楚維斌，史彬林，閆素梅，張鵬飛，趙飛，孫登生，趙啟龍，張靜（內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學動物科學學院，內(nèi)蒙古呼和浩特010018）

艾蒿水提物對肉仔雞免疫和抗氧化功能的影響

楚維斌，史彬林*，閆素梅，張鵬飛，趙飛，孫登生，趙啟龍，張靜
（內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學動物科學學院，內(nèi)蒙古呼和浩特010018）

本試驗旨在研究日糧中添加不同水平的艾蒿水提物對肉仔雞免疫和抗氧化功能的影響。試驗選用192只1日齡健康AA肉仔雞，隨機分為4個處理，每個處理6個重復，每個重復8只雞。對照組飼喂基礎日糧，其他3組分別飼喂在基礎日糧中添加500、1 000、2 000 mg/kg艾蒿水提物的試驗日糧。試驗期共42 d，分為前、后兩期，每期21 d。結(jié)果表明：與對照組相比，試驗后期1 000 mg/kg的艾蒿水提物添加組法氏囊指數(shù)顯著增加（P＜0.05）；試驗前期500 mg/kg艾蒿水提物添加組免疫球蛋白M（IgM）含量顯著增加（P＜0.05），試驗后期1 000 mg/kg艾蒿水提物添加組免疫球蛋白G（IgG）含量顯著增加（P＜0.05）；試驗前期添加量1 000 mg/kg的試驗組超氧化物歧化酶（SOD）含量顯著提高（P＜0.05），而艾蒿添加組丙二醛（MDA）含量都顯著降低（P＜0.05）。試驗證明，日糧中添加艾蒿水提物可提高肉仔雞免疫和抗氧化能力。

艾蒿水提物；肉仔雞；免疫器官指數(shù)；免疫指標；抗氧化指標

抗生素具有一定的促生長、抗菌和改善畜禽新陳代謝的作用［1］，其作為飼料添加劑已有幾十年的歷史。然而，飼用抗生素在提高畜禽生產(chǎn)性能的同時，也產(chǎn)生了許多負面效應。研究發(fā)現(xiàn)，長期飼喂抗生素會使動物體內(nèi)的病原微生物產(chǎn)生抗藥性，同時在畜產(chǎn)品中的藥物殘留會對人體產(chǎn)生直接危害［2］。因此，開發(fā)一種無毒、無藥物殘留、可提高機體免疫和抗氧化功能的新型綠色添加劑成為研究的新方向。

艾蒿為菊科蒿屬多年生草本植物。傳統(tǒng)中醫(yī)認為艾蒿具有散寒止痛、溫經(jīng)止血、通經(jīng)活絡等功效。艾蒿含有多糖、揮發(fā)油、黃酮、三萜類及多種微量化學元素。黃酮類成分是一類具有C6-C3-C6基本母核結(jié)構(gòu)的天然有色產(chǎn)物，目前研究發(fā)現(xiàn)，蒿屬植物的黃酮類化合物結(jié)構(gòu)類型主要包括黃酮醇類、黃酮類、二氫黃酮類及其苷類。多糖是一類由單糖組成的天然高分子化合物，其在增強免疫、抗衰老、降血糖方面有顯著作用。目前，人們對艾蒿的應用研究主要集中在其對生產(chǎn)性能的影響方面，而關于其對肉雞免疫、抗氧化方面影響的研究鮮見報道。本試驗旨在研究日糧中添加艾蒿水提物對肉仔雞免疫和抗氧化功能的影響，為艾蒿作為一種新型飼料添加劑的研究與應用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料試驗用艾蒿采自和林格爾縣大紅城鄉(xiāng)境內(nèi)，將其陰干、蒸煮提取、凍干成粉。試驗地點在內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學生產(chǎn)雞舍。

1.2 試驗設計和日糧選取192只1日齡體重相近的健康AA肉仔雞，分為4個處理，每個處理6個重復，每個重復8只雞。對照組飼喂基礎日糧（玉米-豆粕型），其他3組分別飼喂基礎日糧中添加500、1 000、2 000 mg/kg艾蒿水提物的試驗日糧。試驗期42 d，分前后兩期，各21 d。試驗日糧參照NRC（1994）肉雞飼養(yǎng)標準結(jié)合內(nèi)蒙古地區(qū)肉雞養(yǎng)殖實際情況配制，基礎日糧配方見表1，各組日糧營養(yǎng)水平一致。

1.3 飼養(yǎng)管理試驗前對試驗雞舍及相關試驗用具進行嚴格的清洗和消毒。試驗雞采用多層籠養(yǎng)，試驗期間控制好光照、溫度、濕度、通風和光照，具體方法參照AA肉雞飼養(yǎng)管理手冊。試驗期間的免疫按照常規(guī)免疫程序進行。

1.4 檢測項目和方法

1.4.1 免疫器官指數(shù)在試驗第21、42天時每個重復選取體重適中的健康雞1只，空腹稱重，按常規(guī)方法進行屠宰。屠宰后將免疫器官（脾臟、胸腺、法氏囊）分離并稱重，計算免疫器官指數(shù)，免疫器官指數(shù)=器官重（g）/活體重（kg）。

表1 基礎日糧組成及營養(yǎng)成分（風干基礎）

1.4.2 血清免疫和抗氧化指標分別在試驗第21、42天時每個重復選取1只體重適中的健康雞，頸靜脈采血，靜置1 h后在4 000 r/min下離心15 min，分離血清于-20℃下保存。用ELISA試劑盒（南京博爾迪）測定免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）、可溶性CD4（sCD4）、可溶性CD8（sCD8）等免疫指標和總抗氧化能力（TAOC）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）、過氧化氫酶（CAT）等抗氧化指標。

1.5 統(tǒng)計分析數(shù)據(jù)用Microsoft Excel 2007進行整理，采用SAS9.0統(tǒng)計軟件中的ANOVA程序?qū)υ囼灁?shù)據(jù)進行單因子方差分析，采用Duncan′s多重比較確定組間差異顯著性水平，P＜0.05為差異顯著，P＜0.01為差異極顯著。所得結(jié)果用平均值±標準差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 艾蒿水提物對肉仔雞免疫器官的影響由表2可知，與對照組相比，試驗后期1 000 mg/kg艾蒿水提物組顯著提高了法氏囊指數(shù)（P＜0.05），而其他免疫器官指數(shù)的組間差異均不顯著（P＞0.05）。

2.2 艾蒿水提物對肉仔雞血清免疫指標的影響由表3可知，試驗前期與對照組相比，添加量為500、1 000 mg/kg的試驗組IgM含量都有所提高，但添加量為500 mg/kg時差異顯著（P＜0.05）；艾蒿水提物添加組sCD8含量都有所下降，但組間差異不顯著（P＞0.05）。試驗后期，添加量為1 000 mg/kg的試驗組IgG含量顯著增加（P＜0.05）。其他血清免疫指標的組間差異均不顯著。

2.3 艾蒿水提物對肉仔雞血清抗氧化指標的影響從表4可以看出，與對照組相比，試驗前期添加量1 000 mg/kg的試驗組SOD含量顯著提高（P＜0.05），而添加艾蒿組MDA含量都顯著降低（P＜0.05）。

3 討論

3.1 艾蒿水提物對肉仔雞免疫器官指數(shù)的影響免疫器官是動物免疫活性細胞發(fā)育、增殖的場所，免疫器官的狀況與機體免疫功能相關。一般認為，免疫器官越重機體免疫機能越好。脾臟、胸腺、法氏囊是畜禽主要免疫器官，參與機體的細胞免疫和體液免疫，它們的機能強弱與發(fā)育的狀態(tài)決定著機體免疫的水平。本試驗表明，試驗后期艾蒿添加組法氏囊指數(shù)較對照組都有所增加，分別增加1.2%、47.2%、17.8%，而添加量為1 000 mg/kg時顯著增加，這與趙興華等［3］的研究結(jié)果一致。而胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)組間差異不顯著，這與黃菁等［4］的研究結(jié)果不一致。糖類化合物是一類具有多羥基醛或酮的化合物。多糖是自然界中具有復雜結(jié)構(gòu)的糖類物質(zhì)，具有多種生物活性。研究發(fā)現(xiàn)，多糖在T、B淋巴細胞，自然殺傷細胞（NK），淋巴因子激活的殺傷細胞（LAK）等免疫細胞和促進細胞因子生成、激活補體系統(tǒng)方面具有重要作用。艾蒿中的多糖類物質(zhì)具有促進免疫器官發(fā)育的作用，而黃酮會抑制免疫器官細胞凋亡。這可能是法氏囊指數(shù)增加的原因。

表2 日糧中添加不同水平的艾蒿水提物對肉仔雞免疫器官指數(shù)的影響

表3 日糧中添加不同水平的艾蒿水提物對肉仔雞血清免疫指標的影響

表4 日糧中添加不同水平的艾蒿水提物對肉仔雞血清抗氧化指標的影響

3.2 艾蒿水提物對肉仔雞血清免疫指標的影響免疫球蛋白是機體內(nèi)一類廣泛參與體液免疫反應的球蛋白，其中外分泌液中的IgA與脾臟、淋巴結(jié)中產(chǎn)生的IgG具有抗菌、抗病毒等免疫活性，而在初次體液免疫反應中出現(xiàn)的IgM具有補體激活等生物學功能［5］。輔助/誘導性T細胞是主要的CD4陽性細胞，在抗原捕獲及遞呈中發(fā)揮重要作用，它分泌的IL等細胞因子可幫助其他T細胞增殖、分化、成熟；細胞毒/抑制性T細胞是主要的CD8陽性細胞。試驗發(fā)現(xiàn)，與對照組相比，試驗前期500 mg/kg添加組IgM含量顯著增加，而試驗后期1 000 mg/kg添加組IgG含量顯著增加，這與Chu等［6］的研究結(jié)果一致。而潘存霞［7］發(fā)現(xiàn)蒿屬植物提取物對增強機體免疫能力沒有影響，這與本試驗結(jié)果不一致，其原因可能是試驗動物不同，艾蒿對動物機體的影響存在一定差異。已有研究發(fā)現(xiàn)，蒿屬植物的主要成分包括揮發(fā)油、青蒿素、黃酮、山奈酚、微量化學元素等，其中黃酮、山奈酚等具有增強免疫功能的作用［8］。本試驗中IgM、IgG含量的增加可能與艾蒿中黃酮、山奈酚等成分的調(diào)節(jié)作用有關。

3.3 艾蒿水提物對AA肉仔雞血清抗氧化指標的影響正常情況下，動物機體內(nèi)自由基和內(nèi)源性抗自由基活性物質(zhì)是不斷生成的，它們之間處于一種良好的動態(tài)平衡。T-AOC是衡量機體抗氧化能力的綜合指標，其含量的高低能夠反映自由基清除系統(tǒng)對外來刺激的代償能力和體內(nèi)自由基代謝狀況。SOD、CAT則是機體內(nèi)主要的清除自由基的抗氧化酶，它們在清除超氧自由基、過氧化物和過氧化氫及減少或阻止自由基形成方面發(fā)揮重要作用［9］。MDA過量則會引起細胞代謝失常，造成機體功能障礙，其含量的多少能夠反映出細胞受損傷的程度。試驗結(jié)果表明，與對照組相比，試驗前期各處理組MDA含量都顯著降低，其中1 000 mg/kg的添加量組SOD含量顯著增加。這與何湘蓉等［10］的研究結(jié)果一致。

有研究表明，艾蒿中的黃酮類化合物具有清除自由基的作用［11］。黃酮類化合物主要通過兩個機理起到抗氧化作用：①黃烷醇與金屬進行螯合反應，形成螯合物。②黃酮醇能作為自由基的接受體而阻礙自由基連鎖反應。SOD是清除氧離子鏈式反應中產(chǎn)生的下游酶，本試驗認為由于添加了艾蒿水提物，機體內(nèi)清除自由基、氧離子能力增強，使細胞受損程度降低，進而使血清中SOD含量增加，MDA含量減少。

4 結(jié)論

本試驗結(jié)果表明，在日糧中添加艾蒿水提物對提高肉仔雞免疫和抗氧化功能有較好的作用，這為艾蒿水提物在肉仔雞飼料中的合理添加提供了理論依據(jù)。

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Effect of Artemisia Argyi Extract on Immune and Antioxidative Function in Broilers

CHU Wei-bin，SHI Bin-lin*，YAN Sun-mei，ZHANG Peng-fei，ZHAO Fei，SUN Deng-sheng，ZHAO Qi-long，ZHANG Jing
（College of Animal Science，Inner Mongolia Agricultural University，Inner Mongolia Hohhot 010018，China）

This study was designed to investigate the effects of aqueous extract of Artemisia argyi on immune and antioxidative function in broilers.192 one-day-old broiler chickens were randomly divided into four treatments with four replicates of 8 chicks.These four diets were formulated by adding Artemisia argyi extract of 0，500，1 000 and 2 000 mg/kg to the basal diet.The experiment lasted 42 days，containing two periods with 21 days each.The results showed that compared with the control，the bursa of fabricius index in 1 000 mg/kg Artemisia argyi group increased significantly in the latter period（P＜0.05）；immunoglobulin M（IgM）in 500 mg/kg Artemisia argyi group was the highest，and significantly higher than that of control group in the earlier period（P＜0.05）.Immunoglobulin G（IgG）in 500 mg/kg Artemisia argyi group was significantly higher than that of control group in the latter period（P＜0.05）.In addition，compared with the control，the MDA of three Artemisia argyi group decreased significantly，while the SOD in 1000 mg/kg significantly increased in the early period（P＜0.05）.It was concluded that the aqueous extract of Artemisia argyi can promote the immune and antioxidative function in broilers.

Artemisia argyi extract；broiler；immune organ index；immune parameter；antioxidative index

S831.5

：A

：0258-7033（2015）19-0067-04

2015-04-15；

2015-06-17

楚維斌，男（1987-），河北保定人，在讀碩士生，研究方向為動物環(huán)境、營養(yǎng)與安全生產(chǎn)，E-mail：chuweibin521@163.com

*通訊作者：史彬林，教授，博士生導師，E-mail：shibinlin@aliyun. com