王惠芬　毛熙光(翠屏區(qū)婦幼保健院　四川　宜賓　644000;瀘州醫(yī)學院四川瀘州646000)

VEGF－C在婦科腫瘤的研究進展

王惠芬1毛熙光2
(1翠屏區(qū)婦幼保健院四川宜賓644000;2瀘州醫(yī)學院四川瀘州646000)

腫瘤的轉(zhuǎn)移是影響預后的重要因素，其中血管及淋巴管形成與腫瘤的轉(zhuǎn)移密切相關。因此，如何尋找有效的方法調(diào)控惡性腫瘤血管及淋巴管的生成是治療腫瘤的關鍵環(huán)節(jié)。血管內(nèi)皮生長因子－C( VEGF－C)是一種特異性淋巴管生長因子，目前的國內(nèi)外的研究表明VEGF－C在惡性腫瘤的淋巴結轉(zhuǎn)移方面具有重要作用。本文將對VEGF－C在婦科腫瘤方面的研究情況作一綜述。

一、VEGF－C的結構與分布

血管內(nèi)皮生長因子( VEGF)是一種具有高度生物活性的糖蛋白，具有很強的促進血管內(nèi)皮細胞( Vascular endothelial cells)增殖以及增強毛細血管通透性的能力。VEGF是公認的主要的誘導血管生成的物質(zhì)，它能強烈地促使血管內(nèi)皮有絲分裂和新生血管形成，是腫瘤血管生成的有效刺激因子，與腫瘤的生長發(fā)展具有密切的關系。VEGF－C是VEGF家族的成員之一，其家族成員還有包括VEGF－A、B、D、F和胎盤生長因子( Placental growth factor，PlGF)［1－2］。其中，VEGF－C是目前研究最多的因子之一。Joukou等［3］1996年從人類的前列腺癌細胞株中分離出了VEGF－C。目前諸多研究表明VEGF－C在多種人類腫瘤組織中高表達，并且發(fā)現(xiàn)它與腫瘤細胞的增殖和轉(zhuǎn)移有顯著的相關性。VEGF－C基因染色體位于4q34，包含7個外顯子，其分子量約為46．9kD［4－5］。VEGF －C在細胞內(nèi)以蛋白前體形式合成，經(jīng)酶解后形成成熟的VEFG－C。VEGF－C前體蛋白經(jīng)酶解后形成兩條多肽，一條為31kD的N末端多肽，另一條是29kD的C末端多肽。21kD的VEGF－C是31kD的N末端多肽進一步水解的產(chǎn)物。這種酶解反應發(fā)生在細胞外或細胞表面。VEGF－C 有VEGFR－3和VEGFR－2兩種受體。21kD的VEGF－C能顯著提高VEGF－C與VEGFR－2、VEGFR－3的特異性結合［6－8］。在人體的某些正常組織中(如:心臟、小腸、卵巢、甲狀腺和胎盤等)也發(fā)現(xiàn)VEGF－C的表達［9］。

二、VEGF－C的功能

VEGF－C是一種分泌型糖蛋白，它在調(diào)節(jié)淋巴管生成( Lymphangiogensis)和血管通透性以及許多病理生理過程中起著一定的作用，前者由VEGFR－3介導、后者由VEGFR－2介導。VEGFR－3受體主要表達于正常的淋巴管內(nèi)皮、新生的血管內(nèi)皮及人類的各種腫瘤組織中［10］，而VEGFR－2主要表達在血管和淋巴管內(nèi)皮細胞上。VEGFR－3是一種單鏈跨膜蛋白，包括胞外區(qū)、跨膜區(qū)及胞內(nèi)酪氨酸蛋白激酶區(qū)三個區(qū)。VEGFR－3胞外區(qū)水解后形成能與VEGF－C特異性結合的VEGFR－3?？缒^(qū)主要大量的疏水性氨基酸組成，其主要作用是是轉(zhuǎn)導受體與配體結合的信號。胞內(nèi)酪氨酸蛋白激酶區(qū)有多個磷酸化位點，激活后可發(fā)生一系列生物化學反應［11－12］。VEGF－C與其特異性受體VEGFR－3結合，使后者發(fā)生磷酸化激活，進而激活多條細胞內(nèi)信號通路，導致淋巴管內(nèi)皮細胞發(fā)生增殖、分化、遷移等一系列重要反應。目前研究證實，Akt激酶及p44/ p42 MAPK激酶在VEGF－C與其受體VEGFR－3結合所誘導的淋巴管內(nèi)皮細胞增殖、遷移的過程中發(fā)揮重要作用［13］。Akt激酶是介導細胞存活、促進細胞增殖的重要信號激酶。Akt與底物作用具有抗細胞凋亡、加速細胞周期及增強DNA修復等功能［14］。MAPK信號途徑是細胞增殖的主要信號通路，也是生長因子依賴的細胞存活的另一種機制。VEGF－C 與VEGFR－3結合可導致p44/p42MAPK磷酸化激活，從而導致生長相關基因的轉(zhuǎn)錄、翻譯、修飾及細胞凋亡因子的失活。VEGF－C與另一受體VEGFR－2結合，通過PI3K途徑，激活抗調(diào)亡蛋白，同時上調(diào)凋亡蛋白的表達，導致腫瘤細胞的凋亡受到抑制，從而加速腫瘤細胞的增殖［15］。另外VEGF－C與VEGFR－2結合可增加血管內(nèi)皮細胞的間隙，同時刺激血管內(nèi)皮細胞增殖和遷移，從而使血管的通透性增加［16］。

三、VEGF－C與腫瘤

VEGF－C是一種重要的促進腫瘤淋巴管生成的因子，大量的研究發(fā)現(xiàn)在人類多種惡性腫瘤組織中均可檢測到VEGF－C的高表達，比如:頭頸鱗癌、鼻咽癌、甲狀腺癌、乳腺癌、結腸癌、胃癌、前列腺癌、非小細胞肺癌、食管鱗癌等，并且認為VEGF－C與腫瘤的淋巴結轉(zhuǎn)移有關。Jeltsch等［17］的實驗表明，不僅發(fā)現(xiàn)VEGF－C在轉(zhuǎn)基因小鼠中過表達，而且還發(fā)現(xiàn)VEGF－C能刺激淋巴管內(nèi)皮細胞增殖和淋巴管增生。Hideyuki等［18］對106例已行食管癌根治術的食管鱗癌患者的研究表明，腫瘤分期在ⅡB－ⅣA的患者其VEGF－C表達水平明顯高于分期在0－ⅡA的患者，VEGF－C高表達患者其淋巴結轉(zhuǎn)移發(fā)生率明顯高于低表達者，且生存期較低表達者明顯縮短。Onogawa等［19］關于VEGF－C與結腸癌的研究，表明VEGF－C高表達可以促進結腸癌的生長及淋巴結轉(zhuǎn)移，并且術后總生存期顯著縮短。陳睿等［20］對鼻咽癌患者的研究顯示: VEGF－C在鼻咽癌患者中的陽性表達率與鼻咽癌淋巴管的生成、轉(zhuǎn)移以及放療的療效均有明顯相關性，有可能作為判斷鼻咽癌患者放療療效及預后的一個指標。然而VEGF－C在肺癌患者的表達水平尚存在爭議。Ogawa等［21］等對206例非小細胞性肺癌患者組織中的VEGF－C水平的研究發(fā)現(xiàn)，有60．7%的患者存在VEGF－C高表達，并且VEGF－C高表達患者的淋巴結轉(zhuǎn)移率明顯高于低表達者，其5年生存率卻明顯低于低表達者，因此認為VEGF－C可能是判斷非小細胞肺癌患者預后的一個重要因素。而Maekawa S等［22］關于VEGF－C表達與肺腺癌患者淋巴結轉(zhuǎn)移相互關系的研究顯示: VEGF－C的陽性表達率與患者的淋巴結轉(zhuǎn)移和5年生存率不存在相關性。目前國內(nèi)外大量的研究發(fā)現(xiàn)VEGF－C與多種惡性腫瘤的淋巴結轉(zhuǎn)移有關，但是其能否作為評價腫瘤生長、轉(zhuǎn)移和預后的生物標志物還需要進一步的研究。

四、VEGF－C與婦科腫瘤

4．1 VEGF－C與宮頸癌

目前的研究［23］發(fā)現(xiàn)VEGF－C在正常宮頸組織中不表達，而在宮頸癌組織中高表達，兩者有明顯的統(tǒng)計學差異。臨床分期越高，陽性率越高，腫瘤分化程度越低，陽性率越高，有淋巴結轉(zhuǎn)移者陽性率高于無淋巴結轉(zhuǎn)移者;而在宮頸癌不同組織類型中的表達差異無統(tǒng)計學意義。李梅［24］、TrappenPO［25］等利用免疫組化法研究顯示，在正常宮頸組織中VEGF－C呈陰性表達，在CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ三組之間的陽性表達率有明顯統(tǒng)計學差異，但是CINⅢ和宮頸鱗癌之間卻無顯著差異。

目前的許多應用免疫組化方法的研究都認為VEGF－C的高表達與淋巴結轉(zhuǎn)移存在顯著的相關性［23，26，27］。Hashimoto［28］等利用MRI檢測發(fā)現(xiàn)宮頸癌組織中VEGF－C的高表達及有深部間質(zhì)浸潤者，盆腔淋巴結轉(zhuǎn)移率明顯升高。但是Ohta Y等［29］的體外細胞實驗發(fā)現(xiàn)VEGF－C的表達與毛細淋巴管密度密切相關，而與淋巴結轉(zhuǎn)移無關。Mit suhashi A等［30］通過檢測宮頸癌患者手術前兩周和手術后兩周的血液中VEGF－C水平，發(fā)現(xiàn)手術前患者血液中VEGF－C水平與宮頸癌的FIGO臨床分期及腫瘤大小有關，而與淋巴結轉(zhuǎn)移并無明顯相關性。以上研究結果出現(xiàn)的差異，可能與樣本含量有關，可能與研究對象本身的差異有關，可能與研究方法等有關，因此還需要大樣本、多中心深入研究。

4．2VEGF－C與卵巢癌

目前相關研究表明VEGF－C在上皮性卵巢癌組織中呈高表達，并與淋巴結轉(zhuǎn)移密切相關。楊雪萍等［31］對116例卵巢上皮癌患者的研究表明，VEGF－C在良性、交界性及惡性卵巢腫瘤中陽性表達率逐漸升高;患者年齡、病理類型與VEGF－C的陽性表達率無明顯的相關性，患者的臨床分期、淋巴結轉(zhuǎn)移、腫瘤組織的分化程度等與VEGF－C的陽性表達率有明顯相關性。Yokoyama等［32］和Ni shida等［33］的研究也發(fā)現(xiàn)VEGFC高表達與卵巢癌淋巴結轉(zhuǎn)移密切相關。王玉珍等［34］的研究表明: VEGF－C、VEGF－D在良性卵巢腫瘤和卵巢交界惡性腫瘤組織中的表達明顯低于惡性上皮性卵巢腫瘤中的表達; VEGF－C和VEGF－D的表達水平與腫瘤周圍的淋巴管密度又明顯的相關性，可能是因為卵巢癌細胞通過自分泌或者旁分泌產(chǎn)生大量的VEGF－C和VEGF－D，二者與其受體VEGFR－3結合，促進腫瘤組織周圍的淋巴管的生成。張輝等［35］研究VEGF－C在晚期卵巢癌原發(fā)灶和轉(zhuǎn)移灶中的表達并進行比較，結果顯示VEGF－C在晚期卵巢癌組織中表達增高，原發(fā)灶與轉(zhuǎn)移灶之間無明顯差異。Huang KJ［36］等的研究顯示VEGF－C可能是卵巢癌判定預后的獨立指標之一，下調(diào)VEGF－C能使卵巢癌細胞的粘附、侵襲、轉(zhuǎn)移能力均下降，同時下調(diào)VEGF－C能使耐藥的卵巢癌細胞化療敏感性增加，抑制其增殖。

4．3VEGF－C與子宮內(nèi)膜癌

HuangYW［37］等通過在大白兔體內(nèi)建立子宮內(nèi)膜癌的模型的研究發(fā)現(xiàn):子宮內(nèi)膜癌組織中VEGF－C的陽性表達率明顯高于正常對照組，有淋巴結轉(zhuǎn)移組顯著高于無淋巴結轉(zhuǎn)移組。王芳等［38］的研究表明VEGF －C蛋白陽性染色位于腫瘤細胞的胞漿內(nèi)，正常的子宮內(nèi)膜及子宮內(nèi)膜增殖癥中VEGF－C表達較弱，然而在子宮內(nèi)膜癌中其陽性表達率達58．33%;淋巴結轉(zhuǎn)移組中VEGF－C的表達( 71．43%)明顯高于無淋巴結轉(zhuǎn)移組( 56．60%) ;臨床期別Ⅲ、IV期患者組VEGF－C的表達( 80%)明顯高于Ⅰ、Ⅱ期患者組( 54%) ; VEGF－C的表達水平與組織學分化程度無關。Hirai等［39］關于228例子宮內(nèi)膜癌的VEGF－C表達水平的研究發(fā)現(xiàn)子宮內(nèi)膜浸潤深度和淋巴結轉(zhuǎn)移與VEGF－C的表達具有明顯的正相關關系。Dobrzycka B1［40］等對98例子宮內(nèi)膜癌患者血清VEGF和VEGFC水平的檢測顯示血清VEGF和VEGF－C在Ⅰ型和Ⅱ型子宮內(nèi)膜癌中的濃度均高于健康對照組，VEGF－C與Ⅱ型子宮內(nèi)膜癌FIGO分期密切相關，VEGF－C是Ⅱ型子宮內(nèi)膜癌存活率的危險因素，因此Ⅱ型子宮內(nèi)膜癌術前VEGF－C高水平者應作盆腔及腹主動脈旁淋巴結清掃。以上研究表明，VEGF－C在子宮內(nèi)膜癌中的陽性表達率明顯升高，其陽性表達率可能與子宮內(nèi)膜癌的FIGO分期及淋巴結轉(zhuǎn)移存在相關性。在子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生、發(fā)展和淋巴結轉(zhuǎn)移過程中VEGF－C扮演著重要的角色，推測其可能是預測淋巴結轉(zhuǎn)移的重要指標。

五、VEGF－C與抗腫瘤治療展望

VEGF－C在多種腫瘤組織中高表達，但是具體的表達調(diào)控機制尚不明確。進一步研究VEGF－C的分子調(diào)節(jié)機制，可能為腫瘤的發(fā)生發(fā)展的深入研究提供一定的指導意義，為腫瘤的早期綜合治療提供理論依據(jù)，有可能對改善患者的預后有重要意義。

參考文獻

［1］Ferrara N，Gerber HP，LeCouter J．The biology of VEGF and its receptors［J］．Nat Med，2003，( 9) :669－676．

［2］Ferrara N，Henzel WJ．Pituitary follicular cells secrete a novel heparinbinding growth factor specific for vascular endothelial cells［J］．Biochem Biophys Res Commun，1989，161( 2) :85l－858．

［3］Joukou，Pajusola K，Kaipainen A，et a1．A novel vascular endothelial growth factor，VEGF－C is a ligand for the Flt一4( VEGFR一3) and KDR( VEGFR一2) receptor tyrosine kinases［J］．The EMBO Journal，1996，1 5( 2) :290－298．

［4］Grimmond S，Lagercrantz J，Drinkwater C，et al．Clooning and characterization of a novel human gene related to vasvular endothelial growth factor［J］．Genome Res，1996，( 6) :124－131．

［5］Maglione D，Guerriero V，Viglietto G，et al．Isolation of a human placenta cDNA coding for a protein related to the vascular permeability factor［J］．Proc Natl Acad Sci USA，1991，( 8820) :9267－9271．

［6］Uchida K，Chaudhary LR，Sugimura Y，et al．Proprotein convertases regulate activity of prostate epithelial cell differentiation markers and are modulated in human prostate cancer cells［J］．J Cell Biochem，2003，( 88) :394－399．

［7］McColl BK，Baldwin ME，Roufail S，et al．Plasmin activates the lymphangiogenic growth factors VEGF－C and VEGF－D．J Exp Med，2003，198( 6) :863－868．

［8］Geraldine Siegfried，Ajoy Basak．The secretory proprotein convertases furin，PC5，and PC7 activate VEGF－C to induce tumorigenesis［J］．J Clin Invest，2003，( 111) :1723－1732．

［9］Paav o nen K，Hrelli－Kuitunen N，Chilov D，et al．Novel human v ascular endo thelial g row th fa ctor s g enes VEGF－B a nd V EGF－C locali ze to chromosomes 11q13and 4q34，r espectively［J］．Circulation，1996，93 ( 6) :1079－1082．

［10］Partanen TA，Arola J，Saafisto A，el a1．VEGF－C and VEGF－D expression in neuroe ndocrine cells and their receptor，VEGFR一3。in fenestrated blood vessels in humnan tissues［J］．FASEB J，2000，14 ( 13) :2087－2096．

［11］Lohela M，Saaristo A，Veikkola T，et al．Lymphangiogenic growth factors，receptors and therapies［J］．Thromb Haemost，2003，90( 2) : 167 －184．

［12］Karkkainen MJ，and Petrova TV．Vascular endothelial growth factor receptors in the regulation of angiogenesis and lymphangiogenesis［J］．Oncogene，2000，( 19) :5598－5605．

［13］Makinen T，Veikkola T，Mustjoki S，et al．Isolated lymphatic endothelial cellstransduce growth，survival and migratory signals via the VEGF－C/ D receptor VEGFR－3［J］．EMBO J，2001，( 20) :4762－4773．

［14］Yamaguchi H，and Wang HG．The protein kinase PKB/Akt regulates cell survival and apoptosis by inhibiting Bax conformational change．Oncogene，2001，20( 53) :7779－7786．

［15］Dayanir v，Meyer RD，Lashkari K，et al Identification of tyrosine residues in vascular endothelial growth factor receptor－2/FLK一1 involved in activation of phosphatidylinsit01 3－kinase and cell proliferation［J］．BiolChem，2001，276( 21) :17686－17692．

［16］Makinen Z，Veikkola f，Mustjoki S，et al．Isolated lymphatic endothelialcells transducer growth，survival and migratory signal via the VEGF

C/Dreceptor VEGFR3－3［J］．EMBO J，2001，20( 17) :4762－4773．［17］Jeltsch M，Kaipainen A，Joukov V，et al．Hyperplasia of lymphatic vessels in VEGF－C transgenic mice［J］．Science，1997，276( 5317) : 1423－1425．

［18］Tanaka T，Ishiguro H，Kuwabara Y，et al．Vascular endothelial growth factor C ( VEGF－C) in esophageal cancer correlates with lymph node metastasis and poor patient prognosis［J］．Exp Clin Cancer Res，2010，( 29) :83．

［19］Onogawa S，Kitadai Y，Tanaka S，et al．Expression of VEGF－C and VEGF－D at the invasive edge correlates with lymph node metastasis and prognosis of patients with colorectal carcinoma［J］．Cancer Sci，2004，95( 1) : 32－39．

［20］陳睿，李剛，朱川，等．鼻咽癌患者血清VEGF－C水平與淋巴管形成及臨床療效相關性研究［J］．中國藥房，2011，22( 42) : 3955 －3997．

［21］Ogawa E，Takenaka K，Yanagihara K，et al．Clinical significance of VEGF－C status in tumour cells and stromal macrophages in non－small cell lung cancer patients［J］．Br J Cancer，2004，91( 3) :498－503．

［22］Maekawa S，Iwasaki A．Correlation between lymphnode metastasis and the expression of VEGF－C，VEGF－D and VEGFR－3in T1 lung adenocarcinoma［J］．Anticancer Res，2007，27( 6A) : 3735－3741．

［23］田小飛，彭芝蘭．VEGF－C在宮頸癌組織中的表達及其與臨床病理特征的關系［J］．陜西醫(yī)學雜志，2008，37( 11) : 1520－1523．

［24］李梅，毛福榮，曹學全，等．VEGF－C在宮頸鱗癌組織中的表達及臨床意義［J］．腫瘤基礎與臨床，2007，20( 2) : 127－128．

［25］Van Trappen PO，Steele D，Lowe DG，et al．E xpres sion of vascular endothelial growth factor ( VEGF)－C and VEGF－D，and their recept or VEGFR－3，during different stages of cervical carcino genesis［J］．J Pathol，2003，201( 4) : 544－554．

［26］鄒三鵬，張薛榜，麻東輝，等．VEGF－C在浸潤性宮頸癌中的表達及意義［J］．陜西醫(yī)學雜志，2004，33( 27) : 105．

［27］汪青，王文福．VEGF－C表達與子宮頸癌侵襲轉(zhuǎn)移的關系探討［J］．蚌埠醫(yī)學院學報，2004，29( 3) : 225－226．

［28］H ashim ot o I，Kodam a J，Seki N，et al．Vascul ar en doth elial growth factor－C expression and its relationship to pelvicl ymph node status in invas ive cervical cancer［J］．Br J Can cer，2001，85( 1) : 93－97．

［29］Oht a Y，Wat anabe Y，Murakami S，et al．Vascular en doth elialgrowth factor and lymph node metastasis in primary lung cancer．Br J Cancer，1999，76( 8) : 1041－1045．

［30］Mitsuhashi A，Suzuka K，Yamazawa K，et al．Serum vas cular endothelial grow th f actor ( VEGF) and VEGF－C levels as tumor markers in pat ient s with cervical carcin oma［J］．Cancer，2005，103( 4) : 724－730．

［31］楊雪萍．卵巢癌中VEGF－C與VEGFR－3的表達及對微淋巴管生成的影響［D］重慶:重慶醫(yī)科大學碩士學位論文，2007．

［32］Yokoy ama Y，Char no ck－jo nes DS，Licence D，et al．Vascular endothelial growth factor－C is an－independentprognostic factor in epithelial ovarian carcinoma．Br JCancer，2003，88( 2) :237－244．

［33］Nishida N，Yano H，Komai K，etal．Vascula rendothelial growth factor－C and Vascular endothelial growth factor receptor2 are related closely to the prognosis of patient with ovarian carcinoma［J］．Cancer，2004，10 ( 16) : 1364－1374．

［34］王玉珍，梁志清，龍玲，等．血管內(nèi)皮生長因子C、D在上皮性卵巢癌的表達及與腹股溝和腹膜后淋巴結轉(zhuǎn)移的關系［J］．第三軍醫(yī)大學學報，2004，26( 11) :977－980．

［35］張輝，左連富，王曉玲，等．VEGF－C在晚期卵巢癌原發(fā)灶和轉(zhuǎn)移灶中的表達比較［J］．免疫學雜志，2006，22( 4) :429－431．

［36］Huang KJ，Sui LH．The relevance and role of vascular endothelial growth factor C，matrix metalloproteinase－2 and E－cadherin in epithelial ovarian cancer［J］．Med Oncol，2012，29( 1) :318－323．

［37］Huang YW，Xu LQ，Luo RZ，et al．VEGF－c expression in an in vivo model of orthotopic endometrial cancer and retroperitoneal lymph node metastasis［J］．Reprod Biol Endocrinol，2013，( 11) :49．

［38］王芳，子宮內(nèi)膜癌中VEGF－C、ERa與MLVD的相關性研究［D］．河北:河北醫(yī)科大學碩士學位論文，2013．

［39］Hirai N，Nakagawara A，Oosaki T，et al．Expression of vascular endothelial growth factors( V EGF－A/VEGF－1 a nd V EGF－C /V EGFR－2 ) in postmenopausa luterine endometrial carcinoma［J］．Gy necolOncol，2001，80( 2) : 181－188．

［40］Dobrzycka B1，Terlikowski SJ，Kowalczuk O，Kulikowski M，Niklinski J．Serum levels of VEGF and VEGF－C in patients with endometrial cancer［J］．Eur Cytokine Netw，2011，22( 1) :45－51．

【中圖分類號】R－1

【文獻標識碼】B

【文章編號】1009－6019( 2015) 12－0288－02