頭孢拉定殘留溶媒分析方法學(xué)的確認(rèn)

2015-04-01 02:03:24董萍

機(jī)電信息 2015年5期

董萍

（上海新亞藥業(yè)有限公司新先鋒藥廠，上海201203）

0 引言

由于藥品具有特殊性，因此對(duì)其進(jìn)行檢驗(yàn)方法學(xué)的確認(rèn)是必須的，其可以確保樣品分析的準(zhǔn)確性、精密性，使廣大民眾可以放心安全地使用藥品。根據(jù)新版GMP第223條規(guī)定，符合下列情形之一的，應(yīng)當(dāng)對(duì)檢驗(yàn)方法進(jìn)行驗(yàn)證：（1）采用新的檢驗(yàn)方法；（2）檢驗(yàn)方法需變更的；（3）采用《中華人民共和國(guó)藥典》及其他法定標(biāo)準(zhǔn)未收載的檢驗(yàn)方法；（4）法規(guī)規(guī)定的其他需要驗(yàn)證的檢驗(yàn)方法。又根據(jù)《中華人民共和國(guó)藥典（2010版增補(bǔ)本）》中殘留溶媒測(cè)定項(xiàng)的要求，現(xiàn)對(duì)本公司生產(chǎn)的頭孢拉定殘留溶媒分析方法進(jìn)行確認(rèn)，以證明該分析方法在實(shí)驗(yàn)室條件下的適用性。

《中華人民共和國(guó)藥典（2010版增補(bǔ)本）》規(guī)定對(duì)殘留溶媒的測(cè)定可采用高效氣相色譜法。高效氣相色譜法（GC）以永久性氣體為流動(dòng)相（通常叫載氣），利用流動(dòng)相和固定相中的分配系數(shù)的差別，從而在兩相間反復(fù)多次分配，使原來(lái)分配系數(shù)差別很小的各組分分離開(kāi)來(lái)。氣相色譜法的分析對(duì)象多為分子質(zhì)量小于1 000、低沸點(diǎn)、易揮發(fā)、熱穩(wěn)定性好的化合物。

1 確認(rèn)實(shí)驗(yàn)所用儀器與試劑/試藥

1.1 實(shí)驗(yàn)所用的主要儀器

氣相色譜儀：7890A，Agilent；頂空進(jìn)樣器：7697A，Agilent；分析天平：FA1604S，上海天平儀器廠；色譜柱：HP-1（60m×0.53mm×5 μm），Agilent；色譜工作站：Rev.C.01.03，Agilent。

1.2 實(shí)驗(yàn)所用的試劑/試藥

丙酮（分析純）：500m L/瓶，宜興市達(dá)華化工有限公司；頭孢拉定（注射用）：原料藥，上海新亞藥業(yè)有限公司。

2 確認(rèn)的方法

2.1 色譜條件

檢測(cè)溫度：250℃；進(jìn)樣口溫度：200℃；分流比：10:1；空氣流速：400m L/min；氫氣流速：40m L/min；氮?dú)饬魉伲?5 psi（2.2 kPa）；柱溫：80℃；進(jìn)樣量：1.0 m L；頂空條件：頂空瓶10m L；平衡溫度：80℃；平衡時(shí)間30m in；定量環(huán)溫度：100℃；傳輸管溫度：110℃。

2.2 供試品儲(chǔ)備液配制

精密稱(chēng)取供試品1.0 g置于10m L容量瓶，加內(nèi)標(biāo)液至刻度，搖勻。

2.3 對(duì)照儲(chǔ)備液配制

精密稱(chēng)取丙酮0.3 g置于50m L容量瓶，加水至刻度，搖勻。

2.4 供試品溶液配置

吸取供試品儲(chǔ)備液3m L置于頂空瓶，密封瓶蓋，搖勻。

2.5 對(duì)照品溶液配置

吸取對(duì)照品儲(chǔ)備液10m L置于100m L容量瓶中，加水至刻度，再吸取3m L置于頂空瓶中，密封瓶蓋，搖勻。

2.6 殘留溶劑含量的計(jì)算

按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算殘留溶劑含量：

3 確認(rèn)內(nèi)容

3.1 確認(rèn)依據(jù)

《中華人民共和國(guó)藥典（2010版增補(bǔ)本）》中關(guān)于殘留溶媒測(cè)定項(xiàng)的要求。

3.2 專(zhuān)屬性試驗(yàn)

吸取對(duì)照品儲(chǔ)備液10m L置于100m L容量瓶中，加水至刻度，再吸取3m L置頂空瓶中，密封瓶蓋，搖勻。制備對(duì)照品儲(chǔ)備液5份，各進(jìn)樣1針，得到各物質(zhì)峰面積的平均值的RSD（相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差）、分離度及保留時(shí)間。表1為各溶劑的峰面積、RSD、塔板理論數(shù)，圖1～圖5分別為各專(zhuān)屬性色譜圖，并根據(jù)下列公式計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差：

式中S——樣本標(biāo)準(zhǔn)偏差；

x——計(jì)算結(jié)果的算術(shù)平均值。

式中 n——樣品總數(shù)；

i——物料中某成分的各次測(cè)量值。

根據(jù)表1數(shù)據(jù)，各溶劑峰的塔板理論數(shù)均大于5 000，符合驗(yàn)證要求。

3.3 定量限

以S/N=10計(jì)算定量限（其中，S為靈敏度，N為噪聲），依次稀釋對(duì)照品儲(chǔ)備液。表2為丙酮定量限。

3.4 回收率

3.4.1 樣品殘留溶劑原有含量

1 g樣品中殘留溶劑的原有含量如表3所示。

3.4.2 重復(fù)性試驗(yàn)

精密移取儲(chǔ)備液8m L置于100m L容量瓶，加水稀釋至刻度，作為溶液1；精密移取儲(chǔ)備液10m L置于100m L容量瓶，加水稀釋至刻度，作為溶液2；精密移取儲(chǔ)備液12m L置于100m L容量瓶，加水稀釋至刻度，作為溶液3。分別取3份樣品，每份1.0 g，分別置于10 m L容量瓶中，分別加入溶液1、溶液2、溶液3至刻度，作為樣品溶液1、樣品溶液2、樣品溶液3，每種樣品溶液吸取3m L置于頂空瓶，搖勻，各進(jìn)3針。