麥義鋒

（丹東市中心血站成分科，遼寧 丹東 118002）

冰凍機(jī)采血小板融化后析出原因的分析及解決方法

麥義鋒

（丹東市中心血站成分科，遼寧 丹東 118002）

目的 通過冰凍機(jī)采血小板融化后析出的原因分析，找出對(duì)應(yīng)的解決方法，降低冰凍機(jī)采血小板融化析出的報(bào)廢，提高冰凍機(jī)采血小板的使用效率，為患者搶救贏得時(shí)間。方法 分析對(duì)比我站2011年～2013年冰凍血小板在融化時(shí)的析出在制備、冰凍、儲(chǔ)存、解凍過程中各個(gè)環(huán)節(jié)與融化后析出的關(guān)系，并于2014年調(diào)整后的冰凍血小板數(shù)據(jù)對(duì)比。結(jié)果 冰凍儲(chǔ)存溫度控制在-75～-85 ℃；計(jì)算好冰凍血小板的加藥量；融化溫度在42 ℃，融化時(shí)間不超過10 min；加藥時(shí)間控制在10 min，并且加藥過程中不斷的混勻；控制每次冰凍血小板的數(shù)量；控制每次存放冰凍血小板的冰箱開啟的時(shí)間間隔等都能有效的降低冰凍血小板在融化時(shí)的析出問題。結(jié)論 通過編寫詳細(xì)有效的操作規(guī)程，并嚴(yán)格執(zhí)行，控制好各個(gè)環(huán)節(jié)的關(guān)鍵控制點(diǎn)，可以大大降低冰凍血小板在融化時(shí)析出報(bào)廢或完全控制無析出報(bào)廢現(xiàn)象，提高冰凍機(jī)采血小板的使用效率，為患者搶救贏得時(shí)間。

冰凍血小板；融化析出；質(zhì)量控制；解決方法

新鮮的血小板在（22±2） ℃的環(huán)境中能保存5 d，因臨床患者需求的不同，會(huì)導(dǎo)致一部分新鮮血小板的過期浪費(fèi)，因此深低溫（-80 ℃）[1]冰凍保存，能保證血小板保存1年，避免了新鮮血小板的過期浪費(fèi)，又能在患者需要搶救時(shí)，及時(shí)的通過冰凍血小板的融化來滿足供應(yīng)。我站開展冰凍血小板項(xiàng)目較晚，在實(shí)際工作中發(fā)現(xiàn)有融化后冰凍血小板的析出現(xiàn)象，造成冰凍血小板的浪費(fèi)，影響了臨床供應(yīng)。經(jīng)過幾年的分析研究，發(fā)現(xiàn)了冰凍血小板融化析出的問題所在，找出了質(zhì)量的關(guān)鍵控制點(diǎn)，有效解決析出問題，現(xiàn)經(jīng)驗(yàn)總結(jié)如下。

1　一般資料

1.1儀器和試劑：Amicus血細(xì)胞分離機(jī)（美國百特），-80 ℃超低溫冷凍冰箱（三洋），奧斯邦ph900血小板保存箱（美國），細(xì)胞專用搖床（廣東新普），二甲基亞砜DMSO（美國），一次20 mL針管（山東威高），一次性加藥件（四川南格爾），PH-IA恒溫循環(huán)解凍箱（山東普華）。

1.2血小板篩選：血小板供者符合國家規(guī)定《獻(xiàn)血者健康檢查標(biāo)準(zhǔn)》（GB-18467-2011），血小板質(zhì)量符合國家規(guī)定《全血及成分血要求》（GB-18469-2012）。

2　方法與結(jié)果

2.12011年～2014年血小板冰凍數(shù)量及報(bào)廢原因，見表1。

表1　2011年～2014年血小板冰凍數(shù)量及報(bào)廢原因

2.2逐項(xiàng)析出原因分析及解決方法

2.2.1加藥量計(jì)算錯(cuò)誤：從表1數(shù)據(jù)分析，加藥量計(jì)算錯(cuò)誤發(fā)生較少，也是完全可以避免的，由于工作人員的粗心，稱重和計(jì)算時(shí)發(fā)生錯(cuò)誤，未達(dá)到要求的DMSO濃度5%左右，沒有起到抑制冰晶形成的作用，從而在融化冰凍血小板時(shí)析出。解決方法：從稱重到計(jì)算藥量開始由2名工作人員負(fù)責(zé)，1人具體操作，1人復(fù)核，完全可以避免計(jì)算藥量和加藥時(shí)的錯(cuò)誤。

2.2.2加藥速度過快和未混勻：從表1數(shù)據(jù)分析，該錯(cuò)誤呈逐年下降趨勢，主要原因是工作人員在開始冰凍血小板操作不熟練，責(zé)任心不強(qiáng)沒有控制加藥速度，加藥時(shí)間掌握不好，加藥前后血袋內(nèi)氣體沒有排凈，還有就是在加藥過程中細(xì)胞專用搖床轉(zhuǎn)速錯(cuò)誤。解決方法：對(duì)操作人員落實(shí)責(zé)任，加強(qiáng)操作技巧和手法的培訓(xùn)，因在加入DMSO過程中，水合作用會(huì)釋放大量熱能，致血漿蛋白和血小板膜蛋白變性。所以必須控制加藥速度在1 mL/min左右，加藥時(shí)間在10 min左右，加藥時(shí)在細(xì)胞專用搖床上操作，轉(zhuǎn)數(shù)在100～120轉(zhuǎn)/分，通過充分的混勻和稀釋藥液來降低加藥時(shí)產(chǎn)生的熱量。加藥前后，盡量排盡袋內(nèi)空氣，加藥時(shí)的振蕩會(huì)使殘余的空氣形成大量氣泡，氣泡破裂產(chǎn)生碎片易激活凝血系統(tǒng)，導(dǎo)致血小板聚集而析出。

2.2.3冰凍溫度不足：從表1數(shù)據(jù)分析，該項(xiàng)原因?qū)е碌奈龀鰣?bào)廢最多，原因主要是冰箱的溫度沒有達(dá)到-75～85 ℃，未能在最短時(shí)間內(nèi)固化血小板。因水分子在不同低溫條件下改變分子排列，使結(jié)晶體發(fā)生變化，還可能造成對(duì)細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì)的破壞，導(dǎo)致血小板溶化后析出[2]。另外儲(chǔ)存溫度波動(dòng)范圍較大，血小板內(nèi)冰晶反復(fù)形成，對(duì)血小板可造成機(jī)械性損傷，又因細(xì)胞內(nèi)外滲透壓的迅速變化也可造成血小板胞膜化學(xué)損傷，導(dǎo)致融化后析出[3]。

導(dǎo)致冰箱溫度不足的原因：①在我站開始冰凍血小板時(shí)的冰箱最低溫度為-65 ℃，未達(dá)到冰凍血小板的溫度要求。②一次冰凍血小板的數(shù)量過多（≥3袋），冰箱的溫度波動(dòng)范圍較大，未能短時(shí)間固化血小板。經(jīng)過多次實(shí)踐1次冰凍2袋，冰箱溫度波動(dòng)變化不大，冰箱制冷溫度控制較好（受冰箱的制冷能力控制）。③開啟冰箱門過頻，導(dǎo)致溫度變化波動(dòng)過大。④放入冰箱的血小板重疊存放，導(dǎo)致局部溫度達(dá)不到冰凍要求。解決方法：必須保證冰箱的有效制冷溫度在（80± 5） ℃；同一時(shí)間最多冰凍血小板數(shù)量2袋；每次開門間隔時(shí)間最少1 h或冰箱溫度達(dá)到-80 ℃以下；存放冰凍血小板時(shí)平整放入包裝盒內(nèi)，單袋擺平，不可重疊。定期對(duì)低溫冰箱進(jìn)行除霜，保證冰凍溫度，化霜期間應(yīng)將冰凍血小板放入另一臺(tái)-80 ℃冰箱中，不應(yīng)放入溫度過高的冰箱中。

2.3.4融化溫度、時(shí)間錯(cuò)誤：從表1數(shù)據(jù)分析，該項(xiàng)原因?qū)е碌膱?bào)廢也可以避免，發(fā)生的次數(shù)也少，主要是工作人員不認(rèn)真操作，沒有查看水浴箱的溫度和解凍時(shí)間。解決方法：落實(shí)工作責(zé)任制，加強(qiáng)工作人員的責(zé)任心，配備專用的PH-IA恒溫循環(huán)解凍箱解凍血小板，從冰箱取出冰凍血小板迅速放入水浴箱中，水要浸沒血小板保存袋，溫度設(shè)置為42 ℃，時(shí)間10 min，自動(dòng)振蕩。融化好的血小板要保存在奧斯邦ph900血小板保存箱，溫度設(shè)定在（22±2） ℃。

2.3.5原因不詳：僅在2012年發(fā)生，同一獻(xiàn)血者的血小板分別3次冰凍融化后均析出（冰凍操作人員和融化操作人員均不同），經(jīng)追溯分析并沒發(fā)現(xiàn)差錯(cuò)和不符合操作規(guī)程的環(huán)節(jié)，冰凍溫度控制到位，融化溫度控制到位，融化設(shè)備正常。又通過獻(xiàn)血檔案查詢?cè)摣I(xiàn)血者捐獻(xiàn)血小板30多單位，獻(xiàn)血者符合《獻(xiàn)血者健康檢查標(biāo)準(zhǔn)》，采集過程正常，捐獻(xiàn)的血小板質(zhì)量符合國家規(guī)定《全血及成分血要求》。該獻(xiàn)血者的血小板冰凍反復(fù)析出，具體原因不詳，暫無頻繁捐獻(xiàn)血小板冰凍析出資料文獻(xiàn)報(bào)道，有待進(jìn)一步研究分析析出原因。解決方法：避免該獻(xiàn)血者捐獻(xiàn)的血小板再次冰凍。

2.3.6融化后運(yùn)輸問題：從表1數(shù)據(jù)分析，該項(xiàng)原因?qū)е碌膱?bào)廢完全可以避免，僅在2011年和2012年發(fā)生，因臨床工作人員未認(rèn)真聽取我站血庫人員的告知，導(dǎo)致運(yùn)輸過程中的溫度未控制在（22±2） ℃，最終到達(dá)床頭時(shí)發(fā)生血小板析出而報(bào)廢。解決方法：血庫工作人員認(rèn)真詳細(xì)告知取血人員冰凍血小板注意事項(xiàng)，配備專用的血小板運(yùn)輸箱。血站有義務(wù)對(duì)臨床用血單位工作人員進(jìn)行血液和血小板相關(guān)知識(shí)的培訓(xùn)和指導(dǎo)。

2.4結(jié)果：經(jīng)過幾年的摸索和總結(jié)經(jīng)驗(yàn)，我站在冰凍血小板工作上取得很大的進(jìn)步，從表1的數(shù)據(jù)分析可以看出，2014年8月以前實(shí)現(xiàn)冰凍血小板融化析出零報(bào)廢。

3　討 論

在冰凍血小板的操作中，加強(qiáng)工作人員的責(zé)任心，做好上崗前的培訓(xùn)和操作注意事項(xiàng)的講解，嚴(yán)格控制各個(gè)環(huán)節(jié)的關(guān)鍵控制點(diǎn)，按照操作規(guī)程認(rèn)真操作，完全可以降低冰凍血小板的析出報(bào)廢問題。避免寶貴的血液資源浪費(fèi)，為患者搶救贏得時(shí)間。

[1] 郭美媛,彭光平,肖萍.吉安市冰凍血小板臨床應(yīng)用情況[J].中國輸血雜志,2009,22(5):409.

[2] 張玉芬.溫度波動(dòng)引起冰凍血小板融化后出現(xiàn)絮狀物58例分析[J].醫(yī)學(xué)理論與實(shí)踐,2009,22(3):333-334.

[3] 劉景漢,歐陽錫林,呂留彩,等.低溫保存血小板胞內(nèi)冰晶形成溫度測定[J].中國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志,2002,10(6):574.

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1671-8194（2015）33-0292-02