闞俊明等

【摘要】目的：研究胡槐軟肝片對CCl4所致大鼠藥物性肝損傷的保護(hù)作用。方法：采用wister大鼠48只（雌雄各半），隨機(jī)分為四組，模型組和正常組灌胃0.5%羧甲基纖維素鈉溶液，其余兩組給予胡槐軟肝片（簡稱蒙藥組）和護(hù)肝片（陽性組）進(jìn)行保護(hù)，每日1 次，連續(xù)15 d，第14天除正常組外灌胃CCl4造模。檢測血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、堿性磷酸酶（ALP）的含量和肝勻漿中過氧化脂質(zhì)降解產(chǎn)物丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH）的含量，并觀察肝組織形態(tài)學(xué)特征。結(jié)果：胡槐軟肝片明顯降低血清中ALT、AST、ALP含量；明顯增加肝勻漿中 SOD、GSH的含量；抑制MDA的升高；改善肝細(xì)胞變性、水腫以及炎性程度。結(jié)論：胡槐軟肝片對CCl4所致大鼠藥物性肝損傷的保護(hù)作用。

【關(guān)鍵詞】胡槐軟肝片；藥物性肝損傷；保護(hù)作用

【中圖分類號】R285.5【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A【文章編號】1007-8517（2015）08-0028-02

藥物性肝損傷（drug-induced liver disease，DILD）是由于藥物代謝產(chǎn)物引起的肝臟損害性疾病。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，近年來由于藥物聯(lián)合運(yùn)用、濫用及用藥不當(dāng)?shù)葘?dǎo)致肝損傷的發(fā)病率呈逐年上升趨勢。胡槐軟肝片對藥物性肝損傷臨床療效較佳，本研究擬用該藥觀察藥物性肝損傷大鼠血清中ALT、AST、ALP和肝勻漿的MDA、SOD、GSH的含量以及觀察肝組織形態(tài)學(xué)變化，探討該藥對大鼠藥物性肝損傷的保護(hù)作用。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)藥物胡槐軟肝片由內(nèi)蒙古呼倫貝爾職業(yè)技術(shù)學(xué)院提供（蒙醫(yī)專家驗(yàn)方），試驗(yàn)時(shí)用蒸餾水配制成所需濃度備用；護(hù)肝片（批號：201306055）由黑龍江葵花藥業(yè)提供。

1.2動(dòng)物wister大鼠，體重180～220g，由吉林大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，許可證號為SCXK（吉） 2007-0004。

1.3試劑AST試劑盒（批號：14111101）、ALT試劑盒（批號：20140822）、ALP試劑盒（批號：140701）、MDA試劑盒（批號：20140619）、SOD試劑盒（批號：20140617）、GSH試劑盒（批號20140614）均由南京建成生物工程研究所提供；CCl4（批號：20130816）由天津市天力化學(xué)試劑有限公司提供。

1.4儀器B5-200全自動(dòng)生化分析儀（深圳）；DY89-1電動(dòng)勻漿機(jī)（寧波）； T6分光光度計(jì)（北京）；HZS-H水浴恒溫振蕩器（江蘇）；AUY120電子分析天平（日本）；HMIAS-2000病理彩色圖紋分析系統(tǒng)（日本）；RM2135 組織切片機(jī)（德國）；HG-941A電熱恒溫干燥箱（上海）。

1.5方法wister大鼠（雌雄各半），實(shí)驗(yàn)前一周適應(yīng)性飼養(yǎng)，自由進(jìn)食進(jìn)水，按體重隨機(jī)分為4組，正常組和模型組每日灌胃10ml/kg的0.5%羧甲基纖維素鈉溶液；蒙藥組和護(hù)肝片組分別灌胃0.68g/kg、0.36g/kg相應(yīng)藥液，每次一次，連續(xù)15d，第14天除正常組外，其它組灌胃30% CCl4橄欖油溶液2 ml/kg灌胃造模，末次灌胃后禁食、不禁水24h。采樣之前稱體重，接著腹動(dòng)脈取血，分離血清，測定ALT、AST和ALP的含量；取肝臟稱重，計(jì)算其指數(shù)（肝臟指數(shù)=肝臟重量/大鼠體重×100%）[1-6]；準(zhǔn)確稱取新鮮肝左葉組織，制成10%的勻漿，離心15min，留取上清液，測定MDA、SOD、GSH含量；取同一部位肝右葉組織1塊，放入10%甲醛溶液中固定，制備切片，HE染色，進(jìn)行光鏡觀察。

1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)方法數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，組間均數(shù)比較采用方差分析，P<0.05表示有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

2結(jié)果

2.1胡槐軟肝片對大鼠血清指標(biāo)的影響由表1、2可知，模型組各項(xiàng)指標(biāo)與正常比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明造模成功。蒙藥組各項(xiàng)指標(biāo)與以模型組相比，數(shù)值明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明胡槐軟肝片對CCl4所致大鼠藥物性肝損傷有一定的保護(hù)作用。

2.2病理切片比較由圖1可知，模型組的組織結(jié)構(gòu)混亂，肝小葉不完整，有散在的點(diǎn)灶狀壞死，肝細(xì)胞濁腫，排列紊亂，中央靜脈周圍肝細(xì)胞脂肪變，可見少數(shù)嗜酸小體形成及小灶性肝細(xì)胞壞死，匯管區(qū)有明顯炎細(xì)胞浸潤；陽性組肝小葉較完整，匯管區(qū)比較清晰，血管周圍偶見少量炎細(xì)胞浸潤，肝細(xì)胞變性、壞死與模型組相比有明顯減輕；蒙藥組肝小葉較完整，少量的細(xì)胞水腫和脂肪變，匯管區(qū)可見少量炎細(xì)胞浸潤。

3討論

由表1、2看出，模型組AST、ALT、ALP、MDA的含量顯著增加，SOD、GSH的含量明顯減小，給藥組以上指標(biāo)明顯有所改變；從肝組織病理切片圖的結(jié)果得知，正常組肝細(xì)胞排列整齊，形態(tài)大小一致，肝索呈明顯的放射狀，匯管區(qū)無腫脹脂肪變壞死和血管周圍無炎細(xì)胞浸潤等病變；模型組的組織結(jié)構(gòu)混亂，肝小葉不完整，有散在的點(diǎn)灶狀壞死，肝細(xì)胞濁腫，排列紊亂，中央靜脈周圍肝細(xì)胞脂肪變，可見少數(shù)嗜酸小體形成及小灶性肝細(xì)胞壞死，匯管區(qū)有明顯炎細(xì)胞浸潤；陽性組肝小葉較完整，匯管區(qū)比較清晰，血管周圍偶見少量炎細(xì)胞浸潤，肝細(xì)胞變性、壞死與模型組相比有明顯減輕；蒙藥組肝小葉較完整，少量的細(xì)胞水腫和脂變，匯管區(qū)可見少量炎細(xì)胞浸潤。表明胡槐軟肝片對CCl4所致大鼠藥物性肝損傷具有明顯的改善作用。

研究結(jié)果表明，胡槐軟肝片對藥物性肝損傷有一定的保護(hù)作用，其藥物性肝損傷保護(hù)作用機(jī)制有待于進(jìn)一步探討深入研究。

參考文獻(xiàn)

[1] 周鵬程.愈肝解毒湯對CCl4所致大鼠急性肝損傷的保護(hù)作用[D].成都：成都中醫(yī)藥大學(xué)，2012.

[2] 吳海建，龔秀，楊倚天，等.四氯化碳藥物性肝損傷體外模型的改進(jìn)[J].中國中藥雜志，2012，37 （23）：3633-3636.

[3] 李大壽，艾遠(yuǎn)征.中藥致藥物性肝損傷的原因與預(yù)防措施[J].中國實(shí)用醫(yī)藥，2011，28（10）：252-253.

[4] 孫長海，王瑜一，徐明亮，等.中藥莪術(shù)對四氯化碳所致急性肝損傷的保護(hù)作用[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥，2010，21（10）：2460-2461.

[5] 牛文明，劉亞峰，潘蘇華.復(fù)方銀杏葉膠囊對小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用研究[J].北京中醫(yī)藥，2010，29（4）：308-310.

[6] 黃貴明，王冬梅，莫遺盛.樂肝口服液對四氯化碳誘導(dǎo)小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用[J].中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用，2010，4 （14）：146-147.

（收稿日期：2015.01.23）endprint