李曉林，王相芹，劉杉杉，劉　陽，李明義

（山東信得科技股份有限公司，山東青島　266061）

山東和河北部分地區(qū)四種豬病的血清學(xué)調(diào)查

李曉林，王相芹，劉杉杉，劉陽，李明義

（山東信得科技股份有限公司，山東青島266061）

［目的］了解山東和河北部分地區(qū)豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征、豬偽狂犬、豬圓環(huán)病毒病的發(fā)病情況。［方法］用間接ELISA方法對144個(gè)規(guī)?；B(yǎng)豬場的2 008份豬血清進(jìn)行抗體水平檢測。［結(jié)果］兩省豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征、偽狂犬中和（gB基因）、偽狂犬病毒野毒感染（gE基因）、圓環(huán)病毒病的抗體平均陽性率分別為：89%～92%、87%、92%～95%、33%～40%和76%。各階段豬群的豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征、豬偽狂犬中和（gB基因）抗體陽性率普遍較高，都在80%以上；偽狂犬野毒（gE基因）抗體陽性率在14%～90%之間，其中流產(chǎn)母豬的抗體陽性率最高，為90%；1～4周的仔豬圓環(huán)抗體陽性率為76%（152/199），4～10周的保育豬的抗體陽性率最低，為67%（327/489）。［結(jié)論］這四種豬病的抗體陽性率較高，免疫豬基本能得到保護(hù)，但在個(gè)別豬場仍有發(fā)病，可能與免疫失敗、新流行毒株的出現(xiàn)、繼發(fā)感染等因素有關(guān)。提示各大豬場要針對實(shí)際情況，制定出嚴(yán)格的綜合性防控措施。

規(guī)?；i場；豬瘟；豬繁殖與呼吸綜合征；豬偽狂犬；圓環(huán)病毒??；血清學(xué)檢測；間接ELISA

近年來，由于我國的養(yǎng)豬規(guī)模和數(shù)量不斷擴(kuò)張、飼養(yǎng)密度日益增大，加之生產(chǎn)周轉(zhuǎn)加快、健康養(yǎng)殖技術(shù)滯后等原因，造成部分地區(qū)多種豬病流行，尤其是病毒性傳染病。此類疾病的特點(diǎn)是傳播速度快、流行地區(qū)廣、危害性大。針對上述情況，2013年12月至2015年5月，選取了我國北方地區(qū)有代表性的山東省和河北省的144個(gè)規(guī)模化豬場進(jìn)行了流行病學(xué)調(diào)查與統(tǒng)計(jì)分析。由于抗體水平是反映豬群感染狀態(tài)或免疫狀態(tài)的重要指針［1］，我們從各豬場按10%～20%的比例隨機(jī)采集不同日齡段豬的血樣，進(jìn)行豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征、豬偽狂犬、豬圓環(huán)病毒病的抗體檢測，以便了解河北和山東部分地區(qū)規(guī)模化養(yǎng)豬場這四種豬病免疫效果和感染狀況，為凈化豬場和控制疾病的蔓延提供依據(jù)。

1　材料與方法

1.1樣本采集

從144個(gè)豬場共采集豬血清2 008份（仔豬199份、育肥豬489份、保育豬255份、后備公豬92份、后備母豬277份、妊娠母豬327份、斷奶母豬248份、流產(chǎn)母豬121份），主要來自河北省的保定、邢臺、衡水、邯鄲、唐山等市以及山東省的濰坊、臨沂、煙臺、威海、聊城、青島、淄博等市。

1.2檢測用試劑

豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征、豬偽狂犬 ELISA抗體檢測試劑盒購自北京愛德士元亨生物科技有限公司；豬圓環(huán)病毒病ELISA抗體檢測試劑盒購自深圳市康百德生物科技有限公司。

1.3檢測方法

1.3.1血清的制備。按照常規(guī)方法從前腔靜脈或耳靜脈采血，每頭豬4～5ml，置入4℃冰箱過夜或37℃培養(yǎng)箱2h，待淡黃色血清析出后，1 500r/min離心10min，取上清于滅菌的離心管，置于4℃或-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.2ELISA檢測。采用間接ELISA方法，根據(jù)試劑盒說明書進(jìn)行操作，將待檢豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征、圓環(huán)病毒病的血清按1∶40倍稀釋，偽狂犬病的血清按1∶2倍稀釋。根據(jù)說明書進(jìn)行結(jié)果判定。

2　檢測結(jié)果

2.1兩省情況比較

檢測偽狂犬病毒gB基因和gE基因抗體是為了區(qū)別免疫抗體水平與偽狂犬病野毒感染（采樣豬場均采用偽狂犬gE基因缺失活疫苗免疫），從表1、表2可知，河北省和山東省偽狂犬（gB基因）中和抗體平均陽性率都最高，平均為92%（563/611）和95%（1 329/1 397），二者差異不顯著（P＞0.05）；兩省的偽狂犬病野毒（gE基因）抗體陽性率較低，平均為33%（204/611）和40%（559/1 397），檢出204頭和559頭野毒抗體陽性豬，二者差異顯著（P＜0.05）；豬瘟平均抗體陽性率為92%（561/611）和89%（1 247/1 397），二者差異不顯著（P＞0.05）；豬繁殖與呼吸綜合征和圓環(huán)病毒病兩省的平均抗體陽性率相同，分別為87%和76%，差異不顯著（P＞0.05）。

表1　河北部分地區(qū)豬病血清學(xué)抗體檢測結(jié)果

表2　山東部分地區(qū)豬病血清學(xué)抗體檢測結(jié)果

表3　各階段豬群豬病血清學(xué)抗體檢測結(jié)果

2.2不同階段豬群抗體陽性率情況

從表3可知，各階段豬群的豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征、豬偽狂犬中和（gB基因）抗體陽性率普遍較高，都在80%以上；不同階段的豬群都存在偽狂犬野毒（gE基因）感染的現(xiàn)象，抗體陽性率在14%～90%之間，兩省共檢出gE基因抗體陽性血清763份，陽性率為38%，其中流產(chǎn)母豬的抗體陽性率最高，為90%；1～4周的仔豬圓環(huán)抗體陽性率為76%（152/199），4～10周的保育豬的抗體陽性率最低，為67%（327/489）。

3　討論與結(jié)論

3.1對2008份豬血清四種病檢測結(jié)果顯示，每一種病的抗體陽性率在兩省之間差異不大，說明這些豬場在疾病流行程度、疫苗免疫效果和感染狀況具有相同或相近的規(guī)律。表3中的結(jié)果顯示，圓環(huán)抗體陽性率具有一定的規(guī)律，隨著周齡的增長，抗體陽性率先下降后上升，這與郎洪武、宋建國、林琳等［2-4］報(bào)道的結(jié)果相似。仔豬的抗體陽性率比保育豬高，因?yàn)樽胸i通過初乳獲得的母源抗體較高；斷奶后，仔豬的母源抗體隨著日齡的增長不斷被消耗，到達(dá)保育豬階段，血清陽性率最低，此時(shí)易導(dǎo)致豬群發(fā)生感染，到了后期的育肥階段，抗體陽性率又慢慢升高［5］。大于20周的成年豬抗體水平隨著日齡的增長而升高，一直達(dá)到穩(wěn)定的抗體水平。流產(chǎn)母豬的抗體陽性率相對較低，平均為73%（88/121），可能是因?yàn)橐呙缧Ч患选⒚庖邥r(shí)期不恰當(dāng)、處于疾病流行期、機(jī)體抵抗能力差等因素。

3.2表2中的結(jié)果顯示，山東的偽狂犬病野毒（gE基因）抗體陽性率在2013年12月至2014年2月的檢出率最低，未檢測出野毒陽性豬，3月至5月檢出的陽性率也很低，僅為6%（9/155），說明這一時(shí)間段偽狂犬病疫苗免疫效果最好，而且豬場安全衛(wèi)生防護(hù)工作做得最好。流產(chǎn)母豬的偽狂犬病野毒（gE基因）抗體陽性率最高，高達(dá)90%，說明妊娠母豬流產(chǎn)的主要原因是感染了偽狂犬病毒；另一方面，可能有其他不確定因素造成母豬流產(chǎn)，流產(chǎn)之后的母豬免疫力差，共濟(jì)失調(diào)，致使偽狂犬病病毒趁虛而入，發(fā)生感染。豬場應(yīng)及時(shí)淘汰偽狂犬野毒抗體陽性豬，達(dá)到全面凈化豬場和控制疾病的擴(kuò)散的目的。

3.3從血清檢測結(jié)果上來看，豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征、豬偽狂犬病（gB基因）、圓環(huán)病毒病豬的抗體陽性率較高，基本能保護(hù)豬群免受病毒侵襲，但個(gè)別豬場仍暴發(fā)疾病。從臨床癥狀和剖檢結(jié)果上來看，可能與疫苗免疫失敗、新流行毒株的出現(xiàn)、繼發(fā)感染、免疫抑制等因素有關(guān)。建議豬場養(yǎng)殖人員在疫病防控方面，不但要從抗體水平高低方面考慮，還要根據(jù)規(guī)?；i場的實(shí)際情況，選用合適的疫苗。

3.4各豬場對疑似病例應(yīng)該及時(shí)隔離淘汰［6-7］，防止并發(fā)癥的發(fā)生，特別是偽狂犬野毒感染和圓環(huán)病原的感染都可以侵害豬群的免疫系統(tǒng)，導(dǎo)致豬群出現(xiàn)免疫抑制，使得其他病原的繼發(fā)性感染變得更加容易，給養(yǎng)豬業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失［8-9］。應(yīng)針對各大豬場的實(shí)際情況，制定出嚴(yán)格的綜合性防控措施。定期給各日齡段的豬群免疫是預(yù)防疾病的主要參考文獻(xiàn)：

手段，另外，搞好飼養(yǎng)管理與衛(wèi)生消毒工作，能增強(qiáng)豬群的抗病能力。要防止疫病的發(fā)生和傳播，加大流行病學(xué)調(diào)查的研究力度，加強(qiáng)豬群疾病檢測，做到及時(shí)診斷治療。

［1］Alblna E， Madec F， Cariolet R， et al. Immune response and persistence of the porcine reproductive and respiratory syndrome virus in infected pigs and farm units ［J］. Vet Rec，1994，134（27）：567-573.

［2］郎洪武，張廣川，吳發(fā)權(quán)，等.斷奶豬多系統(tǒng)衰弱綜合征血清抗體檢測［ J］.中國獸醫(yī)科技，2000，30（3）：3-5.

［3］宋建國，高生智，魏潤生.規(guī)?；i場豬圓環(huán)病毒2型感染的血清學(xué)調(diào)查［J］.中國獸醫(yī)科技，2004，34（12）：26-27.

［4］林琳，江斌，吳勝會(huì)，等.2004年福建省部分地區(qū)豬圓環(huán)病毒病血清學(xué)調(diào)查［J］.福建畜牧獸醫(yī)，2005，27（3）：19-20.

［5］趙津， 張小敏， 周斌， 等. 2008～2010年華東部分地區(qū)豬圓環(huán)病毒2型感染血清學(xué)調(diào)查［J］.中國動(dòng)物傳染病學(xué)報(bào)， 2010，18（6）：49-52

［6］王海霞，鄭素君，盧黎明，等.豬圓環(huán)病毒病的流行病學(xué)與防控措施［ J］.浙江畜牧獸醫(yī)，2006，26（4）：10-11.

［7］甘曉峰.豬圓環(huán)病病毒防制技術(shù)［ J］.疫病防制，2010，35（7）：24-25.

［8］Calsamiglia M， Segales J， Quintana J， et al. Detection of porcine circovirus type 1 and 2 in serum and tissue samples of pigs with and without postweaning multisystemic wasting syndrome［J］.J Clin Microbiol，2002，40（6）：1848-1850.

［9］Chianini F，Majo N，Segales J，et al. Immunohistochemical characterization of PCV2 associate lesions in lymphoid and non-lymphoid tissues of pigs with natural postweaning multisystemic wasting syndrome（PMWS）［J］.Vet Immunol Immunopathol，2003，94（6）：63-75.

（責(zé)任編輯：王偉濤）

Serological Investigation and Analysis of Four Swine Viral Diseases in Large-scale Swine Farms in Parts of Shandong and Hebei Provinces

Li Xiaolin， Wang Xiangqin， Liu Shanshan， Liu Yang， Li Mingyi
（Shandong Sinder Technology Co.，Ltd.，Qingdao，Shandong，266061）

［Objective］ In order to obtain a primary understanding of classical swine fever， porcine reproductive and respiratory syndrome virus（PRRSV）， peudorabies and porcine circovirus antibody status in large-scale swine farms in parts of Shandong and Hebei provinces. ［Methods］ 2 008 swine sera samples from 144 large-scale farms were examined with indirect ELISAs for antibodies to the 4 mentioned viral diseases. ［Results］ The average positive rate of CSFV antibody was 89%～92%， the average positive rate of PRRSV antibody was 87%， the average positive rate of the PRV neutralizing antibody（gB gene） was 92%～95%， the average positive rate of the wild PRV antibody（gE gene）was 33%～40%， and the average positive rate of the PCV antibody was 76%. ［Conclusion］ The antibody positive rates of the 4 swine diseases were high， which could basically protect the herd from virus infection， but these diseases occurred in few individual farms. This was possibly due to vaccination failure， emergence of new endemic strains and secondly infections， suggesting that the swine farms should formulate strict and integrated control measures according to their actual conditions.

large-scale swine farm；classical swine fever；porcine reproductive and respiratory syndrome；peudorabies；porcine circovirus；serological detection；indirect ELISA

S852.5+3

B

1005-944X（2015）09-0004-04

王相芹