宋秀平 劉 爽

遼寧省新民市人民醫(yī)院病理科，遼寧新民 110300

基底細胞樣乳腺癌分子分型的臨床意義

宋秀平 劉 爽

遼寧省新民市人民醫(yī)院病理科，遼寧新民 110300

目的 探討乳腺癌分子分型中基底細胞樣型的臨床病理特征和診斷意義。 方法 用免疫組化方法，觀察16例基底細胞樣乳腺癌的免疫表型的特點，研究該組乳腺癌表達基底細胞樣免疫表型與臨床病理特征和Ki67及P53表達的關系。 結果 基底細胞樣乳腺癌具有推進性生長，地圖樣壞死及組織學級別高的特點，免疫組化ER，PR，HER2為三陰性，對確定診斷的標記物CK14，CK5/6，及EGFR的表達結果：3例3項均陽性，4例表達CK14，CK5/6陽性，9例表達CK5/6陽性。 結論 基底細胞樣乳腺癌具有獨特的形態(tài)學特征，特殊的免疫表型CK5/6聯(lián)合EGFR在診斷中起決定性作用，Ki67及P53對判斷預后具有實際意義。

基底細胞樣乳腺癌；免疫表型；分子分型

乳腺癌已經(jīng)成為女性發(fā)病率最高的惡性腫瘤，具有高度異質性，即便是同種類型治療效果及預后也存在很大的差異。2000年Perou［1］應用基因芯片技術對乳腺癌的基因表型進行了研究，根據(jù)基因表達譜的差異對乳腺癌進行了分子分型：管腔型，正常乳腺樣型，HER-2高表達型和基底細胞樣型，其中基底細胞樣型因具有最高的增殖指數(shù)和不良的預后，引起了病理工作者的重視，Nielsen等［2］又研究出用免疫組化代替基因表型進行診斷的方法，乳腺癌分子分型被常規(guī)應用成為可能，為了幫助臨床工作者根據(jù)形態(tài)學特點及免疫表型有效地將基底細胞樣乳腺癌鑒別出來，本文通過對我院近4年發(fā)生的16例基底細胞樣乳腺癌進行回顧性研究，對免疫表型的選擇進行探討，進一步證實基底細胞樣乳腺癌分子分型的臨床意義。

1　資料與方法

1.1 一般資料

收集新民市人民醫(yī)院病理科2010年1月～2013年12月乳腺癌標本128例，從中選取已診斷具有基底細胞樣免疫表型的標本16例，其組織學分型為浸潤性導管癌14例，浸潤性微乳頭狀癌1例，髓樣癌1例。乳腺TNM分期：1期4例，2期10例，3期2例；細胞核級別：1級0例，2級9例，3級7例。有3例發(fā)生淋巴結轉移，其余13例未發(fā)生淋巴結轉移。

1.2 方法

標本均用10%中性甲醛固定，常規(guī)石蠟包埋，連續(xù)切片，我們對其進行ER，PR，HER-2，E-cadherin，Ki67，CK5/6重新標記，并進一步補充標記CK14，EGFR，P53。免疫組化采用Envision法，AEC顯色，即用型抗體均購于福州邁新生物技術開發(fā)公司，判定標準參考Gatalica［3］的H-Score：ER，PR，Ki67，P53為細胞核陽性，HER2，EGFR，E-cadherin為細胞膜陽性，CK5/6，CK14為細胞膜和細胞質陽性，染色強度依次為：無色，淡黃色，棕黃色，棕褐色，染色范圍陽性細胞百分比依次為：0，＜25%，25%～50%，＞50%。染色強度與染色范圍的乘積結果為免疫組化判讀結果：陰性，陽性，陽性結果又分為弱陽性（+），強陽性（++～+++）。

2　結果

2.1 臨床資料

患者均為女性，患者年齡為41～68歲，首發(fā)癥狀均為乳腺單發(fā)腫物，臨床觸診腫物硬，活動度差，腫物直徑在1.1～2.8cm之間，有3例手術時已經(jīng)發(fā)生淋巴結轉移，隨訪過程中16例基底細胞樣乳腺癌中，2年復發(fā)3例，有3例術后2～3年發(fā)生多處轉移。其余非基底細胞樣乳腺癌112例中，2年復發(fā)1例，3年中發(fā)生轉移的1例。隨訪過程中，復發(fā)或轉移的患者均到病理科借閱原始檔案資料。

2.2 形態(tài)學特征

組織學分型以浸潤性導管癌為主，共14例，浸潤性微乳頭狀癌1例，髓樣癌1例。癌細胞均表現(xiàn)為實性巢狀，片狀生長，無明顯腺管結構，癌細胞出現(xiàn)合體細胞樣細胞，核仁明顯，細胞間界限不清，有不同程度淋巴細胞浸潤，有12例呈推進性生長，10例出現(xiàn)地圖樣壞死，癌細胞核/質比高，組織學分級2～3級，還常見透明細胞，梭形細胞及鱗狀上皮分化。

2.3 免疫表型

16例基底細胞樣乳腺癌，經(jīng)過重新做免疫組化染色，結果與最初診斷是一致的，ER，PR，HER2，CKH，E-Cadherin，CK5/6，CK14，EGFR，Ki67，P53這9項的具體結果是：ER，HER-2均為陰性，PR陽性1例.陰性15例。CK5/6，CK14，EGFR三項都陽性的有3例，EGFR及CK14陽性的4例，9例表達CK5/6陽性（圖1、2）。E-Cadherin陽性，P53陽性，Ki67高表達（圖3、4）。

圖1 CK5/6×200 基底細胞樣乳腺癌中CK5/6在細胞膜和細胞質中陽性表達

圖2 CK5/6×200 非基底細胞樣乳腺癌中CK5/6在細胞膜和細胞質中陰性表達

圖3 Ki67×200 基底細胞樣乳腺癌中Ki67細胞核陽性高表達

圖4 Ki67×200 非基底細胞樣乳腺癌中Ki67細胞核陽性低表達

3　討論

總結文獻［4］及結合本次實驗結果發(fā)現(xiàn)基底細胞樣乳腺癌大多數(shù)組織學形態(tài)為浸潤性導管癌，也可以發(fā)生在其他特殊類型及化生性癌［5］，腫瘤邊緣為推擠性，有不同程度的壞死和淋巴細胞浸潤，癌細胞呈實性巢狀及緞帶狀，細胞異型明顯，具有細胞核異型性大，級別高的特點，這些特殊的組織學形態(tài)得到病理學者的一致認同，我們更多的目光是放在臨床病理診斷工作中更有意義的手段。

基底細胞樣乳腺癌是從分子角度上定義的，強調其具有一種獨立的乳腺癌基因表型，其形態(tài)學不具備診斷的決定性，很大程度上依賴于代替基因檢測的免疫表型測定，當今，乳腺癌檢測ER，PR，HER-2已經(jīng)成為常規(guī)項目，當出現(xiàn)二陰或三陰性［6］乳腺癌結果時，我們就要進一步加強CK5/6，CK14及EGFR［7］的補充檢測，這3種抗體是已經(jīng)得到普遍的認可和應用。正常乳腺基底樣/及肌上皮樣細胞表達基底細胞型角蛋白，基底細胞樣乳腺癌與其具有相似的免疫表型，包括CK5/6，CK14，本組統(tǒng)計結果與國內認可的診斷標準：ER，HER-2陰性，CK5/6和（或）EGFR陽性基本符合，結合形態(tài)學改變，我們可以確定本組基底細胞樣乳腺癌的診斷。對于髓樣癌具有相同的免疫組化結果，卻值得推敲，畢竟髓樣癌具有良好的預后與基底細胞樣乳腺癌是有差異的，我們可以懷疑免疫表型代替基因檢測的重合率，其分子分型的特異性指標還需要延伸。本組病例中，有9例對CK5/6強陽性表達，證實基底細胞樣乳腺癌最有效的角蛋白是CK5/6，符合CK5/6是基底細胞樣乳腺癌的特異性指標的報道［8］。EGFR在正常乳腺組織基底細胞層邊緣的間質細胞中表達，在基底細胞乳腺癌中也表達，CK5/6聯(lián)合EGFR和CK14構成一組標記物，可以完成對這一類乳腺癌的篩選。

128例乳腺癌中，發(fā)生基底細胞樣乳腺癌16例，占乳腺癌總數(shù)比例12.5%，與文獻報道基底細胞樣乳腺癌發(fā)生率10%～17%［9］是符合的。本組實驗統(tǒng)計數(shù)據(jù)認證了基底細胞樣乳腺癌的發(fā)生率的統(tǒng)計學意義。

基底細胞樣乳腺癌因其具有特殊的生物學行為和不良的臨床預后，已被列為一個單獨的亞型，在臨床及組織學分級一致的情況下，基底細胞樣乳腺癌的臨床緩解期和總生存期比其它乳腺癌要短，易早期復發(fā)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)轉移，有研究表明［10］，基底細胞樣乳腺癌惡性度高，還具有特殊的轉移途徑，易轉移到腦及內臟器官，而不是骨轉移。本次實驗結果中，16例基底細胞樣乳腺癌病人隨訪到3例復發(fā)，3例轉移，有2例轉移到肝臟及肺，有1例轉移至骨，這一結果對其轉移的特殊途徑不能完全一致，還需更多的研究去論證，復發(fā)的周期小于3年的病例達到18.75%，這與非基底細胞樣乳腺癌3年內復發(fā)偶見形成鮮明對比，這一結果更提醒我們加強日常工作中對其進行進一步的篩查。

P53［11］作為轉錄因子，可以保持基因的穩(wěn)定性，該基因突變是評估乳腺癌預后的重要因素。Ki67抗原的高表達反映了腫瘤細胞的增殖活性，作為獨立指標在判斷預后趨勢方面是有意義的，P53基因突變及Ki67在基底細胞樣乳腺癌中的高表達，提示了基底細胞樣乳腺癌的預后不良，具有高侵襲性的特點，從而認定其早期發(fā)生轉移是可能的。

在治療中，分子分型對治療方案的選擇提供更重要的參考價值，基底細胞樣乳腺癌對激素及三苯氧胺不敏感，治療手段單一，核心藥物是蒽環(huán)類，含有表阿霉素+環(huán)磷酰胺的化療方案［12］，可能有較高的無病生存時間，但目前對基底細胞樣乳腺癌治療敏感的化療藥物仍無明確報道，更多的是靶向治療的研究。目前在臨床病理診斷中，對基底細胞樣乳腺癌我們已經(jīng)開始在組織學分型之后，明確進行標注，但是，個體化治療的效果還不盡如人意，對于與激素息息相關的乳腺癌，抗體卻表現(xiàn)為三陰性，我們仍然期待對基底細胞樣乳腺癌與激素的必然聯(lián)系進行研究，尋找更有效的治療方法。

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Clinical significance of molecular typing of basal-like breast cancer

SONG Xiuping LIU Shuang
Department of Pathology，Xinmin People's Hospital，Xinmin 110300，China

Objective To investigate the clinicopathological features and diagnostic significance of the molecular typing of breast cancer. Methods The immunohistochemical method was used to observe the immune phenotype features of 16 cases of basal-like breast cancer and study the relationship between this group of breast cancer basallike immune phenotypes and the clinicopathological features and Ki67 and P53 expression. Results Basal-like breast cancer has the features of promoting growth，map-like necrosis and high histological grade. Immunohistochemistry showed that ER，PR and HER2 were all negative.The expression results of diagnostic markers CK14，CK5/6 and EGFR were as follows: 3 patients showed positive expression of all 3 markers，4 patients showed positive expression of CK 14 and CK5/6，and 9 patients showed positive expression of CK5/6. Conclusion Basal-like breast cancer has unique morphological features. Special immune phenotype CK5/6 combined with EGFR plays a decisive role in the diagnosis. Ki67 and P53 have practical significance for the prognosis.

Basal-like breast cancer；Immune phenotype；Molecular typing

R737.9

A

2095-0616（2014）06-21-03

2014-01-10）