劉 桐，魏秀峰＊，孫 鑫，呂珊珊，唐冠群

（吉林大學(xué)口腔醫(yī)院1.口腔黏膜病科；2.正畸科，吉林長(zhǎng)春130021）

PDCD4在口腔鱗癌中的表達(dá)及意義

劉 桐1，魏秀峰1＊，孫 鑫1，呂珊珊1，唐冠群2

（吉林大學(xué)口腔醫(yī)院1.口腔黏膜病科；2.正畸科，吉林長(zhǎng)春130021）

目的研究PDCD4蛋白在口腔鱗癌組織中的表達(dá)及臨床意義。方法 應(yīng)用免疫組織化學(xué)SP法檢測(cè)PDCD4蛋白在54例口腔鱗癌組織和15例正?？谇火つそM織中的陽(yáng)性表達(dá)，并結(jié)合臨床資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果

口腔鱗癌組織PDCD4蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率明顯低于口腔正常黏膜組織（P＜0.01）。隨著PDCD4表達(dá)水平的降低，口腔鱗癌惡性程度增高的可能性也隨之增加（P＜0.05）。PDCD4蛋白表達(dá)與口腔鱗癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無(wú)明顯相關(guān)性（P＞0.05）。結(jié)論 PDCD4蛋白在口腔鱗癌中低表達(dá)，與口腔鱗癌的發(fā)生發(fā)展有密切聯(lián)系。

口腔鱗狀細(xì)胞癌；程序性細(xì)胞死亡因子4；免疫組織化學(xué)

（Chin J Lab Diagn，2015，19：0220）

程序性細(xì)胞死亡因子4（programmed cell death 4，PDCD4）是一種在細(xì)胞調(diào)亡過(guò)程中表達(dá)上調(diào)的基因，其已被證實(shí)為是一種腫瘤抑制基因。已有研究［1－4］表明：PDCD4在許多人惡性腫瘤中表達(dá)下調(diào)或缺失，或能夠促進(jìn)多種腫瘤細(xì)胞發(fā)生凋亡，例如腎癌、胃癌、結(jié)腸癌以及尿路上皮癌等。但有關(guān)PDCD4在口腔鱗癌組織中的表達(dá)研究在國(guó)內(nèi)尚未見(jiàn)報(bào)道。本研究利用免疫組織化學(xué)法，探討PDCD4在口腔鱗狀細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展中的影響以及與腫瘤臨床病理分期的關(guān)系，檢測(cè)PDCD4在口腔鱗癌中的表達(dá)并探討其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料選擇2011.01～2013.03吉林大學(xué)口腔醫(yī)院口腔頜面外科收治的住院患者病理診斷明確的口腔鱗癌標(biāo)本54例作為口腔鱗癌組（有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者23例，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者31例），15例正?？谇火つそM織作為對(duì)照組，所有患者術(shù)前都未作放療、化療及其它針對(duì)腫瘤的治療。

1.2 主要試劑及儀器鼠抗人PDCD4抗體（美國(guó)圣克魯斯生物技術(shù)公司），SP免疫組織化學(xué)試劑盒及DAB顯色試劑盒（福州邁新生物技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司），陽(yáng)離子防脫玻片（北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司）。

1.3 免疫組織化學(xué)法檢測(cè)PDCD4的陽(yáng)性表達(dá)

標(biāo)本用10%甲醛固定，脫水，石蠟包埋。連續(xù)切片，切片厚度2μm，常規(guī)脫蠟，一抗稀釋至1∶200，采用SP法染色，DAB顯色，蘇木精復(fù)染，常規(guī)脫水，干燥，封片。

1.4 PDCD4陽(yáng)性表達(dá)判定標(biāo)準(zhǔn)PDCD4主要在核周、細(xì)胞漿陽(yáng)性表達(dá)，棕黃色或黃褐色顆粒。在高倍視野下（400x），選取3～5個(gè)陽(yáng)性視野進(jìn)行計(jì)數(shù)，根據(jù)染色強(qiáng)度和陽(yáng)性率進(jìn)行評(píng)分判定。①染色強(qiáng)度：陰性—0分，染色弱但明顯強(qiáng)于陰性對(duì)照者—1分，染色較強(qiáng)者—2分；染色強(qiáng)—3分。②陽(yáng)性率：未見(jiàn)陽(yáng)性細(xì)胞或陽(yáng)性率＜10%為陰性（－）計(jì)0分，陽(yáng)性率＜30%為陽(yáng)性（＋）計(jì)1分，31%～60%為2分；＞60%為3分。上述兩種分值相加大于等于3分為陽(yáng)性［5］。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果采用SPSS17.0軟件統(tǒng)計(jì)分析，PDCD4各組間陽(yáng)性表達(dá)率采用χ2檢驗(yàn)（必要時(shí)采用校正χ2檢驗(yàn)或Fisher精確檢驗(yàn)），以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 PDCD4蛋白在不同組織中的表達(dá)率在正常口腔黏膜上皮組織中PDCD4陽(yáng)性顆粒以核周、細(xì)胞漿表達(dá)為主，呈棕黃色或黃褐色顆粒，陽(yáng)性部位以鱗狀上皮的基底細(xì)胞、棘細(xì)胞多見(jiàn)（見(jiàn)圖1），在口腔鱗癌組織中PDCD4陽(yáng)性顆粒表達(dá)以細(xì)胞漿為主（見(jiàn)圖2）。PDCD4在口腔鱗癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為35.2%（19／54），在正常口腔黏膜組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為100%（15／15），組間差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）（見(jiàn)表1）。

2.2 PDCD4蛋白表達(dá)與口腔鱗癌惡性程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系PDCD4的陽(yáng)性表達(dá)率隨口腔鱗癌惡性程度的增高而降低，高分化及中分化鱗癌組織的PDCD4陽(yáng)性表達(dá)率均高于低分化鱗癌組織，組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），而高分化與中分化口腔鱗癌組織間的PDCD4陽(yáng)性表達(dá)率比較差異則無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。PDCD4陽(yáng)性表達(dá)率在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組與無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）（見(jiàn)表2）。

表1 PDCD4蛋白在不同組織中的表達(dá)率

表2 PDCD4蛋白表達(dá)與口腔鱗癌惡性程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系

圖1 PDCD4蛋白在正常口腔黏膜組織中的表達(dá)（SP×200）

圖2 PDCD4蛋白在口腔鱗癌組織中的表達(dá)（SP×200）

3 討論

口腔鱗狀細(xì)胞癌是發(fā)生在口腔黏膜最為常見(jiàn)的惡性腫瘤。口腔鱗癌常向區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，晚期可發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，其分化程度越差，惡性程度越高。近年來(lái)，口腔鱗癌的治療已取得了很大的進(jìn)展，但治療手段仍以手術(shù)為主，會(huì)對(duì)患者造成一定程度傷害，而且患者接受治療后的生存率也沒(méi)有得到顯著的提高。

PDCD4是一種新的腫瘤抑制因子。人PDCD4基因定位于染色體10q24［6］，PDCD4的主要功能之一就是抑制依賴(lài)于AP－1（系膜細(xì)胞內(nèi)活化蛋白－1）的轉(zhuǎn)錄，從而抑制真核翻譯起始因子eIF4A和eIF4G的功能［7，8］。有研究［9］發(fā)現(xiàn)PDCD4也可以與Twist1蛋白相互作用，從而下調(diào)YB－1（Y盒結(jié)合蛋白－1）的表達(dá)，抑制癌細(xì)胞的生長(zhǎng)，并對(duì)某些化學(xué)療法產(chǎn)生調(diào)節(jié)性的阻抗作用。Saxena等［10］研究發(fā)現(xiàn)抑制AR（醛糖還原酶）的活性后可以通過(guò)ROS／AMPK／mTOR／AP1／4E－B－P1等多條通路，下調(diào)microRNA－21的表達(dá)，致使PDCD4的表達(dá)增加，從而可以抑制結(jié)腸癌細(xì)胞生長(zhǎng)。

本研究結(jié)果表明，PDCD4蛋白在正?？谇火つそM織與口腔鱗癌組織中均有不同程度的表達(dá)，但在口腔鱗癌組織中的表達(dá)明顯降低甚至缺失，而隨著腫瘤臨床病理分期越差，PDCD4表達(dá)程度越低。這提示著PDCD4可能與口腔鱗癌的發(fā)生發(fā)展與惡性程度密切相關(guān)。原因之一可能是因?yàn)槭チ薖DCD4的抑制作用，翻譯起始因子呈現(xiàn)過(guò)表達(dá)從而發(fā)揮了類(lèi)似癌基因的作用。Allgayer等［11］研究表明PDCD4可以作為結(jié)直腸癌預(yù)后的客觀指標(biāo)和潛在診斷標(biāo)志。對(duì)于卵巢癌和結(jié)腸癌患者，PDCD4缺失是癌癥相關(guān)生存率的一個(gè)預(yù)測(cè)指標(biāo)［12，13］。在小鼠肺癌模型中，霧化給予PDCD4復(fù)合物能夠促進(jìn)細(xì)胞凋亡并抑制細(xì)胞增殖和腫瘤血管生成［14］。結(jié)合本研究結(jié)果，PDCD4也可能成為口腔鱗癌早期診斷與預(yù)后判斷的客觀指標(biāo)。隨著研究不斷進(jìn)展，對(duì)口腔鱗癌患者進(jìn)行PDCD4靶基因治療或許也會(huì)成為一個(gè)新的治療途徑。

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Expression and significance of PDCD4 in oral squamous cell carcinoma

LIU Tong，WEI Xiu－feng，SUN Xin，et al.

（Department of Oral Mucosal Diseases，Stomatology Hospital，Jilin University，Changchun130021，China）

ObjectiveTo investigate the expression and significance of PDCD4in oral squamous cell carcinoma.MethodsPDCD4immunohistochemical expression was investigated in 54cases of oral squamous cell carcinoma and 15 cases of normal oral mucosa tissue，analyze its relationship with clinical data.ResultsThe positive rate of PDCD4protein was significantly lower in oral squamous cell carcinomas than that in normal oral mucosa tissues（P＜0.01）.And with the decreasing of PDCD4protein expression level，the malignant degrees of oral squamous cell carcinoma were also increased，which had statistically significant difference among groups（P＜0.05）.But the expression of PDCD4protein were no relationship to lymph node metastasis（P＞0.05）.ConclusionThe down－regulated expression of PDCD4protein was correlated with the pathogenesis and development in oral squamous cell carcinomas.

oral squamous cell carcinoma；PDCD4；immunohistochemistry

R739.8

A

劉桐（1988－），男，山東省泰安市人，在讀醫(yī)學(xué)碩士，主要從事口腔黏膜病基礎(chǔ)與臨床方面的研究。

2014－03－03）

1007－4287（2015）02－0220－03

＊通訊作者