張 勇，張 慧，高桂花

GC法測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)桃金娘油腸溶膠囊中3種成分的含量

張 勇1，張 慧1，高桂花2*

目的 建立測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)桃金娘油腸溶膠囊中α-蒎烯、檸檬烯和桉葉油醇的含量測(cè)定方法。方法 采用Rtx-1701毛細(xì)管柱(30 m×0.32 mm×0.25 μm)，進(jìn)樣口溫度200 ℃，火焰離子化檢測(cè)器，測(cè)器溫度220 ℃，柱溫90 ℃，氮?dú)鉃檩d氣，流速1.0 mL/min，進(jìn)樣量1 μL，外標(biāo)法測(cè)定含量。結(jié)果 α-蒎烯進(jìn)樣濃度在10.09～90.79 μg/mL，回歸方程為y=24 163 x+39 804，r=0.999 8；檸檬烯進(jìn)樣濃度在16.82～151.3 μg/mL，回歸方程為y=31 699 x+1 555 748，r=0.999 7；桉葉油醇進(jìn)樣濃度在41.23～371.1 μg/mL，回歸方程為y=7 416.8 x+2 367 875.5，r=0.999 7。α-蒎烯的平均回收率為99.36%，RSD為1.21%；檸檬烯的平均回收率為99.14%，RSD為1.03%；桉葉油醇的平均回收率為100.22%，RSD為0.87%。結(jié)論 該方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、靈敏、重現(xiàn)性好，可作為標(biāo)準(zhǔn)桃金娘油腸溶膠囊中主要成分的含量測(cè)定方法。

標(biāo)準(zhǔn)桃金娘油腸溶膠囊；α-蒎烯；檸檬烯；桉葉油醇；含量測(cè)定

0 引言

標(biāo)準(zhǔn)桃金娘油腸溶膠囊由德國(guó)保時(shí)佳大藥廠生產(chǎn)，具有抗炎、祛痰作用[1-9]，能夠治療中耳炎、氣管炎、肺炎，其療效確切、不良反應(yīng)少。經(jīng)氣紅聯(lián)用法測(cè)定[10]，標(biāo)準(zhǔn)桃金娘油腸溶膠囊主要是由α-蒎烯、檸檬烯和桉葉油醇等3種單萜組成，本文采用氣相色譜法測(cè)定其含量，建立了質(zhì)量控制方法，該方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、靈敏、重現(xiàn)性好。

1 儀器與試藥

GC-2010氣相色譜儀，配FID檢測(cè)器(日本島津公司)，Rtx-1701毛細(xì)管柱，HGH-300BF氫氣發(fā)生器(北京匯龍公司)，BS 224 S型電子天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司)。

標(biāo)準(zhǔn)桃金娘油腸溶膠囊(德國(guó)保時(shí)佳大藥廠，批號(hào)：219223)，α-蒎烯對(duì)照品(批號(hào)：110897-200502)；檸檬烯對(duì)照品(批號(hào)：100470-201302)；桉葉油醇(桉油精)對(duì)照品(批號(hào)：110788-201105)對(duì)照品均由中國(guó)食品藥品檢定研究院提供；乙酸乙酯(天津市博迪化工有限公司)。

2 方法與結(jié)果

2.1 溶液的配制

2.1.1 對(duì)照品儲(chǔ)備液的配制 分別精密稱取α-蒎烯約25 mg、檸檬烯約40 mg、桉葉油醇約100 mg于50 mL容量瓶中，加乙酸乙酯稀釋至刻度，搖勻，作為儲(chǔ)備液(α-蒎烯0.5 mg/mL、檸檬烯0.8 mg/mL、桉葉油醇2 mg/mL)。

2.1.2 對(duì)照品溶液的配制 取儲(chǔ)備液1 mL 于 10 mL的容量瓶中，用乙酸乙酯稀釋至刻度并搖勻，即得。

2.1.3 供試品溶液的配制 取本品內(nèi)容物0.3 g置50 mL容量瓶中，加乙酸乙酯定容至刻度，搖勻，取1 mL置10 mL容量瓶中，加乙酸乙酯定容至刻度，搖勻作為供試品溶液。

2.2 色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn) 氣相色譜儀(配FID)，Rtx-1701毛細(xì)管柱(30 m×0.32 mm×0.25 μm)，氣化室溫度200 ℃，檢測(cè)器溫度220 ℃，柱溫90 ℃，流速1.0 mL/min，進(jìn)樣量1 μL。取對(duì)照品溶液1 μL注入氣相色譜儀，記錄色譜圖，各組分間分離度符合規(guī)定。見(jiàn)圖1。

圖1 HPLC色譜圖

2.3 檢出限與定量限 分別取α-蒎烯、檸檬烯、桉葉油醇對(duì)照品溶液逐步稀釋，取1 μL注入氣相色譜儀，記錄色譜圖，以S/N=3為檢出限，α-蒎烯、檸檬烯、桉葉油醇檢出限為0.64、0.38、0.72 ng，S/N=10為定量限，α-蒎烯、檸檬烯、桉葉油醇定量限為1.6、1.1和1.4 ng。

2.4 線性關(guān)系試驗(yàn) 稱取α-蒎烯25.22 mg，檸檬烯42.04 mg，桉葉油醇103.07 mg置同一50 mL量瓶中，加乙酸乙酯稀釋至刻度并搖勻，得對(duì)照品儲(chǔ)備液。取對(duì)照品儲(chǔ)備液1 mL置10 mL的容量瓶中，加乙酸乙酯稀釋至刻度并搖勻，得對(duì)照品溶液。分別精密量取對(duì)照品儲(chǔ)備液0.2、0.6、1.0、1.4、1.8 mL于10 mL的容量瓶中，加乙酸乙酯稀釋至刻度并搖勻，得供試品溶液。分別量取1 μL注入氣相色譜儀，記錄色譜圖，以進(jìn)樣濃度為橫坐標(biāo)、峰面積為縱坐標(biāo)計(jì)算回歸方程。α-蒎烯的回歸方程為y=24 163 x+39 804，r=0.999 8；檸檬烯的回歸方程為y=31 699 x+1 555 748，r=0.999 7；桉葉油醇的回歸方程為y=7 416.8 x+2 367 875.5，r=0.999 7。α-蒎烯進(jìn)樣濃度在10.09～90.79 μg/mL，檸檬烯進(jìn)樣濃度在16.82～151.3 μg/mL，桉葉油醇進(jìn)樣濃度在41.23～371.1 μg/mL范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.5 精密度試驗(yàn) 精密量取對(duì)照品溶液1 μL注入氣相色譜儀，記錄色譜圖，重復(fù)進(jìn)樣6次，α-蒎烯峰面積的RSD為0.55%，檸檬烯峰面積的RSD為0.61%，桉葉油醇峰面積的RSD為0.45%，方法精密度良好。

2.6 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取供試品溶液，于0、2、4、6、8 h分別進(jìn)樣1 μL，依法測(cè)定。結(jié)果α-蒎烯峰面積的RSD為0.64%、檸檬烯峰面積的RSD為0.82%，桉葉油醇峰面積的RSD為0.57%，結(jié)果供試品溶液在8 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.7 重復(fù)性試驗(yàn) 取標(biāo)準(zhǔn)桃金娘腸溶膠囊，按供試品溶液制備方法制備供試品溶液6份，依法測(cè)定。α-蒎烯、檸檬烯、桉葉油醇含量的RSD分別為0.78%、1.04%、0.69%。含量測(cè)定重復(fù)性良好。

2.8 回收率試驗(yàn) 精密稱取桃金娘標(biāo)準(zhǔn)油內(nèi)容物0.15 g置50 mL容量瓶中，加乙酸乙酯稀釋至刻度，搖勻，再精密量取1 mL置10 mL容量瓶中，共稱取9份，分成3組，每組分別加入上述對(duì)照品儲(chǔ)備液0.4、0.5、0.6 mL，加乙酸乙酯稀釋至刻度，制備供試品溶液，取上述9個(gè)溶液分別進(jìn)樣1 μL，記錄色譜圖，按外標(biāo)法計(jì)算，結(jié)果見(jiàn)表1～表3。

2.9 樣品含量測(cè)定 取本品內(nèi)容物依法測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表4。

3 討論

3.1 指標(biāo)性成分的選擇 桃金娘油中的主要成分為α-蒎烯、檸檬烯和桉葉油醇，占總桃金娘油的97%以上，可堿化溶解粘液、調(diào)節(jié)分泌物比例、提高纖毛擺動(dòng)空間并主動(dòng)刺激粘液纖毛運(yùn)動(dòng)、增強(qiáng)粘液纖毛清除，是實(shí)現(xiàn)治療功效的主要成分，故選擇其作為指標(biāo)性成分。

3.2 色譜條件建立 參考不同物質(zhì)中有關(guān)3種成分的測(cè)定方法[11-15]，建立了標(biāo)準(zhǔn)桃金娘油腸溶膠囊中主要成分的測(cè)定方法，采用Rtx-1型毛細(xì)管柱時(shí)，桉葉油醇峰與檸檬烯峰之間分離度低，與其后的峰分離度差。選用Rtx-1701型毛細(xì)管柱，各組分分離效果好，無(wú)拖尾現(xiàn)象。采用等溫條件進(jìn)行分離，方法簡(jiǎn)便，分析時(shí)間短。

表1 α-蒎烯回收率試驗(yàn)結(jié)果

表2 檸檬烯回收率試驗(yàn)結(jié)果

表3 桉葉油醇回收率試驗(yàn)結(jié)果

表4 標(biāo)準(zhǔn)桃金娘腸溶膠囊中3種成分含量測(cè)定結(jié)果(mg/g)

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Content determination of three components in myrtol standardized enteric coated soft capsules by GC

ZHANG Yong1,ZHANG Hui1,GAO Gui-hua2*

(1.Liaoning University of Traditional Chinese Medicine,Dalian 116600,China;2.School of Pharmacy,Jining Medical University,Rizhao 276826,China)

Objective To establish a method for determination of α-pinene,limonene and eudesmol in myrtol standardized enteric coated soft capsule.Methods Rtx-1701 capillary column(30 m×0.32 mm×0.25 μm)was adopted,inlet temperature was 200 ℃,Flame Ionization Detector(FID)with temperature of 250 ℃,the column temperature was 90 ℃ with nitrogen as the carrier gas,the flow rate was 1 mL/min,injection volume was 1 μL.Results The linear ranges of α-pinene,limonene and eudesmol were 10.09～90.79 μg/mL(y=24 163 x+39 804,r=0.999 8),16.82～151.3 μg/mL(y=31 699 x+1 555 748,r=0.999 6),41.23～371.1 μg/mL(y=7 416.8 x+2 367 875.5,r=0.999 7)；the mean recovery rates of the three components were 99.36%(RSD=1.21%),99.14%(RSD=1.03%),100.22%(RSD=0.87%),respectively(n=9).Conclusion The method is simple,accurate,sensitive,reproducible,it can be used to determine the main contents in myrtol standardized enteric coated soft capsule.

Myrtol standardized enteric coated soft capsules;α-Pinene;Limonene;Eudesmol;Content determination

2014-06-17

1.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)，大連 116600；2.濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，山東 日照 276826

*通信作者

10.14053/j.cnki.ppcr.201506020