李 莉，李 健，

(1．山東省聊城市第二人民醫(yī)院藥事部，山東臨清 252601; 2．山東中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院藥學(xué)部，濟南 250000)

祛風(fēng)定痛方(白芷、羌活、徐長卿等)對實驗性偏頭痛小鼠鎮(zhèn)痛效果的研究

李 莉1，李 健2，

(1．山東省聊城市第二人民醫(yī)院藥事部，山東臨清 252601; 2．山東中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院藥學(xué)部，濟南 250000)

目的:探討祛風(fēng)定痛方對實驗性偏頭痛小鼠鎮(zhèn)痛效果。方法:采用利血平致低五羥色胺(5-HT)型小鼠偏頭痛模型，眼球取血記錄凝血時間，ELISA試劑盒檢測小鼠腦勻漿中5-HT含量，對比觀察不同組別小鼠的凝血時間和腦勻漿中5-HT含量。采用福爾馬林法觀察祛風(fēng)定痛方對于小鼠的鎮(zhèn)痛效果。結(jié)果:偏頭痛小鼠腦5-HT變化結(jié)果顯示，高劑量組、中劑量組和正天丸組腦5-HT濃度明顯高于模型組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，低劑量組腦5-HT濃度高于模型組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。偏頭痛小鼠凝血時間變化結(jié)果顯示，高劑量組、中劑量組和正天丸組凝血時間明顯大于模型組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，低劑量組凝血時間高于模型組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。祛風(fēng)定痛鎮(zhèn)痛作用結(jié)果顯示，高劑量組、中劑量組和鹽酸曲馬多組在第Ⅰ時相能夠明顯降低小鼠的添足時間，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，但在第II時相對于小鼠添足時間的作用不明顯，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論:祛風(fēng)定痛方對于利血平致低五羥色胺型小鼠偏頭痛有一定的鎮(zhèn)痛作用，值得進(jìn)一步研究。

祛風(fēng)定痛方;偏頭痛;鎮(zhèn)痛效果

偏頭痛通常是局部、反復(fù)發(fā)作和自限性的嚴(yán)重頭痛，伴有自主神經(jīng)系統(tǒng)的相關(guān)癥狀，發(fā)病前往往有先兆出現(xiàn)，尚無治療的有效方法［1-2］。據(jù)相關(guān)統(tǒng)計［3-5］，全球約有10億人曾出現(xiàn)偏頭痛癥狀，且其發(fā)病人群逐漸趨于年輕化，先兆癥狀的種類也趨于多樣化。因此，避免觸發(fā)、控制癥狀和藥物預(yù)防仍然是針對該病的主要措施［6-8］，一旦發(fā)作疼痛可持續(xù)數(shù)小時，對于患者的生活和工作造成很大影響。祛風(fēng)定痛方屬于中醫(yī)傳統(tǒng)經(jīng)驗方，由白芷、羌活、徐長卿等藥物組成，具有活血通絡(luò)止痛的效果，對于多種病因?qū)е碌念^痛均有一定的臨床療效［9］。很多中醫(yī)學(xué)者認(rèn)為［10-13］，該方對于偏頭痛有一定的臨床療效，但其機制和鎮(zhèn)痛效果的量化研究尚未見報道。故本文為探討祛風(fēng)定痛方對偏頭痛的鎮(zhèn)痛效果，利用利血平致低五羥色胺(5-HT)型小鼠偏頭痛模型對該方的鎮(zhèn)痛效果進(jìn)行研究，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

取清潔級昆明種小鼠，雌雄各半，體質(zhì)量(20±2)g，室溫(23±2)℃，相對濕度(50±5)%，每籠6只，保持室內(nèi)安靜，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后開始實驗。

1.2 實驗藥品和儀器

祛風(fēng)定痛丸，山東中醫(yī)藥大學(xué)提供;福爾馬林，西安藻露堂藥業(yè)集團康復(fù)醫(yī)藥有限公司;鹽酸曲馬多，深圳海王藥業(yè)有限公司;利血平注射液，天津金耀氨基酸有限公司;正天丸，北京同仁堂科技發(fā)展股份有限公司制藥廠。電子天平，梅特勒-托利多儀器有限公司(型號PL4002);離心機，Hitachi公司(型號CT15RE);酶標(biāo)儀，雷杜Rayto RT-6000酶標(biāo)儀。

1.3 方法

1.3.1 利血平致低5-HT型小鼠偏頭痛模型取清潔級昆明種小鼠60只，雌雄各半，體質(zhì)量(20 ±2)g，按隨機數(shù)字表法分為空白對照組、模型組、高劑量組、中劑量組、低劑量組和正天丸組6組各10只?？瞻讓φ战M給予生理鹽水1ml·kg－1，皮下注射;其余各組給予利血平注射液1ml·kg－1，皮下注射，然后灌胃給藥。空白對照組給予正常喂食、給水;模型組給予生理鹽水1ml灌胃，每日1次;高劑量組給予祛風(fēng)定痛方藥液15 g·kg－1灌胃，每日1 次;中劑量組給予祛風(fēng)定痛方藥液7.5 g·kg－1灌胃，每日1次;低劑量組給予祛風(fēng)定痛方藥液3.75 g· kg－1灌胃，每日1次;正天丸組給予正天丸粉末3 g· kg－1+生理鹽水1ml灌胃，每日1次。每天皮下注射和灌胃給藥共7 d。采用眼球取血記錄凝血時間，方法參考文獻(xiàn)［11］，取出下丘腦及包含中縫核和藍(lán)斑的腦干，組織勻漿，用ELISA試劑盒檢測小鼠腦勻漿中5-HT含量。

給藥劑量換算方法:d鼠=d人×(K鼠/K 人)，d鼠:欲求算的動物公斤體質(zhì)量劑量，d人:人的公斤體質(zhì)量劑量;K鼠、K人:折算系數(shù)，K小鼠為1，K人為0.11。

1.3.2 祛風(fēng)定痛方鎮(zhèn)痛作用 采用福爾馬林法，取清潔級昆明種小鼠60只，雌雄各半，體質(zhì)量(20±2)g，按隨機數(shù)字表法分為空白對照組、模型組、高劑量組、中劑量組、低劑量組和正天丸組6組各10只。空白對照組給予生理鹽水1 ml·kg－1灌胃，空白對照組正常給予喂食給水;模型組給予生理鹽水1 ml灌胃，每日1次;高劑量組給予祛風(fēng)定痛方藥液15 g·kg－1灌胃，每日1次;中劑量組給予祛風(fēng)定痛方藥液7.5 g·kg－1灌胃，每日1次;低劑量組給予祛風(fēng)定痛方藥液3.75 g·kg－1灌胃，每日1次;曲馬多組給予鹽酸曲馬多50 mg·kg－1灌胃，每日1次，連續(xù)3 d給藥。末次給藥1 h后，除空白對照組以外各組小鼠右后足跖皮下注射濃度為2.5%的福爾馬林20 μL，記錄第Ⅰ時相(0～5 min)和第Ⅱ時相(10～60 min)添足時間(給藥劑量換算方法同上)。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，并采用t檢驗，多組資料比較采用方差分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 祛風(fēng)定痛方對小鼠腦勻漿中5-HT影響

表1顯示，偏頭痛小鼠腦5-HT變化結(jié)果顯示，與空白對照組比較，模型組小鼠腦5-HT濃度明顯低于空白對照組小鼠腦5-HT濃度，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01);與模型組比較，高劑量組、中劑量組和正天丸組腦5-HT濃度明顯高于模型組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)，低劑量組腦5-HT濃度高于模型組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。

表1 不同劑量祛風(fēng)定痛方對小鼠腦5-HT影響

2.2 祛風(fēng)定痛方對小鼠凝血時間的影響

表2顯示，偏頭痛小鼠凝血時間變化結(jié)果顯示，與空白對照組比較，模型組小鼠凝血時間明顯小于空白對照組小鼠凝血時間，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01);與模型組比較，高劑量組、中劑量組和正天丸組凝血時間明顯大于模型組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)，低劑量組凝血時間高于模型組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。

表2 不同劑量祛風(fēng)定痛方對小鼠凝血時間影響

2.3 祛風(fēng)定痛方鎮(zhèn)痛作用

表3顯示，祛風(fēng)定痛方鎮(zhèn)痛作用結(jié)果顯示，高劑量組、中劑量組和鹽酸曲馬多組在第Ⅰ時相能夠明顯降低小鼠的添足時間，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，但是在第II時相對于小鼠添足時間的作用不明顯，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。

3 討論

偏頭痛的主要特點為久治不愈、反復(fù)發(fā)作，給人們的學(xué)習(xí)和生活帶來極大困擾。中醫(yī)并沒有“偏頭痛”的概念，認(rèn)為其屬于“頭痛”范疇。中醫(yī)辨病分標(biāo)本，肝脾失調(diào)，經(jīng)絡(luò)瘀滯是偏頭痛的“本”，而“風(fēng)痰瘀”三邪是誘發(fā)疾病發(fā)作的重要因素［14-15］。祛風(fēng)定痛方中白芷、羌活、徐長卿均有祛風(fēng)通絡(luò)止痛的作用，尤其是白芷和羌活屬于治療頭痛的要藥，并且可以引其他藥物上行頭部，整方對于頭痛的治療具有針對性，也是筆者研究其對于偏頭痛作用的重要原因。

表3 不同劑量祛風(fēng)定痛方鎮(zhèn)痛作用結(jié)果

偏頭痛小鼠腦5-HT變化結(jié)果顯示，與空白對照組比較，模型組小鼠腦5-HT濃度明顯低于空白對照組，說明利血平致偏頭痛小鼠腦勻漿中5-HT濃度明顯低于正常值。5-HT是5-羥色胺的簡稱，是一種神經(jīng)遞質(zhì)，在大腦皮層及神經(jīng)突觸內(nèi)含量最高，在外周組織中也可存在。有研究認(rèn)為［16］，5-HT能夠保護神經(jīng)元免受“興奮神經(jīng)毒”的損害，對于增強記憶力也有一定作用，5-HT含量的減少可以引起易怒、煩躁、抑郁等多種情緒波動，在偏頭痛的發(fā)病中常為降低狀態(tài)。實驗中，高劑量組、中劑量組和正天丸組腦5-HT濃度明顯高于模型組，低劑量組腦5-HT濃度高于模型組，說明祛風(fēng)定痛方對于偏頭痛小鼠腦勻漿中5-HT濃度具有正向調(diào)節(jié)作用，能夠增加腦組織中5-HT含量。偏頭痛小鼠凝血時間變化結(jié)果顯示，高劑量組、中劑量組和正天丸組凝血時間明顯大于模型組，低劑量組凝血時間高于模型組，說明祛風(fēng)定痛方對于偏頭痛小鼠的凝血系統(tǒng)有影響，能夠延長凝血時間。有研究認(rèn)為［17-21］，90%以上的偏頭痛患者會出現(xiàn)血液流變的異常，血液黏度增高、凝血時間縮短、血小板間歇性聚集均為可能出現(xiàn)的癥狀。本次實驗中，模型組小鼠的凝血時間明顯縮短，與以往的研究結(jié)果相一致。祛風(fēng)定痛方鎮(zhèn)痛作用結(jié)果顯示，高劑量組、中劑量組和鹽酸曲馬多組在第Ⅰ時相能夠明顯降低小鼠的添足時間，但是在第II時相對于小鼠添足時間的作用不明顯，說明祛風(fēng)定通方在短時間內(nèi)對于偏頭痛的抑制作用較好。祛風(fēng)定痛方以白芷、羌活、徐長卿為主藥，均為針對性治療頭痛的要藥，白芷主要針對陽明頭痛，羌活擅長治療太陽經(jīng)頭痛，徐長卿對于神經(jīng)衰弱導(dǎo)致的頭痛、失眠有作用，諸藥搭配不僅可以緩解頭痛的癥狀，對于流變學(xué)指標(biāo)和腦勻漿中5-HT濃度也有積極作用。

綜上所述，祛風(fēng)定痛方對于利血平致低五羥色胺型小鼠偏頭痛有一定的鎮(zhèn)痛作用，對于偏頭痛小鼠腦勻漿中5-HT含量有升高效果，并能延長凝血時間，值得進(jìn)一步研究。

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Analgesic Effect of Qufeng Zhitong decoction to the Experimental Migraine Mice

LI Li1，LI Jian2
(1．Pharmacy department of the Second People’s Hospital of Liaocheng，Shandong Linqing 252600，China; 2．Pharmacy department of Shandong University of Traditional Chinese Medicine Affiliated Hospital，Shandong Jinan 250000，China)

Objective:To explore analgesic effect of Qufeng dingtong Recipe(Angelica，Notopterygium，Xu Changqing，etc)．On experimental migraine in mice．Methods:Reserpine-induced low serotonin(5-HT)mice model of migraine was used．Clotting time were recorded from eyeball blood．ELISA kit was used to detect 5-HT content in mouse brain homogenates．Clotting time and 5-HT content in mouse brain homogenates were compared．Formalin was observed Qufeng dringtong Recipe for analgesia in mice．Results:Changes in migraine 5-HT in mouse brain results showed that high-dose group，middle dose group and positive day pill group brain 5-HT concentration was significantly higher than the model group．The difference was statistically significant．Low-dose group of brain 5-HT concentrations higher than the model group．The difference was statistically significant．Migraine clotting time change results in mice showed that highdose group，middle dose group and positive day pill group clotting time was significantly greater than in the model group．The difference was statistically significant．Qufeng dringtong Recipe analgesia showed that high-dose group，middle dose group and tramadol hydrochloride groupⅠ in the first phase can be significantly reduced in mice add enough time．The difference was statistically significant．But in the second phase to add sufficient duration of action in mice was not obvious，the difference was not statistically significant．Conclusions:Qufeng dringtong Recipe induced by reserpine low side for migraine serotonin amine-type mice have some analgesic effect，which is worth to further study．

Qufeng dringtong Recipe;Migraine;Analgesic effect

R285．5

B

1006-3250(2015)03-0282-03

2014-12-19

李 莉(1976-)，女，副主任藥師，醫(yī)學(xué)碩士，從事中藥質(zhì)量控制與臨床藥學(xué)研究。