張 倩，胡 榮 (第三軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院神經(jīng)外科，重慶400038)

腦卒中是世界范圍內(nèi)重要致死和致殘因素，特別是發(fā)達(dá)國(guó)家，年發(fā)病率在0.25% ～0.40%，90%的幸存者會(huì)落下各種類型的殘疾，成為一個(gè)沉重的社會(huì)和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)［1］。腦卒中主要分為2 種，缺血性腦卒中和出血性腦卒中，其中出血性腦卒中致死致殘率最高。出血性腦卒中又分為腦出血(intracerebral hemorrhage，ICH)和蛛網(wǎng)膜下出血(subrachanoid hemorrhage，SAH)，其中SAH 僅占出血性腦卒中的3% ～5%，由于社會(huì)迅速老齡化，ICH 患者進(jìn)一步增多，所以ICH 是出血性腦卒中的研究重點(diǎn)，意義重大。與缺血性腦卒中相比，出血性腦卒中的治療方法有限，干細(xì)胞治療是目前腦出血治療最有潛力的新策略之一，主要包括內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞激活和外源性干細(xì)胞移植。神經(jīng)干細(xì)胞(neural stem cells，NSCs)具有自我更新修復(fù)和產(chǎn)生神經(jīng)元、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的能力，不僅參與正常神經(jīng)系統(tǒng)的生理過(guò)程，而且損傷后內(nèi)源性NSCs 會(huì)激活增殖，這些新生的干細(xì)胞會(huì)向損傷區(qū)域遷移參與損傷修復(fù)。近來(lái)研究表明ICH 后移植外源神經(jīng)干細(xì)胞對(duì)神經(jīng)功能恢復(fù)是有利的，移植的干細(xì)胞可進(jìn)入宿主，不僅可以提供神經(jīng)保護(hù)作用，還可以分化為神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞以修復(fù)受損部位，顯示了廣闊的應(yīng)用前景［2］。本文將對(duì)目前干細(xì)胞治療ICH 的進(jìn)展和存在的問(wèn)題進(jìn)行探討。

1 激活內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞治療策略

1.1 腦出血后的內(nèi)源性神經(jīng)發(fā)生

現(xiàn)代研究已明確室管膜下區(qū)(subventricular zone，SVZ)和海馬顆粒層下區(qū)(subgranular zone，SGZ)兩個(gè)區(qū)域是成年哺乳動(dòng)物腦內(nèi)神經(jīng)干細(xì)胞NSCs 的重要來(lái)源，參與了許多正常生理功能［3］，比如SVZ 神經(jīng)前體細(xì)胞經(jīng)吻側(cè)遷移流(rostral migration stream，RMS)向嗅球遷移，到嗅球后以放射狀方式遷移到顆粒和球旁細(xì)胞層，分化為中間神經(jīng)元。SGZ 神經(jīng)前體細(xì)胞遷移到顆粒細(xì)胞層，分化為成熟神經(jīng)元，參與學(xué)習(xí)記憶。近30 年的研究發(fā)現(xiàn)，成年哺乳動(dòng)物SVZ 和SGZ 神經(jīng)前干細(xì)胞在腦缺血、機(jī)械性腦損傷等病理情況下可被激活增殖。雖然對(duì)腦缺血后SVZ 神經(jīng)干細(xì)胞的反應(yīng)作了大量研究，但對(duì)腦出血后SVZ 神經(jīng)干細(xì)胞的反應(yīng)情況卻知之甚少。Masuda 等［4］首先在膠原酶制作的腦出血模型中觀察了腦出血后NSCs的激活情況，發(fā)現(xiàn)腦出血后NSCs 增殖明顯升高，并且成鏈狀向出血區(qū)遷移。這種現(xiàn)象在7 d 后達(dá)高峰，持續(xù)到第14 天，第28 天還存在。緊接著Yang 等［5］在腦自體血輸注模型中觀察到出血后7 d 即開(kāi)始出現(xiàn)神經(jīng)發(fā)生，14 d 達(dá)高峰，1 個(gè)月左右開(kāi)始下降。Yan 等［6］發(fā)現(xiàn)同樣的神經(jīng)發(fā)生并向損傷區(qū)遷移。Shen 等［7］在腦出血患者標(biāo)本上發(fā)現(xiàn)血腫周?chē)X組織有神經(jīng)干細(xì)胞存在，提示臨床腦出血患者亦存在神經(jīng)發(fā)生。新近Otero 等［8］在膠原酶腦出血模型中發(fā)現(xiàn)內(nèi)源性神經(jīng)發(fā)生在第7 天達(dá)高峰，但增殖的神經(jīng)干細(xì)胞在出血后3 周出現(xiàn)凋亡，多數(shù)新生神經(jīng)元存活不能超過(guò)3 周。以上研究提示腦出血后NSCs 能夠做出反應(yīng)以增殖，并向損傷區(qū)遷移，分化為新生神經(jīng)元，雖然新生神經(jīng)元會(huì)出現(xiàn)凋亡，但I(xiàn)CH后神經(jīng)發(fā)生的行為可以持續(xù)近1 年。因而找出腦出血后NSCs激活的調(diào)控機(jī)制，有助增強(qiáng)內(nèi)源性神經(jīng)發(fā)生和抑制凋亡，使得ICH 后NSCs 能遷移到損傷區(qū)域并存活，改善神經(jīng)功能預(yù)后。

1.2 腦出血后神經(jīng)發(fā)生的調(diào)控機(jī)制

目前對(duì)腦缺血后NSCs 激活調(diào)控機(jī)制研究較多，而對(duì)腦出血后NSCs 的調(diào)控機(jī)制研究甚少。目前認(rèn)為NSCs 受諸如構(gòu)成微環(huán)境(niche)的生長(zhǎng)因子、成型素、趨化因子、神經(jīng)遞質(zhì)以及胞外基質(zhì)等的影響，這些因子通常與他們的相關(guān)受體直接作用發(fā)揮調(diào)控NSCs 增殖、遷移、分化和存活等的功能［9］。早期研究顯示MMP-2 在腦出血后高表達(dá)，免疫熒光雙標(biāo)顯示NSCs 也表達(dá)MMP-2［4］，提示MMP-2 與NSCs 的激活有關(guān)。Yang 等［5］通過(guò)將thrombin 注射到基底節(jié)區(qū)，觀察到可以模擬ICH 后的神經(jīng)發(fā)生，給予thrombin 的特異性抑制劑Hirudin，可以抑制thrombin 促進(jìn)NSCs 激活的效應(yīng)。提示thrombin 可能參與了腦出血后神經(jīng)發(fā)生的調(diào)控［5］。近來(lái)有研究提示骨橋蛋白Osteopontin(OPN)在腦出血后3 d 高表達(dá)，并可持續(xù)7 ～28 d。體外培養(yǎng)NSCs 給予OPN 促進(jìn)其遷移。OPN 基因敲除小鼠在腦出血情況下NSCs 遷移明顯受到抑制［6］。我們自己的研究表明，SVZ激活不僅在同側(cè)半球，在對(duì)側(cè)也有增殖和遷移，因?yàn)橛写罅縆i-67 和DCX 陽(yáng)性的細(xì)胞，但確切的機(jī)制未知，可能和堿性成纖維生長(zhǎng)因子(bFGF)、EGF、sonic hedgehog 和BDNF 等有關(guān)。

腦出血后NSCs 增殖后需要遷移到出血灶才能發(fā)揮作用，但是遷移規(guī)律及其機(jī)制并不清楚。在正常情況下SVZ 產(chǎn)生的NSCs 會(huì)沿著RMS 遷移到嗅球并分化成神經(jīng)元。研究發(fā)現(xiàn)腦出血后7 d 左右大部分增殖的NSCs 將遷移到損傷區(qū)，但與增殖時(shí)不一樣，出血灶附近遷移的NSCs 并不均衡，GFAP 陽(yáng)性細(xì)胞主要分布在損傷區(qū)周?chē)?，而Neuroblasts 分布在緊鄰出血灶周?chē)?。由于成年后紋狀體區(qū)并沒(méi)有放射狀膠質(zhì)細(xì)胞的纖維或膠質(zhì)細(xì)胞管，那么這些GFAP 陽(yáng)性細(xì)胞有可能與放射狀膠質(zhì)細(xì)胞發(fā)揮同樣的功能，以引導(dǎo)新生神經(jīng)元到達(dá)損傷區(qū)或者附近［10］。雖然腦出血后NSCs 的激活已得到證實(shí)，但調(diào)控NSCs 的增殖、遷移、分化和整合的細(xì)胞分子機(jī)制值得深入研究，尤其微環(huán)境相關(guān)因子調(diào)節(jié)NSCs 對(duì)出血腦區(qū)修復(fù)很重要，有必要加強(qiáng)在NSCs 與微環(huán)境相互作用方面的研究，促進(jìn)NSCs 的激活并向損傷區(qū)遷移、存活對(duì)腦出血的治療將非常有幫助。

2 移植外源性干細(xì)胞治療策略

腦出血后干細(xì)胞治療的另一策略是移植外源性干細(xì)胞，研究顯示腦出血模型中靜脈或鞘內(nèi)注射干細(xì)胞能進(jìn)入腦部存活并促進(jìn)功能恢復(fù)［11］，克隆分析證明移植干細(xì)胞可以在病灶微環(huán)境信號(hào)的指導(dǎo)下分化成神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞以及少突膠質(zhì)細(xì)胞，促進(jìn)神經(jīng)再生修復(fù)損傷組織，重建受損區(qū)神經(jīng)功能。目前用于ICH 治療的干細(xì)胞主要有胚胎干細(xì)胞、神經(jīng)干細(xì)胞、成體干細(xì)胞、誘導(dǎo)多能干細(xì)胞、骨髓源性干細(xì)胞等。均有其優(yōu)點(diǎn)，也有局限性，比如生成效率低和致瘤性問(wèn)題，現(xiàn)將目前常用干細(xì)胞類型及其優(yōu)缺點(diǎn)總結(jié)如下。

2.1 胚胎干細(xì)胞(embryonic stem cells，ESCs)

1998 年ESCs 第一次從胚囊的內(nèi)細(xì)胞層中獲得，推動(dòng)了干細(xì)胞研究的熱潮。ESCs 第一大優(yōu)點(diǎn)是良好的增殖性能，具有全能性，可以無(wú)限增殖，較便捷地獲得足夠的治療用細(xì)胞數(shù)量;另一大優(yōu)點(diǎn)是具有分化為任何胚層、任何組織和細(xì)胞的能力，在特定的培養(yǎng)基中可以向神經(jīng)細(xì)胞方向分化，所以早期ESCs被認(rèn)為是腦卒中治療的理想細(xì)胞來(lái)源。在腦卒中模型上發(fā)現(xiàn)移植ESCs 可以分化為神經(jīng)元、各類型膠質(zhì)細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞，促進(jìn)神經(jīng)結(jié)構(gòu)和功能修復(fù)［12］。然而ESCs 也有其缺陷，主要包括容易出現(xiàn)惡性轉(zhuǎn)化形成畸胎瘤、倫理問(wèn)題、來(lái)源問(wèn)題，從而導(dǎo)致ESCs 的臨床應(yīng)用受限3 個(gè)方面。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，ESCs 在正常培養(yǎng)過(guò)程中并不會(huì)出血染色體改變，在裸鼠上也沒(méi)有觀察到腫瘤形成，提示移植到疾病模型中出現(xiàn)的惡性轉(zhuǎn)變可能與卒中后局部微環(huán)境中各種理化因子的刺激有關(guān)［13］。

2.2 神經(jīng)干細(xì)胞

正如前述NSCs 是存在于哺乳動(dòng)物胎兒和成人SVZ、SGZ、皮層、小腦以及脊髓的特定區(qū)域，可以自我更新和分化成3 種主要神經(jīng)細(xì)胞:神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞。NSCs與ESCs 不同，移植成人NSCs 可以避免倫理學(xué)問(wèn)題，同時(shí)神經(jīng)干細(xì)胞是未分化的原始細(xì)胞，不表達(dá)成熟的細(xì)胞抗原，不易被免疫系統(tǒng)識(shí)別，具有低免疫源性的特點(diǎn)。組織融合性好，可與宿主的神經(jīng)組織良好融合，并在宿主體內(nèi)長(zhǎng)期存活。許多研究表明NSCs 移植物在宿主CNS 內(nèi)具有明顯的生存、遷移和分化能力［13］。若將人胎腦NSCs 植入成年大鼠室管膜下區(qū)，其可沿吻側(cè)遷移流進(jìn)入嗅球，分化為雙極神經(jīng)元，其分化命運(yùn)與存留于室管膜下區(qū)的內(nèi)源性NSCs 相同。2005 年10 月美國(guó)FDA 公布批準(zhǔn)斯坦福大學(xué)以異基因人胎腦神經(jīng)干細(xì)胞腦內(nèi)移植治療小兒腦病，然而其最大的問(wèn)題就是NSCs 的來(lái)源和決定合適的移植途徑。

2.3 誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(induced pluripotent stem cells，iPSCs)

2007 年首次報(bào)道體細(xì)胞可以通過(guò)表達(dá)特定的轉(zhuǎn)錄因子Oct4，Sox2，Klf4 和c-Myc 可以從纖維細(xì)胞反向再生胚胎樣干細(xì)胞，稱之為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞［14］。已經(jīng)證實(shí)iPSCs 細(xì)胞可分化成不同類型的神經(jīng)細(xì)胞，有研究顯示在動(dòng)物卒中模型中移植iPSCs 有利改善感覺(jué)、運(yùn)動(dòng)功能，降低炎癥因子及增加抗炎因子的水平。新近研究也顯示來(lái)源于人成纖維細(xì)胞的iPSCs 可分化為神經(jīng)前體細(xì)胞，移植治療腦卒中4 個(gè)月沒(méi)有發(fā)現(xiàn)腫瘤形成，并明顯促進(jìn)腦卒中的神經(jīng)功能恢復(fù)［15］。雖然iPSCs 沒(méi)有倫理問(wèn)題，但對(duì)iPSCs 的使用仍有一些問(wèn)題，比如生成效率低和致瘤性問(wèn)題，而且用來(lái)生成前體細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄因子本身就具有致瘤能力，報(bào)道稱移植未分化的iPSCs 有高腫瘤發(fā)生率，即便自體的iPSCs 也可能激活免疫反應(yīng)。

2.4 永生化的干細(xì)胞系

最近研究發(fā)現(xiàn)，一些來(lái)源于嚙齒動(dòng)物和人體組織的神經(jīng)干細(xì)胞系也可以作為移植干細(xì)胞來(lái)源。“NT2”就是一個(gè)例子，其源自人畸胎瘤，又叫NT2N 細(xì)胞(也叫hNT 神經(jīng)元)，可以促進(jìn)雙側(cè)神經(jīng)功能恢復(fù)，連續(xù)觀察6 個(gè)月后沒(méi)有發(fā)現(xiàn)致癌性［16］。最近建立的人胚永生化神經(jīng)干細(xì)胞系HB1.F3 在腦出血模型中展示出可分化成神經(jīng)元和從注射區(qū)向其他解剖結(jié)構(gòu)區(qū)域遷移的能力［17］，其中過(guò)表達(dá)膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(glial cell line-derived neurotrophic factor，GDNF)的人神經(jīng)干細(xì)胞系F3.GDNF 是一個(gè)針對(duì)腦出血細(xì)胞治療非常好的細(xì)胞來(lái)源，研究顯示F3.GDNF移植到ICH 模型可觀察到F3.GDNF 細(xì)胞通過(guò)過(guò)表達(dá)GDNF 激活許多生存信號(hào)和抑制凋亡信號(hào)來(lái)促進(jìn)自身和周?chē)窠?jīng)元的存活，并促進(jìn)損傷區(qū)附近過(guò)表達(dá)VEGF 以促進(jìn)細(xì)胞的存活和分化，促進(jìn)ICH 動(dòng)物模型的功能恢復(fù)。

2.5 骨髓源性干細(xì)胞

近年研究表明骨髓中含有多種干細(xì)胞或前體細(xì)胞，機(jī)體受傷后骨髓的干細(xì)胞可以由骨髓動(dòng)員到外周血，一旦進(jìn)入血管系統(tǒng)，他們就可以隨之進(jìn)入中樞神經(jīng)系統(tǒng)從而參與神經(jīng)系統(tǒng)的損傷修復(fù)。目前常用的骨髓干細(xì)胞有造血干細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞、內(nèi)皮前體細(xì)胞以及極小胚胎樣干細(xì)胞。

2.5.1 造血干細(xì)胞(hematopoietic stem cells，HSCs) 造血干細(xì)胞表面標(biāo)志物是CD34+、CD150+、CD244－和CD48－。當(dāng)腦卒中發(fā)生時(shí)，中樞神經(jīng)系統(tǒng)可以分泌細(xì)胞因子動(dòng)員HSCs，機(jī)制可能與神經(jīng)遞質(zhì)(主要是兒茶酚胺)釋放信號(hào)引發(fā)HSCs 動(dòng)員。臨床數(shù)據(jù)顯示急性腦卒中后大量的CD34+造血干細(xì)胞、克隆形成細(xì)胞(colony-forming cells)以及長(zhǎng)期培養(yǎng)啟動(dòng)細(xì)胞(longterm culture-initiating cells)被動(dòng)員，且動(dòng)員的數(shù)量與功能恢復(fù)相關(guān)。有研究在卒中的急性、亞急性以及慢性階段給患者輸注造血干細(xì)胞，未發(fā)現(xiàn)移植后的不良反應(yīng)。也有研究發(fā)現(xiàn)骨髓單核細(xì)胞移植增加血漿β-神經(jīng)生長(zhǎng)因子，移植單核細(xì)胞中CD34+細(xì)胞的數(shù)量與功能恢復(fù)率相關(guān)［18］。HSCs 可以從骨髓，外周血或臍帶血獲得，其優(yōu)勢(shì)在于自體與異體都適用，也沒(méi)有ESCs 的倫理問(wèn)題。

2.5.2 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells，MSCs)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的表面標(biāo)志物是SH2+、SH3+、SH4+、CD29+、CD44+、CD14－、CD34－和CD45－，可以在幾乎所有組織中找到并能分化為骨、軟骨和脂肪細(xì)胞。MSCs 可以分泌眾多營(yíng)養(yǎng)因子包括干細(xì)胞生長(zhǎng)因子(hepatocyte growth factor，HGF)、神經(jīng)生長(zhǎng)因子(nerve growth factor，NGF)等［19］。除了分泌這些因子，MSCs 還可以促進(jìn)SVZ 和SGZ 區(qū)的神經(jīng)干細(xì)胞向損傷區(qū)遷移，減少損傷半影區(qū)細(xì)胞的調(diào)亡［20］。無(wú)論MSCs 是否分化成功能神經(jīng)元，其都能促進(jìn)卒中后的神經(jīng)發(fā)生。盡管MSCs 可由任何間葉組織得到，但證據(jù)表明不同部位得到的間充質(zhì)干細(xì)胞具有不同的特性，更適合用于治療某特定的疾病。MSCs 臨床應(yīng)用有很多優(yōu)勢(shì):骨髓中易得，自體移植無(wú)需免疫抑制，不存在胚胎源性細(xì)胞相關(guān)的倫理問(wèn)題以及很少受惡性改變和基因缺陷的影響。但間充質(zhì)干細(xì)胞的成瘤性也不可忽視，不同來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞具有不同的成腫瘤性和促腫瘤轉(zhuǎn)移性，研究發(fā)現(xiàn)臍血間充質(zhì)干細(xì)胞在腫瘤存在的情況下不會(huì)發(fā)展成腫瘤前體細(xì)胞，這與骨髓來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞不一樣。

2.5.3 內(nèi)皮祖細(xì)胞(endothelial progenitor cells，EPCs) 卒中在病理學(xué)上是多因素的，其中之一就是破壞血管完整性，導(dǎo)致血管側(cè)漏產(chǎn)生卒中結(jié)果。內(nèi)皮素調(diào)節(jié)BBB 滲透率從而促進(jìn)卒中恢復(fù)，內(nèi)皮祖細(xì)胞是成熟內(nèi)皮的前體細(xì)胞，形成血管系統(tǒng)［19］。EPCs 表達(dá)CD34、CD133 和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2。新近研究提示，骨髓來(lái)源的EPCs 會(huì)對(duì)新血管形成區(qū)做出反應(yīng)，在那分化為內(nèi)皮細(xì)胞［19］。研究發(fā)現(xiàn)MCAO 腦卒中模型動(dòng)物通過(guò)尾靜脈注射EPCs 可減少梗死區(qū)域，促進(jìn)神經(jīng)功能恢復(fù)，降低細(xì)胞凋亡，增加梗死邊界區(qū)微血管密度，減輕缺血面積。

2.5.4 極小胚胎樣干細(xì)胞(very small embryonic-like stem cells，VSELs) VSELs 表型特征為Sca-1+、Lin－、CD45－，同樣也表達(dá)諸如SSEA-1、Oct-4、Nanog 以及Rex-1 等多能干細(xì)胞標(biāo)志物［21］，卒中發(fā)生后由成人骨髓組織動(dòng)員到外周血。目前認(rèn)為VSELs 是外胚層來(lái)源的多能干細(xì)胞，在胚胎發(fā)育早期存儲(chǔ)起來(lái)，作為可以恢復(fù)活力的儲(chǔ)備。腦卒中后大腦有大量的細(xì)胞顯示VSEL 表型，VSELs 可以分化成神經(jīng)元、少突膠質(zhì)細(xì)胞以及小膠質(zhì)細(xì)胞，進(jìn)而再生修復(fù)受損區(qū)來(lái)治療卒中［21］。但是VSELs存在與否目前尚有爭(zhēng)議，同時(shí)應(yīng)用方面也有一定的局限性，其中一個(gè)就是VSELs 的數(shù)量太少，獲率很低。因此，要求在移植前進(jìn)行增殖，另外隨年齡增長(zhǎng)VSELs 數(shù)量下降，加劇了在老年病患中獲得足夠數(shù)量細(xì)胞的困難。

2.6 胚胎組織外干細(xì)胞

富含胚胎組織外干細(xì)胞的組織有:臍帶、胎盤(pán)、羊膜以及Wharton’s jelly。胚胎外干細(xì)胞與NSCs 和MSCs 不同，屬于不同胚層。將胎盤(pán)來(lái)源的胚胎外干細(xì)胞移植治療腦卒中，發(fā)現(xiàn)不僅可替代受損的細(xì)胞，而且改善微環(huán)境促進(jìn)內(nèi)源性神經(jīng)發(fā)生［22］。另外的研究發(fā)現(xiàn)用臍帶血來(lái)源的胚胎外干細(xì)胞治療卒中時(shí)可促進(jìn)血管生長(zhǎng)因子的表達(dá)、bFGF 的分泌和神經(jīng)功能恢復(fù)。此外臍帶血干細(xì)胞具有抑制因損傷引發(fā)的機(jī)體免疫反應(yīng)，與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞相比，具有良好的免疫調(diào)節(jié)性。來(lái)源于Wharton’s jelly 的干細(xì)胞可以分化為膠質(zhì)細(xì)胞、神經(jīng)元和內(nèi)皮細(xì)胞促進(jìn)腦卒中后的神經(jīng)可塑性，同時(shí)通過(guò)分泌白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor，LIF)發(fā)揮免疫抑制作用。鑒于現(xiàn)在臍帶胎盤(pán)保存庫(kù)建設(shè)的增加，這些胚胎外干細(xì)胞將來(lái)具有巨大的治療潛能與市場(chǎng)。

2.7 其他來(lái)源的成體干細(xì)胞

2.7.1 脂肪干細(xì)胞 脂肪組織含有脂肪干細(xì)胞，其分子標(biāo)記與骨髓源性間充質(zhì)干細(xì)胞有90%以上的一致性。在腦出血模型中發(fā)現(xiàn)它可以改善神經(jīng)功能，降低腦部炎癥水平和慢性退化，脂肪干細(xì)胞可以分化成神經(jīng)元，膠質(zhì)細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞。同時(shí)，與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞相比它有更高的增殖活性，產(chǎn)生更多VEGF 和肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子［22］。同樣，脂肪干細(xì)胞也存在自發(fā)突變致癌的可能，研究發(fā)現(xiàn)脂肪干細(xì)胞移植會(huì)促進(jìn)預(yù)先存在腫瘤的增殖，但單獨(dú)脂肪干細(xì)胞的移植沒(méi)發(fā)現(xiàn)能導(dǎo)致腫瘤［22］，所以為了取得盡可能安全有效的卒中治療方法必須仔細(xì)分析風(fēng)險(xiǎn)收益比。

2.7.2 牙組織源性干細(xì)胞 牙齒組織在未來(lái)干細(xì)胞移植方面很有用處，牙組織源性干細(xì)胞包括牙髓干細(xì)胞、脫落乳牙的干細(xì)胞、牙周韌帶干細(xì)胞、端突的干細(xì)胞以及牙泡前體細(xì)胞，他們表現(xiàn)出間充質(zhì)干細(xì)胞樣能力。牙組織源性干細(xì)胞可以分化成多種細(xì)胞類型包括神經(jīng)細(xì)胞、脂肪細(xì)胞和成牙質(zhì)細(xì)胞。研究發(fā)現(xiàn)當(dāng)把牙組織源性干細(xì)胞移植到小鼠腦內(nèi)時(shí)顯示出細(xì)胞存活且表達(dá)神經(jīng)元分子標(biāo)志物，而且牙組織源性干細(xì)胞的神經(jīng)原性比骨髓源性干細(xì)胞更強(qiáng)［22］，很可能得益于它們的神經(jīng)嵴來(lái)源。

3 展望

雖然針對(duì)干細(xì)胞治療出血性腦卒中進(jìn)行了大量的基礎(chǔ)研究，顯示了內(nèi)源性與外源性干細(xì)胞在治療腦出血領(lǐng)域的價(jià)值，也取得了具有一定價(jià)值的研究成果，但干細(xì)胞應(yīng)用于治療腦出血還需要針對(duì)哪種干細(xì)胞更合適、影響因素、治療方式及臨床安全性做進(jìn)一步的深入研究，解決諸如:①激活內(nèi)源性神經(jīng)發(fā)生、增殖和遷移的調(diào)節(jié)因素;②外源性干細(xì)胞移植的時(shí)間、途徑和劑量;③外源性干細(xì)胞的倫理問(wèn)題;④干細(xì)胞成腫瘤性等一系列的問(wèn)題，才能在保證安全的基礎(chǔ)上，更加合理有效地使這一新的治療手段服務(wù)臨床，造福大眾。

［1］Jeong H，Yim HW，Cho YS，et al.Efficacy and safety of stem cell therapies for patients with stroke:a systematic review and single arm meta-analysis［J］.Int J Stem Cells，2014，7(2):63 －69.

［2］Qin J，Gong G，Sun S，et al.Functional recovery after transplantation of induced pluripotent stem cells in a rat hemorrhagic stroke model［J］.Neurosci Lett，2013，554:70 －75.

［3］Barkho BZ，Zhao X.Adult neural stem cells:response to stroke injury and potential for therapeutic applications［J］.Curr Stem Cell Res Ther，2011，6(4):327 －338.

［4］Masuda T，Isobe Y，Aihara N，et al.Increase in neurogenesis and neuroblast migration after a small intracerebral hemorrhage in rats［J］.Neurosci Lett，2007，425(2):114 －119.

［5］Yang S，Song S，Hua Y，et al.Effects of thrombin on neurogenesis after intracerebral hemorrhage［J］.Stroke，2008，39(7):2079 －2084.

［6］Yan YP，Lang BT，Vemuganti R，et al.Persistent migration of neuroblasts from the subventricular zone to the injured striatum mediated by osteopontin following intracerebral hemorrhage［J］.J Neurochem，2009，109(6):1624 －1635.

［7］Shen J，Xie L，Mao X，et al.Neurogenesis after primary intracerebral hemorrhage in adult human brain［J］.J Cereb Blood Flow Metab，2008，28(8):1460 －1468.

［8］Otero L，Zurita M，Bonilla C，et al.Endogenous neurogenesis after intracerebral hemorrhage［J］.Histol Histopathol，2012，27(3):303－315.

［9］ Lim DA，Alvarez-Buylla A.Adult neural stem cells stake their gro und［J］.Trends Neurosci，2014，37(10):563 －571.

［10］An YH，Wang HY，Gao ZX，et al.Differentiation of rat neural stem cells and its relationship with environment［J］.Biomed Environ Sci，2004，17(1):1 －7.

［11］Xue YZ，Li XX，Li L，et al.Curative effect and safety of intrathecal transplantation of neural stem cells for the treatment of cerebral hemorrhage［J］.Genet Mol Res，2014，13(4):8294 －8300.

［12］Rokhsareh M，Leila D，Majid G，et al.Stem cell therapy in stroke:a review literature［J］.Int J Prev Med，2013，4(2):139 －146.

［13］Banerjee S，Williamson DA，Habib N，et al.The potential benefit of stem cell therapy after stroke:an update［J］.Vasc Health Risk Manag，2012，8:569 －580.

［14］Takahashi K，Tanabe K，Ohnuki M，et al.Induction of pluripotent stem cells from adult human fibroblasts by defined factors［J］.Cell，2007，131(5):861 －872.

［15］Kalladka D，Muir KW.Brain repair:cell therapy in stroke［J］.Stem Cells Cloning，2014，7:31 －44.

［16］Hara K，Yasuhara T，Maki M，et al.Neural progenitor NT2N cell lines from teratocarcinoma for transplantation therapy in stroke［J］.Prog Neurobiol，2008，85(3):318 －334.

［17］Satoh J，Obayashi S，Tabunoki H，et al.Stable expression of neurogenin 1 induces LGR5，a novel stem cell marker，in an immortalized human neural stem cell line HB1.F3［J］.Cell Mol Neurobiol，2010，30(3):415 －426.

［18］Moniche F，Montaner J，Gonzalez-Marcos JR，et al.Intra-arterial bone marrow mononuclear cell transplantation correlates with GM-CSF，PDGF-BB，and MMP-2 serum levels in stroke patients:results from a clinical trial［J］.Cell Transplant，2014，23 (1):57 －64.

［19］Zhao YH，Yuan B，Chen J，et al.Endothelial progenitor cells:therapeutic perspective for ischemic stroke［J］.CNS Neurosci Ther，2013，19(2):67 －75.

［20］Lalu MM，McIntyre L，Pugliese C，et al.Safety of cell therapy with mesenchymal stromal cells (SafeCell):a systematic review and meta-analysis of clinical trials［J］.PLoS One，2012，7(10):47559.

［21］Paczkowska E，Kucia M，Koziarska D，et al.Clinical evidence that very small embryonic-like stem cells are mobilized into peripheral blood in patients after stroke［J］.Stroke，2009，40(4):1237 －1244.

［22］Kazutaka S，Travis D，Naoki T，et al.Stem Cell Transplantation for Neuroprotection in Stroke［J］.Brain Sci，2013，3(1):239 －261.