì)照組比較，惡性腫瘤患者TSGF表達(dá)水平明顯升高（P＜0.05），與文獻(xiàn)報(bào)道相符，這說明TSGF對(duì)惡性腫瘤具有較好的鑒別診斷價(jià)值。該試劑檢測(cè)TSGF的原理是EDTA－Na2與TSGF進(jìn)行疊加偶聯(lián)反應(yīng)，反應(yīng)剩余的EDTA－Na2與顯色劑反應(yīng)，在570 nm測(cè)得吸光度值，通過公式換算得出TSGF水平。肝素抗凝血與分離膠采血比較，TSGF表達(dá)水平明顯降低（P＜0.05），這可能是肝素只是增強(qiáng)了抗凝血酶Ⅲ與凝血酶的親和力，加速凝血酶的失活，并未消耗血中的鈣離子。因此血中鈣離子與檢測(cè)試劑中的EDTANa2反應(yīng)產(chǎn)生螯合物從而降低了檢測(cè)試劑中EDTA－Na2的濃度，導(dǎo)致TSGF的檢測(cè)結(jié)果偏低。EDTA－K2抗凝血與分離膠采血比較，TSGF表達(dá)水平明顯升高（P＜0.005），這可能是EDTA－K2與檢測(cè)試劑中的EDTA－Na2化學(xué)性質(zhì)相似，可以參與反應(yīng)，相當(dāng)于間接增加了檢測(cè)試劑中EDTA－Na2的濃度，導(dǎo)致TSGF表達(dá)明顯升高。因此檢測(cè)TSGF時(shí)應(yīng)盡量用分離膠管采集。另外，本室前期研究發(fā)現(xiàn)，采用全自動(dòng)生化儀速率法檢測(cè)TSGF時(shí)，標(biāo)本應(yīng)盡量在分離血清后4 h內(nèi)完成檢測(cè)，或置于－20℃冰箱冷凍保存，否則可能會(huì)導(dǎo)致TSGF檢測(cè)水平下降，偏離真實(shí)結(jié)果［3］。

綜上所述，由于TSGF對(duì)臨床有很大的應(yīng)用價(jià)值，因此在檢測(cè)TSGF時(shí)應(yīng)盡量排除其他干擾因素的影響。研究發(fā)現(xiàn)肝素和EDTA－K2對(duì)TSGF的檢測(cè)具有干擾，所以在TSGF檢測(cè)時(shí)應(yīng)盡量選用分離膠管采血。

［1］王海楓，梁茱.惡性腫瘤特性生長(zhǎng)因子（TSGF）的檢測(cè)在腫瘤診斷中的應(yīng)用［J］.福建醫(yī)藥雜志，2000，22（1）:90－91.

［2］劉陶文.腫瘤相關(guān)物質(zhì)群（TSGF）聯(lián)合檢測(cè)法的應(yīng)用研究進(jìn)展［J］.腫瘤防治研究，2003，30（1）:78－79.

［3］文靜，任傳路，丁慶莉.檢測(cè)時(shí)間對(duì)速率法檢測(cè)惡性腫瘤特異度生長(zhǎng)因子結(jié)果的影響［J］.國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2013，34（22）:3001－3002.

［4］王志賢，馬玲.血清TSGF測(cè)定及其臨床應(yīng)用價(jià)值［J］.實(shí)用浙江臨床醫(yī)學(xué)，2010，12（1）:27－28.

［5］楊菁，王東.惡性腫瘤相關(guān)物質(zhì)群在大腸癌輔助診斷中的臨床價(jià)值［J］.南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，27（10）:1577－1579.

［6］丁慶莉，韓娟，王海剛，等.3種抗凝血?jiǎng)?duì)化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)乙肝標(biāo)志物結(jié)果的影響［J］.現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2013，40（2）:336－337.

10.3969/j.issn.1673－4130.2015.10.057

A

1673－4130（2015）10－1446－02

2015－02－22）

△通訊作者，E－mail:clu_ren＠126.com。