劉廣寅 劉 琳 張志勇 王 平 吳晨鵬 (唐山工人醫(yī)院，河北 唐山 063000)

乳腺癌是女性發(fā)病率最高的惡性腫瘤〔1〕，歐美國家中的老年患者(60歲以上)約占49%〔2〕。細胞在基因水平上失去對本身生長的正常調(diào)控，生長周期失調(diào)紊亂，可發(fā)生腫瘤，p27 kip1作為抑癌基因，負性調(diào)控細胞周期，表達水平與細胞增殖程度緊密關(guān)聯(lián)。CKS1正性調(diào)節(jié)細胞周期，是一種癌基因，能夠促進腫瘤發(fā)生，在肝癌、乳腺癌、胃癌等癌組織中表達增高〔3，4〕。本研究采用免疫組織化學(xué)方法對老年浸潤性導(dǎo)管癌患者癌組織中p27 kip1和細胞周期蛋白依賴性激酶調(diào)節(jié)亞基(CKS)1的蛋白表達進行檢測，并探討其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2011年1月至2013年12月外科手術(shù)切除的老年女性(≥60歲)乳腺浸潤性導(dǎo)管癌的標本120例，對照組為乳腺良性病變標本120例。兩組年齡差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。

1.2 方法 組織標本均經(jīng)10%甲醛溶液固定后經(jīng)石蠟包埋處理。采用免疫組織化學(xué)法檢測p27 kip1和CKS1水平。

1.3 結(jié)果分析 所有切片均由病理科大夫閱片，每張片子高倍鏡下計數(shù)5個視野的細胞，根據(jù)陽性細胞所占的百分比分為4級:陽性細胞＜5%為陰性(－)，5%～30%為陽性(+)，30%～75%為，＞75%為。將－與+合并為陰性組(－)、與合并為陽性組(+)。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SAS6.12統(tǒng)計軟件進行χ2檢驗。

2 結(jié)果

2.1 p27 kip1蛋白的陽性表達 p27 kip1在乳腺浸潤性導(dǎo)管癌中表達的陽性率〔30%(36/120)〕顯著低于良性病變〔92.50%(111/120)〕(χ2=98.75，P ＜0.01)。

2.2 CKS1陽性表達 CKS1在乳腺浸潤性導(dǎo)管癌中表達陽性率〔66.67%(80/120)〕顯著高于良性病變〔18.33%(22/120)〕(χ2=57.36，P ＜0.01)。

2.3 p27 kip1與乳腺浸潤性導(dǎo)管癌臨床病理特征的關(guān)系 p27 kip1蛋白在腫瘤直徑＞2 cm組表達陽性率顯著低于≤2 cm組(χ2=23.99，P＜0.01);p27 kip1蛋白在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組表達陽性率顯著低于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組(χ2=17.62，P＜0.01);p27 kip1蛋白在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移個數(shù)＞3個組表達陽性率顯著低于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)量≤3組(χ2=12.75，P ＜0.01)。見表1。

2.4 CKS1與乳腺浸潤性導(dǎo)管癌臨床病理特征的關(guān)系 CKS1蛋白在腫瘤直徑＞2 cm組表達陽性率明顯高于≤2 cm組(χ2=19.62，P＜0.01);CKS1蛋白在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組表達陽性率明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組(χ2=16.13，P＜0.01);CKS1蛋白在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移個數(shù)＞3個組表達陽性率明顯高于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)量≤3個組(χ2=14.21，P＜0.01)。見表1。

表1 p27 kip1和CKS1與乳腺浸潤性導(dǎo)管癌臨床病理特征的關(guān)系〔n(%)〕

3 討論

細胞生命活動的基本過程就是細胞周期，而當細胞增殖失控，分化異常，周期發(fā)生紊亂時，有導(dǎo)致細胞過度增殖的可能性，并會因此誘發(fā)癌變。機體內(nèi)調(diào)控細胞周期的因子有細胞周期蛋白和細胞周期蛋白依賴性激酶(CDK)、細胞周期蛋白激酶抑制因子(CKI)。CKS1在一些腫瘤組織中高表達，如乳腺癌、肝癌、胃癌等，并與腫瘤分化程度有相關(guān)性〔5，6〕。p27 kip1是一種抑癌基因，可抑制細胞分裂。通過泛素依賴性蛋白水解途徑，CKS1與Cullin-1的結(jié)合可以促進p27 kip1的泛素化降解，削弱p27 kip1對細胞周期的抑制作用，助長腫瘤的發(fā)生發(fā)展〔4〕。Uehara等〔7〕報道 CKS1與泛素蛋白酶 S細胞周期激酶蛋白(SKP)2結(jié)合之后，識別p27進而泛素化降解p27蛋白。

有報道p27蛋白陽性表達率在前列腺癌組織〔38.2%(26/68)〕低于前列腺增生組織〔80.9%(38/47)〕(P ＜0.01)〔8〕。另有文獻報道，檢測p27在浸潤性乳腺癌和正常乳腺組織中分別為30.6%和88.9%陽性率〔9〕，其結(jié)果與本文結(jié)果p27 kip1在乳腺浸潤性導(dǎo)管癌中的表達陽性率比良性病變陽性率降低的結(jié)論一致，p27 kip1在乳腺癌組織中表達下調(diào)，而在非癌性組織中水平較高，負性調(diào)控細胞周期，是抑癌基因。

本文結(jié)果說明CKS1表達增多，可能通過泛素依賴性蛋白水解途徑，進而促進了p27kip1的泛素化降解，p27kip1對細胞周期的抑制作用被減弱，從而導(dǎo)致了乳腺癌細胞正常生長周期調(diào)控失效，為乳腺癌細胞呈無節(jié)制生長提供環(huán)境，為預(yù)后不良的參考指標。TNM分期對p27 kip1和CKS1陽性表達有明顯影響，這與相關(guān)文獻報道結(jié)果相符〔10〕。所以，通過檢測CKS1和p27 kip1的陽性表達也可推斷乳腺浸潤性導(dǎo)管癌的惡性程度。本研究提示，CKS1和p27kip1與老年女性乳腺浸潤性導(dǎo)管癌有密切關(guān)系。如果將二者的表達與乳腺浸潤性導(dǎo)管癌患者的TNM分期及其他臨床病理指標結(jié)合，可以作為臨床治療的指導(dǎo)和評價預(yù)后的相關(guān)參數(shù)。

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2 張 斌.老年人乳腺癌〔J〕.中國癌癥雜志，2005;15(5):422-5.

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5 Lee EK，Kim DG，Kim JS，et al.Cell-cycle regulator Cks1 promotes hepatocellular carcinoma by supporting NF-κB-dependent expression of interleukin-8〔J〕.Cancer Res，2011;7l(21):6827-35.

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7 Uehara N，Yoshizawa K，Tsubura A.Vorinostat enllances protein stability of p27 and p2l through negative regulation of Skp2 and Cksl in human breast cancer cells〔J〕.Oncol Rep，2012;28(1):105-10.

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10 Ishimura R，Osako T，Okumura Y，et al.Clinical significance of Ki-67 in neoadjuvant chemotherapy for primary breast cancer as a predictor for chemosensitivity and for prognosis〔J〕.Breast Cancer，2010;17(4):269-75.