辛 穎，達(dá)拉胡

(內(nèi)蒙古民族大學(xué) 蒙醫(yī)藥學(xué)院，內(nèi)蒙古 通遼 028000)

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蒙藥玉簪花不同萃取部位抗炎活性研究

辛 穎，達(dá)拉胡

(內(nèi)蒙古民族大學(xué) 蒙醫(yī)藥學(xué)院，內(nèi)蒙古 通遼 028000)

目的：從蒙藥玉簪花的不同萃取部位篩選出活性部位。方法：采用二甲苯致小鼠耳廓腫脹實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀⒔遣娌四z致大鼠足跖腫脹實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ蛯?duì)蒙藥玉簪花不同萃取部位進(jìn)行抗炎活性考察。結(jié)果：玉簪花的乙酸乙酯萃取部位、正丁醇萃取部位可顯著減輕二甲苯所致的小鼠耳廓腫脹度(P<0.05，P<0.05)及角叉菜膠作用3、4h后引起的大鼠足腫脹度(P<0.01，P<0.05)。結(jié)論：蒙藥玉簪花乙酸乙酯萃取部位、正丁醇萃取部位有抑制急性炎癥的作用，可能是玉簪花抗炎的活性部位。

玉簪花；蒙藥；抗炎作用；耳廓腫脹；足跖腫脹

玉簪花是百合科玉簪屬植物玉簪Hostaplantaginea(Lam.)Aschers的干燥花，蒙藥名為邦占嘎爾布、查干邦占、哈斯-哈塔胡爾-其其格等[1]。在《中華本草》(蒙藥卷)中記載其性寒，味澀、苦，效柔、軟、稀，具有清熱、解毒、利咽喉、止咳等功效，主治肺熱、毒熱、咽喉腫痛和音啞等[2]。玉簪花作為蒙醫(yī)習(xí)用傳統(tǒng)藥材，在蒙醫(yī)中主要用其花治療急、慢性咽炎，特別是作為蒙藥玉簪清咽十五味丸/散的主要藥材之一，治療咽喉腫痛、氣喘、音啞、胸肋刺痛等。本課題組在前期實(shí)驗(yàn)中證實(shí)玉簪花的乙醇提取物具有明顯的抗炎及抑菌作用[3，4]，現(xiàn)進(jìn)一步對(duì)玉簪花的抗炎活性部位進(jìn)行篩選，旨在為玉簪花的物質(zhì)基礎(chǔ)及質(zhì)量控制研究等方面提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 藥材與試劑

玉簪花購自通遼市蒙藥股份有限公司；角叉菜膠(Sigma公司，批號(hào)127H1227)；阿司匹林(貴州信邦藥業(yè)有限公司，批號(hào)110114)；其他試劑均為分析純。

1.2 動(dòng)物

昆明種小鼠，雌雄兼用，體重18～24g；Wistar大鼠，雌雄兼用，體重180～200g，由吉林大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)中心提供(許可證號(hào)：SCXK-(2011-0004))。

1.3 儀器

電子調(diào)溫電熱套(天津市秦斯特儀器有限公司，98-1B型)；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(EYEL4，OSB-2100)；循環(huán)水式多用真空泵(河南鄭州長城科工貿(mào)有限公司，SHZ-Ⅲ)；電子天平(上海儀器有限公司，YP1201N)，精密電子天平(日本島津，AUW220D)；足趾容積測量儀(中西遠(yuǎn)大科技有限公司，HZ905-ZH-YLS-7B)。

2 方法

2.1 玉簪花不同溶劑萃取物制備

將玉簪花的干燥花切斷粉碎后過20目篩，倍量95%乙醇加熱回流提取3次，合并濾液，減壓回收溶劑，加適量水溶解后，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取至有機(jī)溶劑層顏色較淺，減壓回收溶劑，分別得到石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位的濃縮浸膏，低溫保存?zhèn)溆谩?/p>

2.2 玉簪花不同溶劑萃取物實(shí)驗(yàn)用劑量確定

根據(jù)前期急性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果，得出玉簪花石油醚部位的半數(shù)致死量(LD50)為3.95g·kg-1，換算成干燥藥材劑量為119.7g·kg-1；正丁醇部位的LD50為8.04g·kg-1，換算成干燥藥材劑量為120g·kg-1；乙酸乙酯部位的最大耐受量為3.5g·kg-1，換算成干燥藥材劑量為87.5g·kg-1。本實(shí)驗(yàn)使用的玉簪花三個(gè)萃取部位，在換算成干燥藥材量時(shí)均相等(12g·kg-1)的劑量下，研究其對(duì)急性炎癥動(dòng)物模型的影響。

2.3 二甲苯致小鼠耳廓腫脹實(shí)驗(yàn)[5]

取小鼠72只，雌雄各半，按體重隨機(jī)分為6組，即模型對(duì)照組、阿司匹林組、玉簪花石油醚萃取物組、乙酸乙酯萃取物組、正丁醇萃取物組和清喉利咽顆粒組，每組12只。連續(xù)灌胃給予不同藥物10天，末次給藥1h后，將二甲苯均勻涂抹于小鼠右側(cè)耳殼正反兩面(每只25μL)后脫頸椎處死，沿耳廓剪下兩耳，于同一部位用打孔器(8～9mm)打下耳片，電子天平稱重。以兩耳重量之差為腫脹度，按公式計(jì)算耳腫脹率及腫脹抑制率。腫脹率(%)=(腫脹耳重量—對(duì)照耳重量)/對(duì)照耳重量×100%；腫脹抑制率(%)=(對(duì)照組平均腫脹率—給藥組平均腫脹率)/對(duì)照組平均腫脹率×100%。

2.4 角叉菜膠致大鼠足跖腫脹實(shí)驗(yàn)[6]

取大鼠60只，雌雄各半，按體重隨機(jī)分為6組，即模型對(duì)照組、阿司匹林組、玉簪花石油醚萃取物組、乙酸乙酯萃取物組、正丁醇萃取物組和清喉利咽顆粒組，每組10只。各組連續(xù)灌胃給予不同藥物10天，末次給藥1h后，同時(shí)測量其正常右后足跖容積，于大鼠右后足跖掌心向踝關(guān)節(jié)方向進(jìn)針，每只皮下注射1%角叉菜膠0.1mL致炎。然后分別于0.5、1、2、3、4、5、6h測定其右后足跖容積，計(jì)算腫脹率并比較組間差異性。腫脹率(%)=(致炎后足跖容積—致炎前的足跖容積)/致炎前的足跖容積×100%。

2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

3 結(jié)果

3.1 二甲苯致小鼠耳廓腫脹實(shí)驗(yàn)

致炎30min后，各組小鼠右耳均可見高度紅腫。玉簪花的乙酸乙酯萃取部位和正丁醇萃取部位可顯著減輕二甲苯致炎小鼠的耳廓腫脹度(P<0.05，P<0.05)，石油醚萃取部位則作用不顯著(P>0.05)，提示乙酸乙酯萃取部位和正丁醇萃取部位有抑制急性炎癥的作用，但其抑制作用較阿司匹林弱(P<0.01)。結(jié)果見表1。

表1 玉簪花不同萃取部位對(duì)二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響

注：與模型對(duì)照組比較，*P<0.05，**P<0.01。

3.2 角叉菜膠致大鼠足跖腫脹實(shí)驗(yàn)

致炎1h后，各組大鼠右后足均可見紅腫，各組的腫脹度及抑制率結(jié)果見表2。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，乙酸乙酯萃取部位在造模后2、3、4h足跖腫脹率均顯著低于模型對(duì)照組(P<0.01，P<0.01，P<0.05)；正丁醇萃取部位在造模后3、4h足跖腫脹率極顯著低于模型對(duì)照組(P<0.01，P<0.05)；石油醚萃取部位則作用不顯著(P>0.05)，提示乙酸乙酯萃取部位、正丁醇萃取部位有抑制急性炎癥的作用，但抑制效果低于阿司匹林組(1、2、3、4、5h均表現(xiàn)出很好的抗炎效果，P<0.01)。

表2 玉簪花不同萃取部位對(duì)角叉菜膠所致大鼠足跖腫脹的影響 (±s)

注：與模型對(duì)照組比較，*P<0.05，**P<0.01。

4 討論

炎癥是機(jī)體組織對(duì)損傷因子引起局部損傷的防御反應(yīng)，在炎癥的早期，血管受到炎癥介質(zhì)的刺激而擴(kuò)張，導(dǎo)致血管內(nèi)皮間隙擴(kuò)大、血管壁通透性增加以及血漿內(nèi)液體滲出到組織間隙等，并隨著滲出的增加，造成組織腫脹。因此，炎性滲出和組織腫脹是炎癥早期的重要特征。

急性炎癥發(fā)病快、持續(xù)時(shí)間短，一般僅幾天到1個(gè)月，主要表現(xiàn)為滲出性病變；慢性炎癥持續(xù)時(shí)間較長，有時(shí)可達(dá)數(shù)月至數(shù)年，常伴有增生性病變。急性炎癥模型常以致炎劑二甲苯誘發(fā)小鼠耳廓腫脹和角叉菜膠致大鼠足跖腫脹等實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證藥物的抗炎作用?；瘜W(xué)致炎劑二甲苯可引起組胺激肽、纖維蛋白溶解酶等炎性介質(zhì)釋放，進(jìn)而引起局部毛細(xì)血管通透性增加及炎癥細(xì)胞浸潤，最終引發(fā)耳部急性滲出性炎性水腫[7]；具有刺激性的角叉菜膠注入大鼠足跖后，可使大鼠的足跖局部毛細(xì)血管充血、水腫，引發(fā)足跖體積增加，同時(shí)伴有紅、腫、熱、痛等癥狀[8]。

玉簪花具有清熱、解毒、利咽喉、止咳等功效，臨床上多用于治療急慢性咽炎、肺熱、毒熱、咽喉腫痛和音啞。本實(shí)驗(yàn)研究表明，玉簪花的乙酸乙酯萃取部位、正丁醇萃取部位可顯著減輕二甲苯致炎小鼠的耳廓腫脹度(P<0.05，P<0.05)和由角叉菜膠作用3、4h后引起的大鼠足跖腫脹度(P<0.01，P<0.05)，石油醚萃取部位則作用不顯著(P>0.05)。提示其乙酸乙酯部位和正丁醇部位有抑制急性炎癥的作用，為玉簪花抗炎活性部位。該研究為今后玉簪花植物中具有抗炎活性單體的研究開發(fā)奠定了理論和實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)，而其抗炎的機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

[1] 羅布桑.識(shí)藥學(xué)[M].呼和浩特：內(nèi)蒙古人民出版社，1998：61.

[2] 國家中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會(huì).中華本草(蒙藥卷)[M].上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2004：142.

[3] 辛穎，白玉花.蒙藥玉簪花乙醇提取物體外和體內(nèi)的抑菌活性研究[J].中成藥，2015，37(3)：659-662.

[4] 辛穎，紅艷.蒙藥玉簪花乙醇提取物的抗炎作用實(shí)驗(yàn)研究[J].內(nèi)蒙古民族大學(xué)學(xué)報(bào)：蒙醫(yī)藥版，2014，24(2)：27-31.

[5] 鄭仁禮，張曉春，陳敏.復(fù)方護(hù)肺顆粒抑菌、抗炎作用研究[J].中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)雜志，2015，32(2)：144-147.

[6] 潘利明，林勵(lì).玉葉金花水提物不同萃取部位的抗炎活性研究[J].廣東藥學(xué)院學(xué)報(bào)，2013，29(5)：530-532.

[7] 王秀玲.二甲苯毒理學(xué)研究進(jìn)展[J].國外醫(yī)學(xué)·衛(wèi)生學(xué)分冊(cè)，1997，24(2)：15-17.

[8] 周重楚，高洪波，劉威，等.國產(chǎn)角叉菜膠的致炎作用[J].中國藥理學(xué)通報(bào)，1988，4(4)：249-250.

(責(zé)任編輯：魏 曉)

Study on the Anti-inflammatory Activities of Different Extracted Portions from Mongolian Medicine Hosta plantaginea

Xin Ying，Dalahu

(The College of Mongolian Medicine and Pharmacy，Inner Mongolia University for the Nationalities，Tongliao 028000，China)

Objective:To investigate the anti-inflammatory portions extracted from Mongolian medicine Hosta plantaginea.Methods:The dimethybenzene-induced mouse ear edema model and the carrageenan-induced rat paw edema model were eatablished to evaluate the anti-inflammatory effect of different extracted portions from Mongolian medicine Hosta plantaginea.Results:The portions extracted with ethyl acetate and n-butanol significantly reduced both the dimethybenzene-induced ear swelling in mice and carrageenan-induced hind paw swelling in rats.Conclusion:The portions extracted with ethyl acetate and n-butanol show an inhibitory effect on acute inflammation.

HostaPlantaginea;Mongolian Medicine;Anti-inflammatory Activities;Ear Edema;Paw Edema

2015-07-10

辛穎(1980-)，女，內(nèi)蒙古民族大學(xué)副教授，研究方向?yàn)槊伤幓瘜W(xué)與藥理。

R285.5

A

1673-2197(2015)23-0005-02

10.11954/ytctyy.201523002