王希東，郝少君，李文俊，張正臣

抗眩顆粒對小鼠腦膜微循環(huán)的影響

王希東，郝少君*，李文俊，張正臣

目的 觀察抗眩顆粒對小鼠腦膜微循環(huán)的影響。方法 取小鼠60只，雌雄各半，隨機分為6組，分別灌服抗眩顆粒、養(yǎng)血清腦顆?；鞈乙杭巴w積的生理鹽水，連續(xù)給藥10 d。于第10天后開始測定。記錄小鼠平靜后2 min內(nèi)的血流灌注量。取結(jié)扎前110～120 s的血流灌注量平均值作為結(jié)扎前的平均灌注量，取230～240 s的血流灌注量平均值作為結(jié)扎后的平均灌注量，并進(jìn)行分析。結(jié)果 與空白對照組比較，模型組腦膜微循環(huán)血流量顯著減少(P<0.01)?？寡ｎw粒和養(yǎng)血清腦顆粒均可顯著改善雙側(cè)頸總動脈結(jié)扎所致的小鼠腦血流量減少(P<0.01)。結(jié)論 抗眩顆粒對小鼠腦膜微循環(huán)有良好的改善作用。

抗眩顆粒；小鼠；腦膜微循環(huán)；養(yǎng)血清腦顆粒

0 引言

腦動脈供血不足導(dǎo)致眩暈發(fā)作在臨床上較多見?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為其與腦部微循環(huán)功能障礙、血液流變學(xué)異常、細(xì)胞內(nèi)自由基損傷等諸多因素有關(guān)。腦供血不足在中醫(yī)學(xué)上屬于“眩暈”范疇。目前，雖然治療該病的藥物很多，但療效不理想[1-4]。筆者根據(jù)臨床經(jīng)驗自擬抗眩顆粒，該方由磁石、夏枯草、葛根、牛膝、鉤藤、姜半夏、川芎、丹參等組成。諸藥合用，具有平肝潛陽、活血通竅、息風(fēng)定眩的作用。用于因高血壓、腦動脈硬化、椎基底動脈供血不足、美尼爾氏病、植物神經(jīng)功能紊亂引起的眩暈、頭重足輕、行走不穩(wěn)等癥療效較好。為探究其療效原理，本文進(jìn)行了抗眩顆粒對小鼠腦膜微循環(huán)影響的實驗研究。

1 實驗材料

1.1 實驗藥品 抗眩顆粒(中國人民解放軍第371中心醫(yī)院提供，批號：20110620)口服，10 g/次，3次/d；養(yǎng)血清腦顆粒(天士力制藥集團(tuán)股份有限公司，批號：120802)；羧甲基纖維素鈉(天津市恒興化學(xué)試劑制造有限公司，批號：20060728)；鹽酸腎上腺素(上海和豐制藥有限公司，批號：120508)；水合氯醛(天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所，批號：2012707)；生理鹽水(河南雙鶴華利藥業(yè)有限公司，批號：C12031801)；香柏油(中國上海標(biāo)本模型廠，批號：20120705)；巧蜜兒脫毛膏(廣州市壹佰雅化妝品有限公司)。

1.2 實驗動物 小鼠，昆明種，SPF級，由武漢生物制品研究所有限責(zé)任公司提供，合格證號：42000400000116。

1.3 實驗儀器 JM1000電子秤，余姚記銘稱重校驗設(shè)備有限公司；BI-2000圖像分析系統(tǒng)，成都泰盟科學(xué)儀器有限公司；PIM3激光散斑血流監(jiān)測視頻系統(tǒng)，瑞典帕瑞醫(yī)學(xué)(中國)公司。

2 實驗方法

小鼠60只，體重18～21 g，雌雄各半，隨機均勻分為6組，分別灌服大、中、小劑量抗眩顆粒混懸液(15.2、7.6、3.8 g/kg，0.1 mL/10 g)、養(yǎng)血清腦顆?；鞈乙?3 g/kg，0.1 mL/10 g )及同體積的生理鹽水(2組，0.1 mL/10 g)，1次/d，連續(xù)給藥10 d。于第10天早給藥1 h(禁食不禁水12 h)后開始測定。以20%烏拉坦0.05 mL/10 g(體重)腹腔注射麻醉，俯臥位固定，將顱骨正中皮膚矢狀切開，用止血鉗將兩側(cè)皮膚拉開，使大腦腦膜完全暴露，用標(biāo)記筆在小鼠腦部矢狀縫與冠狀縫交叉處作一標(biāo)記，將小鼠置于儀器的推薦距離范圍內(nèi)，并使儀器與監(jiān)測部位平行，光束照在標(biāo)記處，并與檢測部位垂直，調(diào)整儀器距離與設(shè)定距離相一致，圈定掃描面積，點擊記錄按鈕開始記錄，記錄小鼠平靜后2 min內(nèi)血流灌注量(儀器操作方法：先啟動計算機和其他外周設(shè)備，然后啟動Perimed儀器，預(yù)熱5 min，當(dāng)儀器的LED燈停止閃爍時，可以開始監(jiān)測，雙擊桌面上的PIMsoft軟件，選擇PeriCam PSI 系統(tǒng)；點擊工具，進(jìn)入項目編輯器，設(shè)置操作距離為10 cm，監(jiān)測面積的寬度和高度均為2 cm，步長設(shè)為中，采樣頻率為23/s，持續(xù)時間設(shè)為直至停止，然后點擊應(yīng)用-OK鍵，開始實驗)。然后松開小鼠，仰臥位固定，結(jié)扎雙側(cè)頸總動脈(假手術(shù)組只分離雙側(cè)頸總動脈，不做結(jié)扎處理)。測量完小鼠正常腦部血流量后，松開小鼠，仰臥位固定，結(jié)扎雙側(cè)頸總動脈[空白對照組(假手術(shù)組)只分離雙側(cè)頸總動脈，不做結(jié)扎處理]，然后松開小鼠，并俯臥位固定，圈定同只小鼠正常狀態(tài)時相同的掃描面積，記錄小鼠平靜后2 min內(nèi)血流灌注量。取結(jié)扎前110～120 s的血流灌注量平均值作為結(jié)扎前的平均灌注量，取230～240 s的血流灌注量平均值作為結(jié)扎后的平均灌注量，導(dǎo)出報告，并進(jìn)行分析。

3 結(jié)果

各組小鼠腦血流量比較見表1。從表1可見，頸總動脈結(jié)扎前各組小鼠腦膜微循環(huán)血流量差異無統(tǒng)計學(xué)意義，說明各組具有可比性。空白對照組結(jié)扎假手術(shù)前后腦血流量比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義；其他各組結(jié)扎后，各組小鼠腦膜微循環(huán)血流量均減少(P<0.01)；與空白對照組比較，模型組腦膜微循環(huán)血流量減少(P<0.01)，說明頸總動脈結(jié)扎可使小鼠腦血流量顯著減少，但由于側(cè)支循環(huán)，雖結(jié)扎雙側(cè)頸總動脈，腦血流并未完全阻斷；與模型組比較，大、中、小劑量抗眩顆粒組和養(yǎng)血清腦顆粒組結(jié)扎至小鼠腦血流量減少得到顯著改善(P<0.01)。與空白對照組比較，模型組腦血流量下降更明顯(P<0.01)，與模型組比較，大、中、小劑量抗眩顆粒組和養(yǎng)血清腦顆粒組均可使雙側(cè)頸總動脈結(jié)扎所致的小鼠腦血流量下降得到顯著改善(P<0.01)。見圖1～圖6。

表1 各組小鼠腦血流量比較

注：*與模型組比較，P<0.01;#與結(jié)扎前比較，P<0.01

圖1 空白對照組腦血流圖

圖2 模型組腦血流圖

圖3 養(yǎng)血清腦顆粒組腦血流圖

圖4 大劑量抗眩顆粒組腦血流圖

圖5 中劑量抗眩顆粒組腦血流圖

圖6 小劑量抗眩顆粒組腦血流圖

由圖1～圖6可見，空白對照組腦血流量降低不明顯；與空白對照組比較，模型組結(jié)扎后小鼠腦膜微循環(huán)血流量明顯減少，顏色變淺，說明造模成功；與模型組比較，養(yǎng)血清腦顆粒組和大、中、小劑量抗眩顆粒組結(jié)扎后小鼠腦的血流量減少得到很好的改善，顏色變深，其中，以大劑量抗眩顆粒組改善腦血流量效果較好。

4 討論

眩暈患者的發(fā)病原因中，屬于虛者居多，如陰虛則易肝風(fēng)內(nèi)動，血缺則腦失所養(yǎng)，精虧則髓海不足，均易導(dǎo)致眩暈。眩暈常常突然發(fā)作，常伴有惡心、嘔吐、自汗等現(xiàn)象，更為嚴(yán)重者可突然昏倒[5]。中醫(yī)認(rèn)為，肝經(jīng)熱盛，肝風(fēng)內(nèi)動，致頭暈?zāi)垦?，治宜涼肝、息風(fēng)、止疼?？寡ｎw粒具有平肝息風(fēng)、潛陽安神、活血通經(jīng)的作用。筆者對其工藝、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[6]及藥理進(jìn)行研究，包括抗眩顆粒對小鼠微循環(huán)的影響，抗眩暈顆粒的鎮(zhèn)靜作用，抗眩顆粒對大鼠血瘀模型的影響，抗眩顆粒對內(nèi)分泌型高血壓大鼠模型的影響[7]等。本文研究抗眩顆粒對小鼠腦膜微循環(huán)的影響。結(jié)果表明，頸總動脈結(jié)扎后，抗眩顆?？墒剐∈竽X膜微循環(huán)血流量顯著減少，灌注量顯著下降，大、中、小劑量抗眩顆粒和養(yǎng)血清腦顆粒均可顯著改善雙側(cè)頸總動脈結(jié)扎所致的小鼠腦血流量減少。但本文沒有研究抗眩顆粒的毒理作用，有待于在未來的實驗中加強對其毒理作用的研究，保證用藥的安全性。

5 致謝

本實驗在河南中醫(yī)學(xué)院苗明三教授指導(dǎo)下完成，特此致謝！

[1] 王獻(xiàn)明,趙軍波,魏潔.靜脈滴注納洛酮治療顱腦外傷后眩暈癥的臨床療效分析[J].實用藥物與臨床,2012,15(7):449-450.

[2] 張金生.仲景論治眩暈病探微[J].中醫(yī)學(xué)報,2011(6):1104-1105.

[3] 李波,李彬.眩暈辯治體會[J].中醫(yī)學(xué)報,2012,(8):1012-1013.

[4] 張晉,楊磊,郭蓮軍.蝙蝠葛諾林堿對小鼠軟腦膜微循環(huán)障礙的改善作用[J].武漢大學(xué)學(xué)報,2011,32(1):36-39.

[5] 王冠良,王自愷.眩暈的辨證論治[J].菏澤醫(yī)專學(xué)報,2001,13(3):92-95.

[6] 王希東,郝少君,李文俊,等.抗眩顆粒的制備及葛根素的含量測定[J].中國藥師,2014,17(8):1279-1261.

[7] 郝少君,王希東,李文俊,等.抗眩顆粒對小鼠自主活動及運動協(xié)調(diào)能力的影響[J].中醫(yī)學(xué)報,2014,29(2):237-238.

Effect of anti-glare granules on meningeal microcirculation in mice

WANG Xi-dong, HAO Shao-jun*, LI Wen-jun, ZHANG Zheng-chen

(371 Central Hospital of PLA, Xinxiang 453000, China)

Objective To observe the effect of anti-glare granules on meningeal microcirculation in mice.Methods 60 mice(male∶female=1∶1)were randomly divided into 6 groups, and they were given anti-glare granules, Yangxue qingnao granule suspension and the same volume of normal saline continuously for 10 d.After medication, when the mice were calm, the blood perfusion was recorded after 5 min.The average amounts of blood perfusion at 110～120 min before ligation and at 230～240 min after ligation were compared.Results The blood flow in meningeal microcirculation of model group decreased more significantly than that in blank control group(P<0.01).The anti-glare granules and Yangxue qingnao granule could significantly improve the decrease of blood flow induced by bilateral common carotid artery ligation(P<0.01).Conclusion Anti-glare granules could improve the meningeal microcirculation in mice.

Anti-glare granule;Mice;Meningeal microcirculation;Yangxue qingnao granules

2014-12-09

解放軍第371中心醫(yī)院，河南 新鄉(xiāng) 453000

河南新鄉(xiāng)重點科技攻關(guān)項目(ZG14013)

10.14053/j.cnki.ppcr.201506006

*通信作者