孫　明

（民勤縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，甘肅民勤　733399）

甘肅省河西五市重大動(dòng)物疫病免疫效果評(píng)價(jià)與分析

孫明

（民勤縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，甘肅民勤733399）

為評(píng)估甘肅省河西五市2015年春季重大動(dòng)物疫病集中免疫效果，在河西五市共采集強(qiáng)制免疫畜禽血清640份，對(duì)家禽和家畜血清分別采用微量紅細(xì)胞凝集抑制試驗(yàn)（HI）和酶聯(lián)免疫吸附試（ELISA）驗(yàn)進(jìn)行抗體檢測(cè)，結(jié)果表明河西五市重大動(dòng)物疫病免疫效果總體較好。

強(qiáng)制免疫；免疫效果；分析

為評(píng)估甘肅省河西五市2015年度春季重大動(dòng)物疫病集中免疫工作質(zhì)量和效果，切實(shí)把握疫情動(dòng)態(tài)，提高疫情預(yù)警預(yù)報(bào)能力，及時(shí)消除疫情隱患，以及對(duì)免疫工作進(jìn)行客觀評(píng)估與分析，按照全省動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)工作總體部署，河西五市春季重大病防控免疫抗體檢測(cè)工作在民勤縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室開展，同時(shí)為全省動(dòng)物疫病防控工作決策提供科學(xué)依據(jù)。

1　材料與方法

1.1血清樣品

按照甘肅省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心關(guān)于開展《2015年春季全省重大動(dòng)物疫病集中免疫效果評(píng)價(jià)工作》的通知，每市（州）抽查1個(gè)縣，每縣抽查2個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)，隨機(jī)抽查4個(gè)中小規(guī)模飼養(yǎng)場(chǎng)，其中2個(gè)雞場(chǎng)、1個(gè)豬場(chǎng)、1個(gè)牛場(chǎng)或羊場(chǎng)，每場(chǎng)采集血樣至少20份。每鄉(xiāng)鎮(zhèn)抽查1個(gè)自然村，每村至少隨機(jī)采集畜禽血清樣品各10份（樣品來源不少于5個(gè)養(yǎng)殖戶）。同時(shí)要覆蓋養(yǎng)殖密集區(qū)、交通沿線等動(dòng)物疫病防控重點(diǎn)區(qū)域。

采集河西五市5個(gè)縣（區(qū)）的畜禽血清共計(jì)640份，其中雞血清300份，豬血清140份，牛血清110份，羊血清90份。

1.2抗體檢測(cè)試劑

（1）禽流感病毒H5亞型HA與HI試驗(yàn)，哈爾濱維科生物技術(shù)開發(fā)有限公司（Re-6株，批號(hào)：2013004；Re-7株，批號(hào)：2014019）；（2）雞新城疫抗原，哈爾濱動(dòng)物生物制品國家工程研究中心有限公司（批號(hào)：20150305）；（3）口蹄疫O型抗體液相阻斷ELISA試劑盒，中國農(nóng)科院蘭州獸醫(yī)研究所（批號(hào)：2015030401-8，抗原批號(hào)：14120101）；（4）口蹄疫亞洲Ⅰ型抗體液相阻斷ELISA試劑盒，中國農(nóng)科院蘭州獸醫(yī)研究所（批號(hào)：20150305102-6，抗原批號(hào)：14120402）；（5）口蹄疫A型抗體液相阻斷ELISA試劑盒，中國農(nóng)科院蘭州獸醫(yī)研究所（批號(hào)：20150422103-1，抗原批號(hào)：15040903）；（6）豬瘟病毒ELISA抗體試劑盒，武漢科前動(dòng)物生物制品有限責(zé)任公司（批號(hào)：150403）；（7）豬繁殖與呼吸綜合征病毒ELISA抗體試劑盒，武漢科前動(dòng)物生物制品有限責(zé)任公司（批號(hào)：150302）。

1.3抗體檢測(cè)方法

禽流感、新城疫抗體檢測(cè)按高致病性禽流感診斷技術(shù)（GB/T 18936-2003）、新城疫診斷技術(shù)（GB/ T 16550-2008）微量紅細(xì)胞凝集抑制試驗(yàn)（HI）方法進(jìn)行；口蹄疫O型、亞洲Ⅰ型、A型抗體檢測(cè)按口蹄疫診斷技術(shù)（GB/T 18935-2003）液相阻斷ELISA試驗(yàn)進(jìn)行；豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征按豬瘟診斷技術(shù)（GB/T 16551-2008）、豬繁殖與呼吸綜合征診斷方法（GB/T 18090-2008）間接ELISA試驗(yàn)進(jìn)行。

1.4數(shù)據(jù)分析

數(shù)據(jù)應(yīng)用DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)（V8.01版）中單因素隨機(jī)分組方法進(jìn)行方差分析［1］。

2　結(jié)果與分析

2.1禽用疫苗免疫抗體抽查結(jié)果

根據(jù)農(nóng)業(yè)部要求，禽流感抗體效價(jià)達(dá)到4為合格，采集家禽樣品300份。如表1所示，檢測(cè)禽流感（Re-6株）抗體298份，2份樣品量過少而放棄檢測(cè)，各市（州）Re-6株抗體合格率為92.50%～100.00%，均達(dá)到農(nóng)業(yè)部規(guī)定要求，應(yīng)用DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)單因素隨機(jī)分組方法進(jìn)行方差分析，免疫效果依次為武威＞張掖＞金昌＞酒泉＞嘉峪關(guān)（F=25.913，p=0.0001）。檢測(cè)禽流感（Re-7株）抗體299份，1份樣品量過少而放棄檢測(cè)，各市（州）Re-7株抗體合格率為47.37%～100.00%，金昌市、酒泉市、嘉峪關(guān)市規(guī)模場(chǎng)免疫效果不合格，應(yīng)用DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)單因素隨機(jī)分組方法進(jìn)行方差分析，免疫效果依次為武威＞張掖＞金昌＞酒泉＞嘉峪關(guān)（F=37.955，p=0.0001）。根據(jù)農(nóng)業(yè)部要求，新城疫抗體效價(jià)達(dá)到5為合格，檢測(cè)新城疫抗體299份，1份樣品量過少而放棄檢測(cè)，各市（州）新城疫抗體合格率為70%～100%，樣品離散度8.6%～37.59%，應(yīng)用DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)單因素隨機(jī)分組方法進(jìn)行方差分析，免疫效果依次為張掖＞金昌＞酒泉＞武威＞嘉峪關(guān)（F=12.643，p=0.0001）。綜合禽疫苗免疫效果，武威、張掖兩地免疫效果較好。

2.2豬用疫苗免疫抗體抽查結(jié)果

采集豬樣品140份，如表2所示，各市（州）豬O型口蹄疫抗體、豬繁殖與呼吸綜合征抗體豬瘟抗體除嘉峪關(guān)豬瘟散養(yǎng)戶抗體未達(dá)標(biāo)外，各市（州）豬用疫苗抗體幾乎全部達(dá)到農(nóng)業(yè)部規(guī)定要求的70%以上。應(yīng)用DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)中單因素隨機(jī)分組方法進(jìn)行方差分析，豬O型疫苗免疫效果依次為張掖＞武威＞金昌＞酒泉＞嘉峪關(guān)（F=4.362，p=0.0001）。豬瘟抗體S/P值≥0.17為有抗體，S/P值＜0.17為無抗體，應(yīng)用DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)單因素隨機(jī)分組方法進(jìn)行方差分析，豬瘟疫苗免疫效果依次為張掖＞武威＞金昌＞酒泉＞嘉峪關(guān)（F=15.874，p=0.0001），從離散度來看，酒泉、嘉峪關(guān)兩地疫苗免疫參差不齊，需加強(qiáng)補(bǔ)免。豬繁殖與呼吸綜合征檢測(cè)結(jié)果KQ值≥20，說明免疫有抗體，KQ值＜20，說明沒抗體，豬繁殖與呼吸綜合征疫苗免疫效果依次為嘉峪關(guān)＞張掖＞武威＞金昌＞酒泉（F=24.873，p=0.0001），酒泉市因豬免疫個(gè)體抗體（KQ）值大，且部分豬免疫不合格，數(shù)據(jù)上較金昌市好，但其規(guī)模場(chǎng)、散養(yǎng)戶離散度均大于60%，疫苗免疫參差不齊，需加強(qiáng)補(bǔ)免。

表1 2015年河西五市禽用疫苗免疫抗體抽查結(jié)果

2.3牛用疫苗免疫抗體抽查結(jié)果

采集牛樣品110份，檢測(cè)牛O型口蹄疫抗體、亞洲Ⅰ型口蹄疫抗體、奶牛A型口蹄疫抗體合格率均達(dá)到農(nóng)業(yè)部70%的要求，見表3。應(yīng)用DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)中單因素隨機(jī)分組方法進(jìn)行方差分析，牛O型疫苗免疫效果依次為嘉峪關(guān)＞武威＞酒泉＞金昌＞張掖（F=11.419，p=0.0001），牛亞洲I型疫苗免疫效果依次為嘉峪關(guān)＞酒泉＞武威＞金昌＞張掖（F=8.067，p=0.0001），奶牛A型疫苗免疫效果依次為嘉峪關(guān)＞武威＞酒泉＞金昌＞張掖（F=10.261，p=0.0001），從離散度來看，張掖牛A型、O型、亞洲Ⅰ型疫苗免疫均參差不齊，需加強(qiáng)補(bǔ)免。

2.4羊用疫苗免疫抗體抽查結(jié)果

采集羊血清樣品90份，檢測(cè)羊O型口蹄疫抗體、亞洲Ⅰ型口蹄疫抗體合格率均達(dá)到農(nóng)業(yè)部規(guī)定70%的要求，見表4。應(yīng)用DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)中單因素隨機(jī)分組方法進(jìn)行方差分析，羊O型疫苗免疫效果依次為武威＞張掖＞酒泉＞金昌（F=10.56，p=0.0001），羊亞洲I型疫苗免疫效果依次為嘉峪關(guān)＞武威＞酒泉＞張掖＞金昌（F=6.812，p=0.0001）。

3　小結(jié)與討論

3.1畜牧業(yè)快速發(fā)展，促進(jìn)了集約化生產(chǎn)水平的提高，為畜產(chǎn)品經(jīng)營注入了活力，動(dòng)物及其產(chǎn)品的生產(chǎn)、流通、消費(fèi)主體日益多元化，規(guī)模養(yǎng)殖比重逐年增大，養(yǎng)殖企業(yè)、養(yǎng)殖場(chǎng)（小區(qū)）、養(yǎng)殖大戶對(duì)疫病防治的要求越來越高。同時(shí)，動(dòng)物疫情形勢(shì)也更加復(fù)雜多變，舊的疾病未完全控制，新的疾病又不斷出現(xiàn)，毒株變異大，給防疫帶來困難。動(dòng)物免疫過程中，多種原因可能導(dǎo)致免疫失敗。只有通過實(shí)驗(yàn)室抗體監(jiān)測(cè)，才能準(zhǔn)確掌握免疫效果和疫病流行狀況，及時(shí)做好補(bǔ)免和消毒滅源工作。本次重大動(dòng)物疫病的免疫抗體監(jiān)測(cè)是對(duì)甘肅省河西五市轄區(qū)的5個(gè)縣（區(qū)）春季存欄的畜禽血清進(jìn)行抽檢，抽查畜禽規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)和散養(yǎng)戶，既有公路沿線、密集飼養(yǎng)畜禽的規(guī)模場(chǎng)，也有邊緣山區(qū)自然村散養(yǎng)戶，抽查涵蓋面廣，對(duì)甘肅省河西片區(qū)重大動(dòng)物疫病的防控效果評(píng)估有較好的代表性。

表2 2015年河西五市豬用疫苗免疫抗體抽查結(jié)果

表3 2015年河西五市牛用疫苗免疫抗體抽查結(jié)果

表4 2015年河西五市羊用疫苗免疫抗體抽查結(jié)果

3.2從檢測(cè)結(jié)果看，河西五市除金昌、酒泉、嘉峪關(guān)三市禽流感（Re-7株）規(guī)模場(chǎng)抗體不合格，嘉峪關(guān)市豬瘟散養(yǎng)戶抗體不合格外，其余市（州）禽流感、新城疫、口蹄疫、豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征抗體均達(dá)到農(nóng)業(yè)部對(duì)畜禽重大動(dòng)物疫病免疫抗體評(píng)價(jià)的“有效免疫抗體合格率達(dá)到70%以上”的總體要求。對(duì)于畜禽養(yǎng)殖群，評(píng)價(jià)免疫抗體的高低（合格率）及離散度（整齊度），建立和培養(yǎng)“穩(wěn)態(tài)”是養(yǎng)殖場(chǎng)疾控的最佳選擇?？贵w合格率越高（農(nóng)業(yè)部規(guī)定70%以上），說明畜禽群免疫做的好，比較穩(wěn)定，不易發(fā)該病。檢測(cè)結(jié)果離散度越小越好，其疫苗免疫整齊度就好，小于40%為安全，介于40%～60%為一般，大于60%為危險(xiǎn)。結(jié)果表明，河西五市畜禽總體上已建立起了較好的免疫機(jī)能屏障，有效杜絕了口蹄疫、豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征等重大動(dòng)物疫病在我省河西片區(qū)呈大規(guī)模暴發(fā)流行的威脅。金昌、酒泉、嘉峪關(guān)三市規(guī)模場(chǎng)禽流感Re-7株免疫抗體未達(dá)到農(nóng)業(yè)部要求的免疫抗體合格率70%的水平，仍存在畜禽防疫薄弱點(diǎn)，存在高致病性禽流感在兩市（州）局部散發(fā)的可能。畜禽疫苗的強(qiáng)制免疫效果好與壞與養(yǎng)殖場(chǎng)和農(nóng)戶對(duì)動(dòng)物疫病的重視程度關(guān)系很大，然而現(xiàn)實(shí)就是許多養(yǎng)殖場(chǎng)不做或很少做抗體評(píng)估，只是定期普免畜禽，對(duì)免疫效果、疫苗質(zhì)量知之甚少，難以建立及培養(yǎng)出健康穩(wěn)定的畜禽群。因此，我們的防疫重點(diǎn)是繼續(xù)擴(kuò)大監(jiān)測(cè)的點(diǎn)和面，對(duì)動(dòng)物免疫不達(dá)標(biāo)或空白點(diǎn)督促加強(qiáng)免疫和補(bǔ)免工作，養(yǎng)殖戶也應(yīng)該把集中免疫和常規(guī)免疫結(jié)合起來并及時(shí)做好補(bǔ)免工作，確保我省不出現(xiàn)重大動(dòng)物疫情。

3.3此次檢測(cè)工作，也是省、市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心對(duì)我縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心實(shí)驗(yàn)室的現(xiàn)場(chǎng)培訓(xùn)和承擔(dān)大型實(shí)驗(yàn)檢測(cè)能力的一次檢驗(yàn)，省級(jí)專家對(duì)每一個(gè)實(shí)驗(yàn)的程序、細(xì)節(jié)、應(yīng)注意的節(jié)點(diǎn)都做了詳細(xì)的講解和指導(dǎo)，尤其在個(gè)人防護(hù)、消毒、原始記錄等方面多次強(qiáng)調(diào)，極大的促進(jìn)了實(shí)驗(yàn)工作的規(guī)范性，提高了技術(shù)人員的技能水平，將進(jìn)一步促進(jìn)我縣乃至我市獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室職能的發(fā)揮，為全市重大動(dòng)物疫病防控工作奠定良好基礎(chǔ)。

［1］ 唐啟義，馮明光. 實(shí)用統(tǒng)計(jì)分析及其DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)［M］. 北京：科學(xué)出版社， 2002：488-491.

（責(zé)任編輯：胡藕祥）

Evaluation of Vaccination Effect for Major Animal Epidemic Diseases in the West Five Cities of Gansu Province in 2015

Sun Ming
（Minqin Animal Epidemic Prevention Control Center ， Minqin， Gansu 733399）

In order to evaluate the vaccination effect for major animal epidemic diseases in the west fi ve cities of Gansu province in 2015，a total of 640 serum specimens were collected from the livestock and poultry under compulsory vaccination in the fi ve cities in spring of 2015，for antibody detection using micro-hemagglutination inhibition test（HI）and enzyme-linked immuno-sorbent assay（ELISA）. The results showed that the vaccination effect for major animal epidemic diseases in the west fi ve cities of Gansu province in 2015 was quite good on the whole.

compulsory vaccination；vaccination effect；analysis

S851.31+3

B

1005-944X（2015）09-0007-04