李剛 王艷梅

【摘要】目的：確定刺五加注射液所含物質(zhì)的分子量范圍。方法：采用高效液相凝膠色譜法，分別用細(xì)胞色素（分子量13000）、胸腺肽（分子量為3108）和人胰島素（分子量5805）標(biāo)準(zhǔn)品作為對照，確定刺五加注射液所含物質(zhì)的分子量范圍。結(jié)果：刺五加注射液中各成分分子量均小于3108。

【關(guān)鍵詞】刺五加注射液分子量范圍細(xì)胞色素胸腺肽人胰島素

【中圖分類號】R-0 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】B 【文章編號】1671-8801（2015）02-0327-01

刺五加注射液是由五加科植物刺五加提取加工精制而成的滅菌水溶液，具有平補(bǔ)肝腎、益精壯骨的作用。臨床上主要用于治療各種心腦血管疾病。刺五加注射液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)被《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)收載》。刺五加成分復(fù)雜，主要含有刺五加皂苷、黃酮苷類、異嗪皮啶及其苷類、丁香苷及多糖等。本文根據(jù)物質(zhì)成分由于分子量大小的不同，在凝膠色譜柱中的行為不同，分子量小的物質(zhì)，會進(jìn)入色譜柱空隙中，分子量大的無法進(jìn)入空隙，所以在洗脫過程中，分子量大的物質(zhì)行程短，較分子量小的成分先出峰的原理，采用高效液相色譜法，用不同分子量的標(biāo)準(zhǔn)品做對照，根據(jù)不同成分的洗脫時間，確定刺五加注射液所含成分的分子量范圍。

1儀器和試藥

1.1 儀器安捷倫1100液相色譜儀型號凝膠色譜柱（TSK GEL2000SWx17.8mm×300mm，5μm） XX紫外檢測器

1.2 試藥乙腈色譜純，三氟醋酸為分析純。對照品：細(xì)胞色素C，分子量13000；胸腺肽，分子量3108；人胰島素，分子量5805。

2 方法與結(jié)果

2.1大分子物質(zhì)的確定

照高效液相色譜法（《中國藥典》2010版二部附錄V D）測定。

2.1.1色譜條件及系統(tǒng)適用性用凝膠色譜柱（TSK GEL2000SWx17.8mm×300mm，5μm；以三氟醋酸-乙腈-水（0.05：10：90）為流動相；檢測波長214nm。理論板數(shù)按細(xì)胞色素C計算應(yīng)不低于2000.

2.1.2對照品溶液制備取細(xì)胞色素C（分子量為13000）適量，加流動相制成每1ml中約含1mg的溶液，作為對照品溶液。

2.1.3供試品取刺五加注射液三批。

2.1.4測定法取對照品溶液與供試品溶液各20μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。

2.1.5結(jié)果對照色譜圖中各成分的保留時間，檢驗結(jié)果見下表。

2.2分子量范圍的確定

2.2.1色譜條件及系統(tǒng)適用性用凝膠色譜柱（TSK GEL2000SWx17.8mm×300mm，5μm）；以三氟醋酸-乙腈-水（0.05：10：90）為流動相；流速為每分鐘0.5ml；檢測波長214nm。

2.2.2對照品溶液制備取胸腺肽（分子量為3108）和人胰島素（分子量5805）適量，分別加流動相制成每1ml中約含1mg的溶液，作為對照品溶液。

2.2.3供試品取刺五加注射液三批。

2.2.4測定法分取對照品溶液與供試品溶液各20μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。

2.2.5結(jié)果對照色譜圖中各成分的保留時間，檢測結(jié)果記錄于下表

3 結(jié)果分析

通過在相同的試驗條件下對照色譜圖中各成分的保留時間分析，可以知道分子量的相對大小。

實驗方法1表明，檢測三批刺五加注射液樣品各成分峰的保留時間均大于細(xì)胞色素C的保留時間，可以認(rèn)為三批刺五加注射液中成分的分子量都小于細(xì)胞色素C的分子量。

實驗方法2表明，檢測三批刺五加注射液樣品所有成分峰的保留時間都大于人胰島素、胸腺肽的保留時間，可以認(rèn)為三批刺五加注射液中主要成分的分子量都小于人胰島素、胸腺肽的分子量。

4 結(jié)論

刺五加注射液中成分分子量均小于13000，不含有大分子物質(zhì)；人胰島素分子量為5808、胸腺肽分子量為3108，確認(rèn)刺五加注射液中各成分分子量均小于3108。

參考文獻(xiàn)：

[1]《中華人民共和國藥典》2010版一部

[2]《中華人民共和國藥典》2010版二部

[3]《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》