朝木日麗格等

【摘 要】 目的：研究庫(kù)葉懸鉤子正丁醇層的化學(xué)成分。方法：采用反相HPLC分離純化，通過(guò)核磁共振分析鑒定其化學(xué)結(jié)構(gòu)。結(jié)果：從庫(kù)頁(yè)懸鉤子正丁醇層分離得到槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸甲酯（I）、山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸甲酯（II）、槲皮素（III）、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸丁酯（IV）4個(gè)化合物。結(jié)論：以上化合物均首次從該種植物中分離得到。

【關(guān)鍵詞】 蒙藥材；懸鉤子木；正丁醇層；黃酮

【中圖分類(lèi)號(hào)】R284.1 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A 【文章編號(hào)】1007-8517（2015）04-0019-02

蒙藥材懸鉤子木為薔薇科懸鉤子屬植物庫(kù)葉懸鉤子（Rubus sachalinensis Leveille）的去皮去心干燥莖枝，具有促熟疫、清除騷熱、止咳、調(diào)元之功效[1]，是蒙醫(yī)基礎(chǔ)方四味土木香散組方藥材之一，但其化學(xué)成分和生物活性未見(jiàn)報(bào)導(dǎo)。為探索該植物的有效活性成分，對(duì)庫(kù)葉懸鉤子的乙醇提取物正丁醇萃取部位進(jìn)行化學(xué)成分分離研究，薄層結(jié)果顯示正丁醇部位含有黃酮類(lèi)化合物，通過(guò)進(jìn)一步的色譜分離，鑒定4個(gè)化合物，分別為：槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸甲酯（I）、山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸甲酯（II）、槲皮素（III）、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸丁酯（IV）。

1 儀器與材料

1.1 植物來(lái)源 蒙藥材懸鉤子木采自內(nèi)蒙古通遼市扎旗罕山自然保護(hù)區(qū)，由內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院包保全教授鑒定為薔薇科懸鉤子屬庫(kù)頁(yè)懸鉤子（R. Sachalinensis Leveille），除去外皮，切段，曬干。

1.2 儀器半制備 HPLC：Shim-pack PRC-ODS、制備柱250mm（20mm，15μm）、YMC-pack ODS A 250mm（10mm，5μm）、SHIMADZU RID-10A檢測(cè)器、LC-6AD泵、CTO-20A柱溫箱、C-R8A積分儀；高效液相色譜儀：Inertsil ODS-SP柱 250mm（4.6mm，5μm）、SHMADZU RID-20A檢測(cè)器、SIL-20A自動(dòng)進(jìn)樣器、LC-20AT泵、CTO-10AS柱溫箱、CBM-20A控制器）；核磁共振儀（BRUKER公司AVANCE-600）；EYELAN-1100旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海愛(ài)郎儀器有限公司）；電子天平（賽多利斯科學(xué)儀器有限公司）；HP-20大孔樹(shù)脂；Sephadex LH-20羥丙基葡聚糖凝膠。

2 提取分離

取庫(kù)葉懸鉤子干燥莖枝5.05kg粉碎，用95%乙醇回流提取1次，75%乙醇回流提取3次，每次2h；減壓回收乙醇溶劑，得浸膏924g，以上浸膏加水懸浮，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇等溶劑等比萃取，回收溶劑，得正丁醇提取物224g；取正丁醇提取物經(jīng)過(guò)HP-20柱，依次用水、40%乙醇、55%乙醇、70%乙醇、85%乙醇、95%乙醇洗脫，得到6個(gè)洗脫部分；回收洗脫乙醇溶劑，得浸膏分別為90.6g、121.7g、48.2g、4.3g、3.2g、3.6g；40%乙醇浸膏、55%乙醇浸膏分別取2g，加甲醇溶解，經(jīng)LH-20柱甲醇洗脫，每5ml為一個(gè)流分，點(diǎn)薄層硅膠板，顯色，合并相同斑點(diǎn)，回收甲醇，經(jīng)反相HPLC分離，從40%乙醇流分中分離得到化合物I（23mg）、II（10.7mg）、III（3mg）；從55%乙醇流分中分離得到化合物IV（10.93mg）。

3 化合物結(jié)構(gòu)解析

Compound 1 黃色無(wú)定型粉末。1H-NMR給出黃酮母核上的氫信號(hào)信號(hào)，δ： 6.18 （1H，s）、 6.36 （1H，s）、7.57 （2H，d，8.4）、6.82 （1H，dd，8.4），判斷是黃酮類(lèi)化合物，δ： 5.21 （1H，d，7.8）、3.47 （1H，t，9.0）、3.51 （1H，t，9.0）、3.56 （1H，t，9.0）、3.76 （1H，dd，9.6）為糖上氫信號(hào)，δ5.21 （1H，d，7.8） 表明β糖端基氫信號(hào)連在黃酮母核三位上，δ3.63 （3H，s） 給出氧甲基氫信號(hào)；13C-NMR給出2個(gè)羰基碳信號(hào)δ： 179.2和170.7，糖端基碳信號(hào)δ： 104.8和糖鏈上的其他碳信號(hào)75.3、77.0、72.7、77.3、170.7，δ： 52.8為氧甲基碳信號(hào)，故鑒定為槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸甲酯（quercetin-3-O-β-D-glucuronide methylester）。分子式為C22H20O13。其波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[2]中槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸甲酯，基本一致。

Compound 2 黃色無(wú)定型粉末，鹽酸-鎂粉反應(yīng)呈陽(yáng)性。1H-NMR給出黃酮母核上的氫信號(hào)δ： 7.92 （2H，d，8.4）、6.76 （2H，d，8.4）、6.10 （1H，s）、6.29 （1H， s），糖端基氫信號(hào)δ： 5.13 （1H，d，7.2）。13C-NMR給出2個(gè)羰基碳信號(hào)δ： 179.2、179.2，黃酮母核上的碳信號(hào)δ： 159.4、135.3、163.0、100.2、158.6、95.0、161.6、105.4、122.5、132.3、116.0、161.6糖端基碳信號(hào)δ： 104.8和糖上的其它碳信號(hào)δ： 75.3、77.0、72.7、77.3、170.5，故鑒定為山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸甲酯（kaempferol-3-O-β-D-glucuronide methylester）。該化合物結(jié)構(gòu)式為C22H20O12，其波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[3]中與山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸甲酯基本一致。

4 結(jié)果與討論

從庫(kù)頁(yè)懸鉤子正丁醇層分離得到4個(gè)黃酮類(lèi)化合物，經(jīng)結(jié)構(gòu)鑒定分別為槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸甲酯（I）、山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸甲酯（II）、槲皮素（III）、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸丁酯（IV），以上化合物均首次從本種植物庫(kù)頁(yè)懸鉤子中分離得到。庫(kù)頁(yè)懸鉤子臨床應(yīng)用歷史悠久，資源豐富，是一個(gè)極具開(kāi)發(fā)潛力的蒙藥材。以上研究為蒙藥材懸鉤子木生物活性、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究提供了科學(xué)依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

[1]蒙古學(xué)百科全書(shū)編輯委員會(huì)《醫(yī)學(xué)卷》編輯委員會(huì)編.蒙古學(xué)百科全書(shū)·醫(yī)學(xué)卷[M].呼和浩特：內(nèi)蒙古人民出版社，2002，4：305-306.

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（收稿日期：2014.11.19）