趙長春 袁藝剛

【摘 ? 要】 麥冬為常見傳統(tǒng)中藥材，具有生津潤肺、養(yǎng)陰清熱等功效，多用于治療熱病傷津，心煩口渴等癥。近年來，國內(nèi)外學(xué)者對麥冬進(jìn)行了廣泛研究，從麥冬類植物中分得45種皂甘，21種高異黃酮等成分。臨床和藥理學(xué)研究表明麥冬湯劑及注射劑對于治療冠心病、心絞痛有一定療效，麥冬、山麥冬注射液能顯著提高小鼠的抗缺氧能力和抗實(shí)驗(yàn)性心律失常能力。本研究旨在建立一種麥冬酯類提取物的分離鑒定方法，將有助于麥冬類藥物的研究與開發(fā)。

【關(guān)鍵詞】 川麥冬;高異黃酮;甾醇;提取;分離;重結(jié)晶;結(jié)構(gòu)鑒定

【中圖分類號】 R282.5 ? ?【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】 A

2010年版中國藥典收裁百合科植物麥冬（Ophiopongo ?japonicus）一種。據(jù)文獻(xiàn)記載和實(shí)地調(diào)查，全國各地有以麥冬或野麥冬為名的沿階草屬（Ophiopion）和山麥冬屬（Liriope）植物多種。目前，國內(nèi)主要流通的是麥冬的塊根，約占46%。其中，大多為栽培品種，主產(chǎn)于四川綿陽、三臺(tái)和浙江慈溪、肖山地區(qū)，分別稱川麥冬和杭麥冬。近年來，產(chǎn)于湖北襄陽地區(qū)的湖北麥冬（Radix Liriopis Proliferae）銷售量逐年增多，約占31%，且野生資源豐富，有超過川麥冬和杭麥冬的趨勢。其他品種包括短葶山麥冬L.muscari （約占7%），山麥冬L.Spicata（約占4%）、沿階草O. Bodilieri（約占6%）、闊葉山麥冬L.Platyphulla（約占9%）的塊根。此外，還包括間型沿階草O.Intermedies、連葉沿階草O.Bockianus、短藥沿階草O.Angustifoliatus、四川沿階草O.Szochuanensis、狹葉沿階草O.Stenophyllus、西南沿階草O.Mairei等的塊根（約占7%），且多為數(shù)種植物塊根的混合品，主要為地方用藥[1，2]。本實(shí)驗(yàn)采用的是四川三臺(tái)產(chǎn)麥冬，即俗稱的川麥冬。

我國及日本學(xué)者做過大量研究，主要藥效成分有沿階草皂甘（ophiopogonin） A、B、C、D，b-谷甾醇，豆甾醇和酚類物質(zhì)（包括高異二氫黃酮類）等[3]。研究表明麥冬皂苷在抗心腦血管疾病、抗衰老、改善學(xué)習(xí)記憶障礙、抗腫瘤、抗輻射、抗炎、免疫調(diào)節(jié)、鎮(zhèn)咳、改善肝肺病理性損傷等方面具有一定藥理作用[4]。本實(shí)驗(yàn)是在對麥冬有效成分的追蹤下進(jìn)行了分離工作，以期變復(fù)雜的中藥成分為簡單的單一化合物。

1 ?儀器和試劑

400 Hz氫譜核磁儀，400 Hz碳譜核磁儀，硅膠柱，Sephadex LH-20柱;乙醇，乙醚，乙酸乙酯，正丁醇，氯仿，甲醇。

2 ?實(shí)驗(yàn)部分

2.1 ?提取 ?麥冬的提取過程為，取綿麥冬數(shù)十克用乙醇提取[5]，濃縮液呈咖啡色，無醇味。在2個(gè)大試劑瓶中用乙酸乙酯進(jìn)行萃取，前六次用量為1500ml，以后每次每瓶1000ml，共11次，取少量乙酸乙酯溶液揮干于紫外燈下檢查，無熒光則萃取完畢。乙酸乙酯層減壓濃縮，回收乙酸乙酯（T=32，P=0.13Mpa），濃縮液在蒸發(fā)皿中干燥，置于干燥器中得乙酸乙酯提取物約50g。

乳化層減壓回收乙酸乙酯，殘留水溶液收集在一起，與分液漏斗中用正丁醇單獨(dú)萃取至醋酐-濃硫酸反應(yīng)陽性現(xiàn)象不明顯。

水層在大試劑瓶中用正丁醇萃取[6]，共13次，第一次每次每瓶各用1500ml，以后12次每次每瓶各用1000ml，取少量正丁醇溶液和水溶液分別揮干，作醋酐-濃硫酸反應(yīng)，兩者的陽性現(xiàn)象均不明顯，則萃取完畢。（a）水層是橙紅色，澄明度好。（b）正丁醇層件壓濃縮，回收正丁醇。

2.2 ?分離 ?乙酸乙酯提取物濕重50g，取其中的20g過硅膠柱[7]。用400g硅膠進(jìn)行柱層析，分別以氯仿，氯仿-甲醇9：1，8：2，7：3，甲醇洗脫。收集得到20個(gè)流分。第7份用石油醚洗去強(qiáng)親脂部分，再用甲醇洗去極性較大的部分，余下部分用氯仿溶解，過Sephadex LH-20柱，脫去色素，濃縮，用甲醇熱溶重結(jié)晶，得淺黃色針晶1#。第12部分用石油醚洗去強(qiáng)親脂部分，再用甲醇洗去極性較大部分，得到白色固體。此固體用95%乙醇進(jìn)行熱溶，過濾，濃縮，得白色粉末2#。第8份，先用石油醚洗去強(qiáng)親脂部分，再用甲醇洗去極性較大部分。剩余部分用氯仿溶解，過Sephadex LH-20柱，得4份樣，將第3份再過Sephadex LH-20柱純化，得到化合物3#。

2.3 ?結(jié)構(gòu)鑒定 ?白色粉末2#，它的NMR圖譜與b-谷甾醇相同，在薄層層析中其Rf值與b-谷甾醇完全一樣，故認(rèn)為其為b-谷甾醇。

淺黃色針晶1#，從核磁譜可看出，淺黃色針晶是由兩個(gè)化合物所構(gòu)成，二者的比例是0.78：1;6，8-二甲基-5，7-二羥基-4甲氧基-二氫高異黃酮（a）和6，7-二甲基-5，7-二羥基-2，4-二羥基-二氫高異黃酮（b）?；衔铮╝）的CNMR為2-C 69.4，3-C 46.8，4-C 198.4，5-C158.3，6-C 104.6， 7-C 160.3， 8-C 101.5， 9-C 158.3， 10-C 101.5，11-C 32.6，6，8-CH3 8.5，1-C 130.6， 2-C 130.6， 3-C 114.5，4-C 158.3，5-C 114.5，6-C 130.6，4-Ome 55.2.其HNMR有2A-4.3（dd），2B-4.2（dd），3H-3.0（dd） ?11A-3.3（dd），11B-2.8（dd）， 6-CH3-2.3，8-CH3-2.4， ?4OMe-3.7， ?5-OH-13.1，Φ-H 6.0， 6.7， 6.8， 7.0.從差譜中可看出，混合物中甲氧基是在黃酮B環(huán)的4位?；衔铮╞）的CNMR為2-C 69.4，3-C 46.9，4-C 198.6，5-C 158.9，6-C 104.6，7-C164.2，8-C 102.2，9-C 158.3，10-C 101.5，11-C 32.1，1-C 114.5，2-C 158.9，3-C 103.4，4-C 156.0，5 -C ?108.6，6-C 130.8，6，8-CH3 8.8. 其HNMR有2A-4.3（dd），2B-4.2（dd），3H-2.8，11A-3.3（dd）， ?11B-3.8（dd），6-CH3 2.4，8-CH3 2.4，5-OH 13.1，Φ-H 6.7， 6.7， 6.8， 7.0.從氫譜、碳譜、二維譜、差譜數(shù)據(jù)可初步得出化合物（a）和（b）的結(jié)構(gòu)[8]。又從CA上未查到化合物（b）的結(jié)構(gòu)式，故初步認(rèn)為化合物（b）是一個(gè)新化合物，有待進(jìn)一步研究?；衔?#，從其氫譜判斷，可能為一長鏈脂肪烯。

3 ?展望

從麥冬的相關(guān)資料可看出，麥冬的有效成分主要是二氫高異黃酮。有資料報(bào)道從麥冬中已分得的二氫高異黃酮為27個(gè)[9]，其中大有得到新化和物的可能。希望麥冬的乙酸乙酯部分能繼續(xù)研究，以獲得新的有效的化合物。同時(shí)正丁醇部分能得到相應(yīng)的分離鑒定。

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