趙林波　趙永娜

【摘要】藥物依賴(lài)形成機(jī)制復(fù)雜，涉及多腦區(qū)、多受體信號(hào)通路的共同調(diào)節(jié)。G蛋白信號(hào)調(diào)節(jié)因子4（RGS4）可通過(guò)作用于多巴胺、阿片、代謝型谷氨酸等受體系統(tǒng)參與藥物依賴(lài)形成的調(diào)節(jié)。筆者以RGS4為靶點(diǎn)，通過(guò)對(duì)多巴胺、阿片、代謝型谷氨酸受體系統(tǒng)的影響闡述RGS4在藥物依賴(lài)相關(guān)受體信號(hào)通路中的調(diào)節(jié)作用。

【關(guān)鍵詞】G蛋白偶聯(lián)受體調(diào)控因子4；藥物依賴(lài)；多巴胺受體；阿片受體；代謝型谷氨酸受體

【中圖分類(lèi)號(hào)】R74，R963【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A【文章編號(hào)】1007-8517（2015）08-0026-02

藥物依賴(lài)（Drug dependence）又稱(chēng)藥物成癮，是一種以強(qiáng)迫性覓藥、無(wú)限制用藥、中斷用藥后出現(xiàn)戒斷癥狀為典型特征的慢性復(fù)發(fā)性腦病[1]。其發(fā)生發(fā)展機(jī)理十分復(fù)雜，涉及不同藥物及腦內(nèi)多個(gè)腦區(qū)、多條神經(jīng)環(huán)路、多受體信號(hào)分子的共同調(diào)節(jié)，通過(guò)改變神經(jīng)遞質(zhì)的數(shù)量，受體數(shù)量、活性及下游細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)因子活性或轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑等導(dǎo)致藥物依賴(lài)形成[2-4]。藥物依賴(lài)主要與腦內(nèi)三個(gè)系統(tǒng)密切相關(guān)：（1）中腦-邊緣多巴胺系統(tǒng)（Mesolimbic dopamine system， MLDS）[5]；（2）阿片受體系統(tǒng)[6]；（3）谷氨酸遞質(zhì)受體系統(tǒng)[7]。盡管不同成癮藥物有不同藥理學(xué)機(jī)理，但是無(wú)論急性還是慢性暴露于成癮藥物后都產(chǎn)生相似的作用，即藥物獎(jiǎng)賞和戒斷后的負(fù)性情感效應(yīng)[1]。G蛋白信號(hào)調(diào)節(jié)因子4（Regulator of G-protein signaling 4，RGS4）是G蛋白偶聯(lián)受體（G-protein-coupled receptor，GPCR）的負(fù)性調(diào)節(jié)因子，可通過(guò)加速G蛋白水解失活而“關(guān)閉”相關(guān)信號(hào)因子的傳導(dǎo)[8]，在藥物依賴(lài)形成中扮演了重要角色。

1RGS4的結(jié)構(gòu)、功能及分布

RGS是一組分子大小不同，具有多種功能的蛋白質(zhì)大家族，它們都有一個(gè)保守的約由120個(gè)氨基酸組成且具有GTPase激活蛋白（GTPase-activating proteins，GAPs）活性的RGS結(jié)構(gòu)域，主要作用于Gαi和Gαq亞家族GPCR介導(dǎo)的信號(hào)通路，可將GTP水解速度提高100～1000倍，縮短激活的GTP-Gai（Gaq）的半衰期，從而加速G蛋白信號(hào)通路的“關(guān)閉”。所以，RGS是GPCR重要的負(fù)性調(diào)節(jié)因子。RGS4是RGS蛋白大家族中含量較多的一員，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，僅含一個(gè)RGS結(jié)構(gòu)域，沒(méi)有發(fā)揮調(diào)控功能的結(jié)構(gòu)域。RGS4能削弱與Gαi和Gαq亞基偶聯(lián)的受體信號(hào)因子作用的持續(xù)時(shí)間及強(qiáng)度。RGS4可與GPCR、Gαq、PLCβ1形成穩(wěn)定復(fù)合物，從而阻斷PLC系統(tǒng)介導(dǎo)的磷脂酰肌醇/Ca2+信號(hào)；另外，RGS4還與Gβγ有弱的相互作用，激活其他離子通道而發(fā)揮效用[8-9]。

RGS4在人腦或者大、小鼠腦中均有較高的表達(dá)水平且表達(dá)區(qū)域分布廣泛，主要在額葉皮質(zhì)、杏仁核、藍(lán)斑、紋狀體、海馬等腦區(qū)含量豐富[10-11]。研究發(fā)現(xiàn)，RGS4在精神分裂癥[12]、帕金森病[13]等精神疾病的發(fā)生發(fā)展中起了重要作用。另外，RGS4可參與可卡因、嗎啡、苯丙胺等成癮性藥物急慢性給藥的調(diào)節(jié)[14-15]，作為GPCR的負(fù)性調(diào)節(jié)因子，RGS4可通過(guò)與受體、效應(yīng)器酶、支架蛋白和其它信號(hào)分子共同形成復(fù)雜的信號(hào)分子轉(zhuǎn)導(dǎo)復(fù)合物，影響其他信號(hào)分子的細(xì)胞內(nèi)定位、活性以及穩(wěn)定性而參與藥物依賴(lài)形成[16-17]。

2RGS4在藥物依賴(lài)信號(hào)通路中的調(diào)節(jié)

2.1RGS4在多巴胺受體信號(hào)通路中的調(diào)節(jié)作用多巴胺系統(tǒng)是公認(rèn)的參與藥物依賴(lài)形成的經(jīng)典的神經(jīng)遞質(zhì)受體系統(tǒng)，大多數(shù)成癮藥物主要作用于多巴胺（Dopamine， DA）受體使DA遞質(zhì)釋放增加，DA是動(dòng)機(jī)活動(dòng)和產(chǎn)生欣快感的重要神經(jīng)遞質(zhì)，是藥物依賴(lài)中精神依賴(lài)和強(qiáng)化效應(yīng)形成的重要因素[5]。多巴胺受體（Dopamine receptor， DAR）屬于G蛋白偶聯(lián)受體，RGS4可通過(guò)與DAR不同亞型間的相互作用而參與藥物依賴(lài)的調(diào)節(jié)。已有研究發(fā)現(xiàn)，精神興奮藥的使用可不同程度調(diào)節(jié)RGS4基因的表達(dá)，這可能是通過(guò)D1R和D2R受體介導(dǎo)的，D1受體激活可降低RGS4表達(dá)，而D2R激活則可增加RGS4的表達(dá)。RGS4mRNA在紋狀體表達(dá)豐富，與D1和D2受體存在共表達(dá)，在不同時(shí)間點(diǎn)使用D1R拮抗劑和D2R激動(dòng)劑后，RGS4mRNA表達(dá)水平的改變與DAR被占據(jù)可同時(shí)檢測(cè)到，RGS4mRNA出現(xiàn)延遲性的僅持續(xù)短時(shí)間的表達(dá)上調(diào)，而使用D2R拮抗劑后發(fā)現(xiàn)RGS4mRNA表達(dá)下調(diào)[18-19]。成癮性藥物可影響大腦RGS4的表達(dá)，Schwendt[14]等發(fā)現(xiàn)，慢性間斷性或持續(xù)性給予可卡因后停藥2～3周可導(dǎo)致大鼠前額葉皮質(zhì)或背側(cè)紋狀體RGS4mRNA減少，可卡因?qū)GS4的精細(xì)調(diào)節(jié)可能是由D1R和D2R介導(dǎo)的，這種調(diào)節(jié)也是大鼠可卡因覓藥行為戒斷和復(fù)發(fā)的基礎(chǔ)。另外，急性給予大鼠苯丙胺后也檢測(cè)到了腦內(nèi)RGS4表達(dá)下調(diào)，且苯丙胺能增強(qiáng)D1R拮抗劑引起的RGS4mRNA的增加和D2R拮抗劑引起的RGS4mRNA的減少，D1R和D2R對(duì)RGS4在紋狀體的表達(dá)有相反的影響，在給予低劑量苯丙胺時(shí)，D1R介導(dǎo)的RGS4mRNA表達(dá)明顯下調(diào)，而給予高劑量時(shí)，總體效應(yīng)可能被D2R介導(dǎo)的RGS4mRNA表達(dá)上調(diào)所平衡[20]。上述觀點(diǎn)均證實(shí)，成癮藥物可能是通過(guò)作用于DAR來(lái)精細(xì)調(diào)控RGS4表達(dá)，而RGS4也可對(duì)D1R、D2R信號(hào)級(jí)聯(lián)反應(yīng)進(jìn)行微調(diào)。

2.2RGS4在阿片受體信號(hào)通路中的調(diào)節(jié)作用阿片類(lèi)藥物依賴(lài)和戒斷的狀態(tài)是多種神經(jīng)遞質(zhì)、受體和細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子等共同作用形成的[6]。藍(lán)斑是主要的阿片類(lèi)藥物軀體依賴(lài)性調(diào)控部位，阿片受體密集程度與依賴(lài)及戒斷癥狀有直接聯(lián)系[21]。國(guó)外學(xué)者發(fā)現(xiàn)，重復(fù)給予小鼠甲基苯丙胺后停藥可導(dǎo)致其行為敏化的形成，而μ-阿片受體（μ-opioid receptor， MOR）敲除小鼠可抵抗甲基苯丙胺誘導(dǎo)的行為敏化形成，在敲除鼠紋狀體中，D1R與配體結(jié)合減少，RGS4mRNA表達(dá)上調(diào)[22]。Wang等[23]用MOR或DOR（δ-opioid receptor， DOR）激動(dòng)劑過(guò)夜處理人成神經(jīng)細(xì)胞瘤SH-SY5Y細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)該處理可導(dǎo)致RGS4蛋白水平的顯著下調(diào)，而這種下調(diào)可被阿片受體拮抗劑納洛酮阻斷。阿片受體激動(dòng)劑所致的RGS4下調(diào)可能是通過(guò)蛋白酶體途徑發(fā)生的，且可維持嗎啡依賴(lài)下的細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)態(tài)，基于RGS4的多交互效應(yīng)，這還能涉及通過(guò)增加其他Gαi或Gαq偶聯(lián)的GCPR受體信號(hào)引起。Han等[24]研究發(fā)現(xiàn)，選擇性沉默伏隔核中RGS4的表達(dá)可增強(qiáng)小鼠嗎啡獎(jiǎng)賞效應(yīng)的敏感性，且RGS4基因敲除小鼠也表現(xiàn)出更加強(qiáng)烈的阿片階段癥狀。由此可推測(cè)，阿片受體介導(dǎo)依賴(lài)行為的形成，而能對(duì)阿片受體起負(fù)性調(diào)節(jié)作用的RGS4則能減輕甚至抑制阿片受體介導(dǎo)的依賴(lài)行為發(fā)生。endprint

2.3RGS4在代謝型谷氨酸受體信號(hào)通路中的調(diào)節(jié)作用谷氨酸作為腦中最重要的興奮性神經(jīng)遞質(zhì)，通過(guò)與離子型或代謝型谷氨酸受體的結(jié)合，通過(guò)調(diào)節(jié)突觸可塑性或多種途徑調(diào)節(jié)谷氨酸的轉(zhuǎn)運(yùn)，從而影響藥物獎(jiǎng)賞、復(fù)吸等行為[6]。近年來(lái)研究表明，代謝型谷氨酸受體5（metabotropic glutamate receptor，mGluR5）作為一類(lèi)GCPR，與苯丙胺等藥物依賴(lài)形成密切相關(guān)[25-26]。mGluR5屬于G蛋白偶聯(lián)受體，是RGS4作用的主要靶點(diǎn)，可與RGS4形成復(fù)合物參與藥物依賴(lài)的形成[27]。已有研究證實(shí)，mGluR5在各種藥物成癮和與之相關(guān)的行為如戒斷、渴求、覓藥、消退以及重建行為中都發(fā)揮著重要的作用[26]。國(guó)外學(xué)者通過(guò)慢性給予大鼠苯丙胺后戒斷一段時(shí)間使之形成敏化，然后再給予苯丙胺刺激，發(fā)現(xiàn)RGS4可與mGluR5形成免疫共沉淀復(fù)合物，且大鼠腦背側(cè)紋狀體和伏隔核RGS4表達(dá)下調(diào)，同時(shí)還伴隨著Gαq和PLCβ1的上調(diào)[28]。另外的研究也發(fā)現(xiàn)，使RGS4過(guò)表達(dá)可減弱由苯丙胺或mGluR5激動(dòng)劑誘導(dǎo)的動(dòng)物行為活性和降低ERK磷酸化水平，與使用mGluR5拮抗劑有相似的效果[29]，由此可推測(cè)RGS4可對(duì)mGluR5發(fā)揮負(fù)性調(diào)節(jié)作用，這可能是由Gαq激活作用于PLCβ1而調(diào)節(jié)下游信號(hào)通路發(fā)生的。

3小結(jié)與展望

近年來(lái)，由藥物依賴(lài)造成的一系列社會(huì)問(wèn)題在我國(guó)越演越烈，不僅用藥群體更趨低齡化和女性化，許多公眾人物也卷入其中，造成了嚴(yán)重的不良影響?？梢?jiàn)，闡明藥物依賴(lài)形成機(jī)制，尋找其治療方法迫在眉睫。許多成癮藥物通過(guò)作用于各類(lèi)GPCR及相關(guān)信號(hào)通路介導(dǎo)欣快感和戒斷癥狀的產(chǎn)生，從而導(dǎo)致藥物依賴(lài)形成，RGS4作為GPCR負(fù)性調(diào)節(jié)因子，可通過(guò)調(diào)節(jié)GPCR活性而改變下游信號(hào)傳導(dǎo)而參與藥物依賴(lài)的調(diào)節(jié)。因此，將RGS4作為一個(gè)特異性的研究靶點(diǎn)，進(jìn)一步探索RGS4在藥物依賴(lài)受體信號(hào)通路中的調(diào)節(jié)作用，可為尋找、研發(fā)藥物依賴(lài)的治療方法提供新思路和理論基礎(chǔ)。

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（收稿日期：2015.01.21）endprint