張 榮，董世芬，倪博然，王志清，倪 健，孫建寧

(1．北京中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院，北京 100102;2．北京中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，北京 100029）

白金膠囊對(duì)CUMS誘導(dǎo)的抑郁癥大鼠模型行為學(xué)及腦內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的影響

張 榮1，董世芬1，倪博然2，王志清1，倪 健1，孫建寧1

(1．北京中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院，北京 100102;2．北京中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，北京 100029）

目的觀察白金膠囊對(duì)慢性不可預(yù)知溫和應(yīng)激(CUMS）致抑郁癥大鼠模型行為學(xué)及腦內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的影響。方法采用慢性不可預(yù)知溫和應(yīng)激結(jié)合孤養(yǎng)的方法建立抑郁癥大鼠模型，造模7周后，采用白金膠囊(12．6 g/kg、4．2 g/kg、1．4 g/kg）和鹽酸氟西汀(3．5 mg/kg）連續(xù)灌胃4周進(jìn)行治療，給藥期間繼續(xù)實(shí)施應(yīng)激方案，共計(jì)11周，另設(shè)正常對(duì)照組，常規(guī)飼養(yǎng)。監(jiān)測(cè)糖水偏嗜度、以及動(dòng)物在曠場(chǎng)中的水平運(yùn)動(dòng)、垂直運(yùn)動(dòng)等行為學(xué)指標(biāo);實(shí)驗(yàn)終點(diǎn)，采用高效液相－電化學(xué)法測(cè)定大鼠腦皮層、海馬部位單胺類神經(jīng)遞質(zhì)(5－HT、DA、NE及其代謝產(chǎn)物）的水平。結(jié)果 與正常對(duì)照組比較，模型大鼠造模7周后，體重、糖水消耗百分比、曠場(chǎng)水平運(yùn)動(dòng)和垂直活動(dòng)明顯降低(P＜0．05，P＜0．01）;與模型組比較，白金膠囊連續(xù)給藥4周后，各劑量可顯著增加糖水消耗百分比，曠場(chǎng)水平運(yùn)動(dòng)距離和垂直運(yùn)動(dòng)次數(shù)(P＜0．05，P＜0．01），改善抑郁動(dòng)物行為學(xué);可升高抑郁模型腦皮層中5－HT、DA以及NE的含量(P＜0．05）。結(jié)論白金膠囊可改善CUMS致抑郁癥大鼠模型的行為學(xué)異常，作用機(jī)制可能與增加腦皮層中單胺類神經(jīng)遞質(zhì)含量有關(guān)。

白金膠囊;抑郁癥;慢性不可預(yù)知溫和應(yīng)激;神經(jīng)遞質(zhì)

隨著現(xiàn)代社會(huì)競(jìng)爭(zhēng)壓力的增加，抑郁癥發(fā)病率也呈逐年上升趨勢(shì)。世界衛(wèi)生組織(WHO）報(bào)道，2012年全球患有抑郁癥的人數(shù)達(dá)到3．5億。到2020年，抑郁癥將成為全球?qū)е職埣驳牡诙笠蛩兀?］，抑郁癥已經(jīng)成為危害世界公眾健康的高發(fā)疾病之一［2］。

單胺類遞質(zhì)假說(shuō)是迄今研究最多最深入的抑郁癥發(fā)病機(jī)制之一，該假說(shuō)認(rèn)為腦內(nèi)5－羥色胺(5－h(huán)ydroxytryptamine，5－HT）、多巴胺(dopamine，DA）、去甲腎上腺素(norepinephrine，NE）等神經(jīng)遞質(zhì)含量不足或功能低下可導(dǎo)致抑郁［3］。臨床抑郁癥治療多采用三環(huán)類(TCAs）、選擇性5－羥色胺再攝取抑制劑(SSRIs）、5－羥色胺和去甲腎上腺素再攝取雙重抑制劑(SNRIs）等，其抗抑郁機(jī)制以5－HT、NE和DA等單胺受體為靶標(biāo)，副作用較多［4］，如SNRIs類藥物可引發(fā)患者頭暈、惡心;四環(huán)類更易引發(fā)頭痛等缺點(diǎn)［5－6］。因此，研究開發(fā)副作用小，療效好的抗抑郁藥具有重要的意義。

白金膠囊是由白芍、合歡花、郁金等四味中藥組成，具有解郁安神的功效，臨床上主要用于治療抑郁癥等疾?。?］。本研究采用慢性不可預(yù)知溫和應(yīng)激(chronic unpredictable mild stress，CUMS）結(jié)合孤養(yǎng)的方法建立抑郁癥大鼠模型，給予白金膠囊和選擇性5－羥色胺再攝取抑制劑鹽酸氟西汀治療，并在治療過(guò)程中對(duì)大鼠行為學(xué)進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，治療結(jié)束后應(yīng)用高效液相－電化學(xué)法分析海馬、腦皮層中神經(jīng)單胺類物質(zhì)5－HT、NE、DA及其代謝產(chǎn)物的含量，以期闡明白金膠囊的抗抑郁作用機(jī)制。

1 材料和方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

SPF級(jí)SD大鼠，72只，雌雄各半，體重120～150 g，由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供【SCXK(京）2012～0001】，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證號(hào)【SYXK(京）2011～0024】，室溫為(23±2）℃，相對(duì)濕度為(65±5）%，實(shí)驗(yàn)前動(dòng)物適應(yīng)性飼養(yǎng)1周，自由攝取食水。

1.2 藥品與試劑

受試藥：白金膠囊，黃色粉末，由北京中醫(yī)藥大學(xué)中藥制劑系提供，臨床人用量為0．6 g/kg，大鼠受試劑量根據(jù)臨床人用量分別設(shè)為12．6 g/kg，4．2 g/ kg，1．4 g/kg，其中4．2 g/kg為臨床等效劑量;陽(yáng)性對(duì)照藥：鹽酸氟西汀分散片，PATHEON FRANCE有限公司產(chǎn)品，批號(hào)4086A，大鼠灌胃給藥劑量為3．5 mg/kg。上述藥物臨用時(shí)以水配成所需濃度的混懸液，均灌胃(i．g．）給藥。

5－羥色胺(5－h(huán)ydroxytryptamine，5－HT），批號(hào)# 030M12681V;5－羥吲哚乙酸(5－h(huán)ydroxy－indole－acetic acid，5－HIAA），批號(hào)#BCBL9722V;去甲腎上腺素(norepinephrine，NE），批號(hào) SLBF3808V;多巴胺(dopamine，DA），批號(hào)P500090;3，4－二羥苯乙酸(3，4－dihydroxyphenyl－aceticacid， DOPAC）， 批 號(hào)1451791V，高香草酸(homovanillic acid，HVA），批號(hào)306081;以上試劑為標(biāo)品，僅供含量測(cè)定用;均購(gòu)自SIGMA公司。甲醇為色譜純 (ThermoFisher Scientific，USA），其他試劑為分析純。

1.3 主要儀器

Alliance 2695高效液相色譜儀，ECD2465電化學(xué)檢測(cè)器，玻碳工作電極和銀/氯化銀(Ag/AgCl）參比電極，JY88－IIN超聲細(xì)胞粉碎機(jī)。色譜柱為Atlantisd C18(3 μm，2．1 mm×150 mm）。循環(huán)水式多用真空泵，Heraeus Fresco 21高速冷凍離心機(jī)，PHS－3B精密PH計(jì)，JA1103N分析天平，自制敞箱(80cm×80cm×40cm），小動(dòng)物行為分析系統(tǒng)(Ethovision XT 9）。

1.4 動(dòng)物分組及給藥

大鼠置于自然晝夜節(jié)律光照條件下，適應(yīng)性飼養(yǎng)1周，6只/籠。1周后根據(jù)體重和曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果隨機(jī)分為正常對(duì)照組和應(yīng)激模型組，正常對(duì)照組大鼠6只/籠，模型組大鼠均單籠飼養(yǎng)。模型組大鼠造模7周后，按體重和曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果隨機(jī)分為應(yīng)激模型組，模型+鹽酸氟西汀組，模型+白金膠囊高、中、低劑量組，動(dòng)物仍保持單籠飼養(yǎng)，正常對(duì)照組大鼠飼養(yǎng)方式不變。

造模第8周開始，進(jìn)行灌胃給藥，正常對(duì)照組和應(yīng)激模型組每日灌胃蒸餾水，模型+鹽酸氟西汀組每日灌胃鹽酸氟西汀3．5 mg/kg，模型+白金膠囊高、中、低劑量組每日灌胃白金膠囊溶液(12．6 g/ kg、4．2 g/kg、1．4 g/kg），給藥體積10 mL/kg，連續(xù)給藥4周。

1.5 動(dòng)物模型的建立

根據(jù) Katz、Willner［8－9］的應(yīng)激方法稍作改動(dòng)。應(yīng)激方法如下：禁食(24 h）、禁水(24 h）、夾尾(1 min）、熱應(yīng)激(45℃，5 min）、潮濕墊料(24 h）、晝夜顛倒(24 h）、冰水游泳(4℃，5 min）、常溫游泳(23℃，10 min）。除對(duì)照組外，應(yīng)激組大鼠每天被迫接受應(yīng)激，每日1種應(yīng)激，連續(xù)處理11周。于實(shí)驗(yàn)前隨機(jī)抽取每日刺激方式，避免同一種應(yīng)激方式連續(xù)使用。

1.6 行為學(xué)檢測(cè)

1．6．1 體重測(cè)定

分別在大鼠分組前、造模3周、7周以及11周對(duì)大鼠進(jìn)行體重測(cè)定。

1．6．2 曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)

將動(dòng)物置于高40 cm，邊長(zhǎng)80 cm，四周及底部均為黑色的封閉方形曠場(chǎng)中心位置，適應(yīng)5 min后，用攝像系統(tǒng)觀察并記錄動(dòng)物在曠場(chǎng)內(nèi)5 min的行為表現(xiàn)，包括水平活動(dòng)距離，垂直運(yùn)動(dòng)次數(shù)，其中水平活動(dòng)距離可以通過(guò)行為學(xué)分析系統(tǒng)獲得數(shù)據(jù)。分別于大鼠分組前、造模3周、7周以及11周對(duì)大鼠進(jìn)行水平運(yùn)動(dòng)和垂直運(yùn)動(dòng)的測(cè)定。

1．6．3 糖水消耗實(shí)驗(yàn)

開始造模前1周對(duì)大鼠進(jìn)行1%糖水偏好訓(xùn)練。于造模開始前進(jìn)行第1次糖水偏好度測(cè)試。糖水偏好訓(xùn)練和測(cè)試均于大鼠禁水22 h后，測(cè)定2 h內(nèi)飲用量(中途1 h時(shí)交換瓶子位置）。計(jì)算糖水偏嗜度，計(jì)算公式如下：

糖水偏嗜度(%）=糖水消耗/總液體消耗×100%。

1.7 腦組織單胺類遞質(zhì)的檢測(cè)

各組大鼠末次給藥30 min后處死，冰上迅速剝離大腦皮層和海馬部位，稱重后加入500 μL 0．1 mol/L HClO4(含0．3 mmol/L Na2EDTA，0．5 mmol無(wú)水亞硫酸鈉，4℃預(yù)冷），超聲勻漿，10000 r/min高速離心10 min，取上清200 μL，10000 r/min再次離心10 min，取20 μL進(jìn)樣檢測(cè)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)及其主要代謝產(chǎn)物的濃度，包括 5－HT，5－HIAA，DA，HVA，DOPAC，NE。待測(cè)樣品于－80℃保存。

1.8統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

所有結(jié)果用以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x－±s）表示。統(tǒng)計(jì)分析軟件為 SPSS 17．0，采用單因素方差分析(one－way ANOVA）統(tǒng)計(jì)，用LSD檢驗(yàn)比較兩組間的差異。

2 結(jié)果

2.1 CUMS實(shí)施0周、3周以及7周的行為學(xué)研究結(jié)果

2．1．1 CUMS實(shí)施0周、3周以及7周大鼠體重變化結(jié)果

與正常對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)第3周，模型組大鼠體重?zé)o顯著差異;實(shí)驗(yàn)第7周時(shí)，模型大鼠的體重顯著降低(P＜0．01），結(jié)果見(jiàn)表1。

2．1．2 CUMS實(shí)施0周、3周以及7周大鼠糖水偏嗜度變化結(jié)果

與正常對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)第3周模型組大鼠糖水偏嗜度無(wú)顯著差異，造模7周時(shí)，模型組大鼠糖水偏嗜度明顯降低(P＜0．01），提示CUMS實(shí)施7周后已引起動(dòng)物快感缺失的癥狀，結(jié)果見(jiàn)表2。

表1 CUMS實(shí)施0周、3周以及7周大鼠體重變化結(jié)果Tab．1 The body weight changes of rats with CUMS induction at the week 0，3，7

2．1．3 CUMS實(shí)施0周、3周以及7周大鼠曠場(chǎng)水平運(yùn)動(dòng)和垂直運(yùn)動(dòng)變化結(jié)果

與正常對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)第7周時(shí)，模型組大鼠水平運(yùn)動(dòng)和垂直運(yùn)動(dòng)顯著降低(P＜0．01），提示CUMS復(fù)制抑郁大鼠模型成功，已引起動(dòng)物的抑郁癥狀如自主活動(dòng)減少、對(duì)外界新鮮環(huán)境探知欲望降低等，結(jié)果見(jiàn)表3。

2.2 白金膠囊干預(yù)對(duì)CUMS致抑郁癥大鼠模型行為學(xué)的影響

2．2．1 白金膠囊干預(yù)對(duì)CUMS致抑郁癥大鼠模型體重、糖水偏嗜度的影響

研究報(bào)道，慢性應(yīng)激造模成功后，即使3周不進(jìn)行應(yīng)激刺激，動(dòng)物仍保持行為學(xué)異常［10］。為避免動(dòng)物在治療期間自行恢復(fù)，對(duì)模型動(dòng)物進(jìn)行為期4周的治療過(guò)程中，除正常對(duì)照組外，其余各組仍然進(jìn)行應(yīng)激刺激。結(jié)果顯示，與正常對(duì)照組相比，造模11周后，模型組大鼠的體重、糖水百分比持續(xù)降低(P＜0．05，P＜0．01）;與模型組相比，白金膠囊給藥4周后，12．6 g/kg、4．2 g/kg以及1．4 g/kg組可顯著升高抑郁模型大鼠糖水偏嗜度(P＜0．05，P＜0．01），但對(duì)大鼠體重?zé)o顯著影響，結(jié)果見(jiàn)表4。

2．2．2 白金膠囊干預(yù)對(duì)CUMS致抑郁癥大鼠模型曠場(chǎng)水平運(yùn)動(dòng)和垂直運(yùn)動(dòng)的影響

結(jié)果顯示，與正常對(duì)照組相比，造模11周后，模型組大鼠水平運(yùn)動(dòng)距離、垂直運(yùn)動(dòng)次數(shù)仍表現(xiàn)為降低(P＜0．01），提示該模型持續(xù)保持抑郁狀態(tài)［8］。與模型組相比，白金膠囊給藥4周后，12．6 g/kg、4．2 g/kg以及1．4 g/kg組可改善抑郁模型大鼠水平運(yùn)動(dòng)距離縮短、垂直運(yùn)動(dòng)次數(shù)減少行為學(xué)指標(biāo)，有顯著性差異(P＜0．01），提示白金膠囊具有抗抑郁作用，結(jié)果見(jiàn)表5。

表2 CUMS實(shí)施0周、3周以及7周大鼠糖水偏嗜度變化結(jié)果Tab．2 The sucrose percentage changes of rats with CUMS induction at the week 0，3，7

表3 CUMS實(shí)施0周、3周以及7周大鼠曠場(chǎng)水平運(yùn)動(dòng)和垂直運(yùn)動(dòng)變化結(jié)果Tab．3 The changes of horizontal motion and vertical motion of rats with CUMS induction at the week 0，3，7

表4 白金膠囊干預(yù)對(duì)CUMS致抑郁癥大鼠模型體重、糖水偏嗜度的影響Tab．4 The effects of baijin capsule on weight，sucrose percentage indepression rat model induced by CUMS

表5 白金膠囊干預(yù)對(duì)CUMS致抑郁癥大鼠模型曠場(chǎng)水平運(yùn)動(dòng)和垂直運(yùn)動(dòng)的影響Tab．5 The effects of Baijin capsule on horizontal motion，vertical movement in depression rat model induced by CUMS

2.3 白金膠囊干預(yù)對(duì)CUMS致抑郁癥大鼠模型腦內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的影響

2．3．1 白金膠囊干預(yù)對(duì)CUMS致抑郁癥大鼠模型腦皮層單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的影響

與正常對(duì)照組相比，模型組大鼠腦皮層5－HT、 DA、NE的含量明顯降低(P＜0．05）;與模型組相比，白金膠囊4．2 g/kg劑量組可顯著升高抑郁大鼠腦皮層中5－HT、DA以及NE的含量(P＜0．05，P＜0．01），1．4 g/kg劑量組可顯著升高抑郁大鼠腦皮層中5－HT和DA的含量(P＜0．05），結(jié)果見(jiàn)表6。

表6 白金膠囊干預(yù)對(duì)CUMS致抑郁癥大鼠模型腦皮層單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的影響Tab．6 The effects of baijin capsule on monoamine neurotransmitters concentration in cerebral cortex in depression rat model induced by CUMS

2．3．2 白金膠囊干預(yù)對(duì)CUMS致抑郁癥大鼠模型海馬單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的影響

與正常對(duì)照組相比，模型組大鼠海馬中5－HT和5－HIAA的含量明顯降低(P＜0．05，P＜0．01）;與模型組相比，白金膠囊4．2 g/kg劑量組可升高抑郁大鼠海馬中5－HIAA的含量(P＜0．05），結(jié)果見(jiàn)表7。

表7 白金膠囊干預(yù)對(duì)CUMS致抑郁癥大鼠模型海馬單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的影響Tab．7 The effects of baijin Capsule on monoamine neurotransmitters concentration in hippocampus in depression rat model induced by CUMS+

3 討論

抑郁癥是一種以心境低落、興趣缺失為主要特征的情感障礙疾病，具有患病率高、復(fù)發(fā)率高、致殘率高和致死率高等特點(diǎn)，被稱為“第一心理殺手”。因此，國(guó)內(nèi)外學(xué)者們對(duì)抑郁癥的研究越來(lái)越受到重視，準(zhǔn)確可靠的疾病動(dòng)物模型對(duì)藥物的治療效果的評(píng)價(jià)有重要的意義，而且有益于揭示抑郁癥的發(fā)病機(jī)制。

CUMS模型是由Willner提出，模型中應(yīng)激源不可預(yù)知性和多樣性是造模成功的關(guān)鍵，并且應(yīng)激因子強(qiáng)度較低，與實(shí)際生活中長(zhǎng)期遭受低水平應(yīng)激導(dǎo)致的抑郁癥病理生理機(jī)制相似。此外，此模型具有較高的有效性，可持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)，并且抗抑郁藥物在該模型的治療時(shí)程與臨床抑郁患者的治療時(shí)程相似(通常為2～5周）［11］。因此該模型被廣泛用于抑郁癥病理機(jī)制以及抗抑郁藥物的研究。

大鼠對(duì)糖水消耗量反映了對(duì)獎(jiǎng)賞系統(tǒng)的反應(yīng)性，本實(shí)驗(yàn)造模7周后，模型大鼠糖水偏嗜度明顯降低，表現(xiàn)出了臨床抑郁癥患者的核心癥狀—快感缺失［12－14］。曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)常用來(lái)評(píng)價(jià)應(yīng)激的有效性，其中水平運(yùn)動(dòng)反映了模型的自主活動(dòng)性，垂直運(yùn)動(dòng)反映了模型對(duì)外界新鮮環(huán)境的探知欲望，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，造模7周后，與正常對(duì)照組比較，模型大鼠水平運(yùn)動(dòng)距離以及垂直運(yùn)動(dòng)次數(shù)顯著降低，表明抑郁動(dòng)物模型自主活動(dòng)減少，探知欲望降低，說(shuō)明慢性不可預(yù)知應(yīng)激模型可成功復(fù)制抑郁癥。研究表明大多數(shù)抗抑郁藥物可逆轉(zhuǎn)上述行為學(xué)，而無(wú)抗抑郁作用的藥物對(duì)該行為學(xué)無(wú)效［8］，模型大鼠經(jīng)過(guò)4周治療顯示，白金膠囊可逆轉(zhuǎn)上述模型大鼠行為學(xué)改變，提示白金膠囊具有抗抑郁作用。

海馬和皮層是調(diào)節(jié)情緒的重要腦區(qū)，也是參與下丘腦－垂體－腎上腺(HPA）軸監(jiān)管系統(tǒng)和應(yīng)激反射的大腦結(jié)構(gòu)［15］。應(yīng)激導(dǎo)致抑郁大鼠皮層和海馬5－HT、DA等多種神經(jīng)遞質(zhì)以及受體失調(diào)［16］，還能引起結(jié)構(gòu)和功能的改變。研究表明，慢性應(yīng)激可導(dǎo)致大鼠海馬錐體細(xì)胞樹突總長(zhǎng)度縮短和樹突分支減少，伴隨著突觸神經(jīng)元可塑性損傷和認(rèn)知功能障礙;而前額皮質(zhì)突觸形態(tài)改變比海馬更明顯，顯然，慢性應(yīng)激也會(huì)引起前額皮質(zhì)錐體細(xì)胞樹突縮短，前額皮質(zhì)突觸蛋白基因上調(diào)［17］。抑郁癥患者海馬體積縮小、神經(jīng)元損傷，皮層厚度、灰質(zhì)密度減少。總之，應(yīng)激引起海馬和皮質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能變化是抑郁癥發(fā)生的重要因素。

5－HT是腦內(nèi)重要的單胺類神經(jīng)遞質(zhì)，主要參與5－HT主要參與情緒、體溫、攝食、認(rèn)知、睡眠等功能的調(diào)控作用［18－20］。5－HT耗竭能使抑郁病情加劇，且5－HT含量降低程度與病情的嚴(yán)重程度成正比。大量臨床研究發(fā)現(xiàn)，抑郁患者腦內(nèi)以及慢性應(yīng)激動(dòng)物模型海馬、前額葉皮質(zhì)中腺苷酸環(huán)化酶(AC）活性降低，cAMP和PKA水平降低，從而導(dǎo)致cAMP信號(hào)通路下調(diào);大多數(shù)一線抗抑郁藥物如氟西汀、帕羅西汀等通過(guò)作用于5－HT1A受體，減少突觸前膜5－HT的釋放，增加突觸后膜5－HT受體敏感性，升高突觸間隙5－HT水平，上調(diào)cAMP信號(hào)通路，達(dá)到抗抑郁作用，由于突觸前膜5－HT1A自受體對(duì)5－HT系統(tǒng)負(fù)反饋調(diào)節(jié)，從而造成起效時(shí)間延遲［21］，致使在2～4周后才發(fā)揮抗抑郁作用，這不僅導(dǎo)致抑郁病情不能得到及時(shí)的改善，長(zhǎng)期服用這些西藥還會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重的副作用，甚至增加患者自殺的幾率［22］。DA既是兒茶酚胺類遞質(zhì)，又是獎(jiǎng)賞系統(tǒng)中最關(guān)鍵的遞質(zhì)，主要參與情感、運(yùn)動(dòng)、攝食和體重多個(gè)環(huán)節(jié)的調(diào)控［23］。有研究表明，應(yīng)激可導(dǎo)致動(dòng)物伏隔核、海馬以及前額葉DA、DOPAC、HVA含量下降以及多巴胺D2受體、多巴胺D3受體表達(dá)下調(diào);還能增加動(dòng)物對(duì)精神類藥物的依賴性。中藥作用靶點(diǎn)多，不僅可以增加5－HT、DA系統(tǒng)功能達(dá)到抗抑郁作用，還能通過(guò)調(diào)控HPA軸、腦源性神經(jīng)生長(zhǎng)因子進(jìn)行抗抑郁，副作用小，成為研究的重點(diǎn)。

本研究中，遭受應(yīng)激的大鼠腦皮層中5－HT、DA、NE以及海馬組織中5－HT、5－HIAA的含量顯著降低，而經(jīng)過(guò)4周治療后，白金膠囊可顯著升高大鼠皮層中5－HT、DA以及NE的含量。研究表明，5－HT可影響DA神經(jīng)元的活性，增加DA的含量，并且DA以及受體分布密集的腦區(qū)也發(fā)現(xiàn)有大量5－HT受體存在［24］，因此推測(cè)白金膠囊抗抑郁作用機(jī)制可能與影響中樞5－HT能神經(jīng)系統(tǒng)作用，增加皮層單胺類神經(jīng)遞質(zhì)5－HT、DA以及NE的含量有關(guān)。

［1］Slattery DA，Markou A，Cryan JF．Evalution of reward processes in an animal model of depression［J］．Psychopharmacology (Berl），2007，190(4）：555－568．

［2］Sartorius N．The economic and social burden of depression［J］．J Clin Psychiatry，2001，62(15）：8－11．

［3］Holmes A，Heilig M，Rupniak NM，et al．Neuropeptide systems as novel therapeutic targets for depression and anxiety disorders［J］．Trends PharmacolSci，2003，24(11）：580－588．

［4］李濤．抗抑郁藥物的作用機(jī)理與研究進(jìn)展［J］．齊魯藥事，2010，29(8）：481－483．

［5］Anderson HD，Pace WD，Libby AM，et al．Rates of 5common antidepressant side effects among new adult and adolescent cases of depression：a retrospective US claims study［J］．ClinTher，2012，34(1）：113－123．

［6］Mark TL，Joish VN，Hay JW，et al．Antidepressant use in geriatric populations：the burden of side effects and interactions and their impacton adherence and costs［J］．Am J Geriatr Psychiatry，2011，19(3）：211－221．

［7］張慧，付京，陳楊，等．正交試驗(yàn)法優(yōu)化白金膠囊中白芍的提取工藝［J］．中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志，2014，21(7）：64－66．

［8］Katz RJ，Roth KA，Carroll BJ．Acute and chronic stress effects on open field activity in the rat：implications for a model of depression［J］．NeurosciBiobehav Rev，1981，5(2）：247－251．

［9］Willner P，Towell A，Sampson D，et al．Reduction of sucrose preference by chronic unpredictable mild stress， and its restoration by a tricyclic antidepressant［J］．Psychopharmacology (Berl），1987，93(3）：358－364．

［10］許晶，李曉秋．慢性應(yīng)激抑郁模型的建立及其評(píng)價(jià)［J］．Chinese Journal of Behavioral Medical Science，2003，12(1）： 14－17．

［11］Yan HC，Cao X，Das M，et al．Behavioral animal models of depression［J］．Neurosci Bull，2010，26(4）：327－337．

［12］Zhou J，Li L，Tang S，et al．Effects of serotonin depletion on the hippocampal GR/MR and BDNF expression during the stress adaptation［J］．Behav Brain Res，2008，195(1）：129－138．

［13］Henningsen K，Andreasen JT，Bouzinova EV，et al．Cognitive deficits in the rat chronic mild stress model for depression： relation to anhedonic－like responses［J］．Behav Brain Res，2009，198(1）：136－141．

［14］Sun JD，Liu Y，Yuan YH，et al．Gap junction dysfunction in the prefrontal cortex induces depressive－like behaviors in rats［J］．Neuropsychopharmacology，2012，37(5）：1305－1320．

［15］Bremner JD．Traumatic stress：effects on the brain［J］．Dialogues ClinNeurosci，2006，8(4）：445－461．

［16］Arnsten AF．Stress signalling pathways that impair prefrontal cortex structure and function［J］．Nat Rev Neurosci，2009，10 (6）：410－422．

［17］Müller HK，Wegener G，Popoli M，et al．Differential expression of synaptic proteins after chronic restraint stress in rat prefrontal cortex and hippocampus［J］．Brain Res，2011，1385：26－37．

［18］Nichols DE，Nichols CD．Serotonin receptors［J］．Chem Rev，2008，108(5）：1614－1641．

［19］Berger M，Gray JA，Roth BL．The expanded biology of serotonin［J］．Annu Rev Med，2009，60：355－366．

［20］FeijóFde M，Bertoluci MC，Reis C．Serotonin and hypothalamic control of hunger：a review［J］．Rev Assoc Med Bras，2011，57 (1）：74－77．

［21］Qin JJ，Chen HX，Zhao N，et al．The role of activation of the 5－HT1Areceptor and adenylatecyclase in the antidepressant－like effect of YL－0919，a dual 5－HT1Aagonist and selective serotonin reuptake inhibitor［J］．NeurosciLett，2014，582：104－108．

［22］Coupland C，Dhiman P，Morriss R，et al．Antidepressant use and risk of adverse outcomes in older people：population based cohort study［J］．BMJ，2011，343：d4551．

［23］Yen HH，Roseberry AG．Decreased consumption of rewarding sucrose solutions after injection of melanocortins into the ventral tegmental area of rats［J］．Psychopharmacology(Berl），2015，232(1）：285－294．

［24］Lanzenberger R，Hahn A，Windischberger C，et al．Serotonin－1A receptorbinding and Reward－dependentActivation are associated within the Human Dorsal Raphe Nucleus as revealed by PET－fMRI［J］．Neuroimage，2009，47：176．

The pharmacodynamic research of baijin capsule on depression in chronic unpredictable mild stress rats

ZHANG Rong1，DONG Shi－fen1，NI Bo－ran2，WANG Zhi－qing1，NI Jian1，SUN Jian－ning1
(1．School of Chinese MateriaMedica，Beijing University of Chinese Medicine，Beijing 100102，China; 2．School of Basic Medical Sciences，Beijing University of Chinese Medicine，Beijing 100029，China）

Objective To evaluate the effects of baijin capsule on behavioral changes and monoamine neurotransmitters concentration in chronic unpredictable mild stress(CUMS）depression rat model．Methods The depression rat model was induced by11－week chronic unpredictable mild stress combining with solitary．After the model were established，rats were given the decoction of baijin capsule(12．6 g/kg，4．2 g/kg，1．4 g/kg）or fluoxetine hydrochloride(3．5 mg/kg）by intragastricfor 4 weeks．During the experiment period，sucrose consumption and open－field experiment were conducted to monitor the behavior of rats，such as sucrose consumption percentage，horizontal motion，and vertical motion．At the end of the experiment，the levels of the monoamine neurotransmitters in the cerebral cortex and hippocampus were analyzed by method of high performance liquid chromatography－electrochemistry．Results Comparedwith the normal group，the weight，horizontal displacement distance，vertical movement times，and sucrose consumption percentage of rats in model group decreased significantly after stimulated with CUMS and solitary for 7 weeks(P＜0．05，P＜0．01）．Compared with model group，consecutively administrated for 4 weeks，horizontal displacement distance，vertical movement times，and the percentage in sugar water consumption significantly increased with the treatment of baijin capsule (P＜0．05，P＜0．01）．Meanwhile，the content of norepinephrine(NE），dopamine(DA），and 5－h(huán)ydroxytryptamine(5－HT）in the cortex were significantly increased in rats of the baijin capsule(P＜0．05）．Conclusions The results indicated that baijin capsule improved the behavioral disturbances in depression rat model，which were related to enhancement of the concentration of monoamine neurotransmitters in the cortex．

Baijin capsule;Depression;Chronic unpredictable mild stress;Neurotransmitter

R－332

A

1671－7856(2015）07－0046－07

10．3969．j．issn．1671．7856．2015．007．010

國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(81173563）;國(guó)家“重大新藥創(chuàng)制”科技重大專項(xiàng)(2012ZX09103201－026）;北京中醫(yī)藥大學(xué)在讀研究生資助項(xiàng)目(2015－JYB－XS084）。

張榮(1990－），女，碩士生，研究方向：中藥神經(jīng)精神藥理研究。

孫建寧(1952－），女，教授，博士生導(dǎo)師，研究方向：中藥防治重大疾病創(chuàng)新藥物研究，E－mail：jn_sun@sina．com。

2015－07－02