朱紅俊　蘇偉　龔少愚　高楓　周春剛　陸曙

（南京中醫(yī)藥大學(xué)無錫附屬醫(yī)院，江蘇無錫214001）

·研究報(bào)告·

蓮子心對(duì)不穩(wěn)定型心絞痛患者血清基質(zhì)金屬蛋白酶水平及生存質(zhì)量的影響*

朱紅俊蘇偉△龔少愚高楓周春剛陸曙

（南京中醫(yī)藥大學(xué)無錫附屬醫(yī)院，江蘇無錫214001）

目的觀察蓮子心對(duì)不穩(wěn)定型心絞痛（UAP）患者的血清基質(zhì)金屬蛋白酶-9（MMP-9）及基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-1（TIMP-1）水平和生存質(zhì)量的影響。方法研究共計(jì)納入U(xiǎn)AP患者120例以及健康人30例（正常組），其中UAP患者隨機(jī)分為兩組各60例，兩組均進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化基礎(chǔ)治療，其中治療組加用蓮子心顆粒劑，療程3周。治療前后檢測(cè)血清MMP-9和TIMP-1水平變化；并采用西雅圖心絞痛量表（SAQ）進(jìn)行生活質(zhì)量評(píng)價(jià)。結(jié)果與正常組相比，治療前治療組和對(duì)照組的血清MMP-9、TIMP-1水平均明顯增高（P＜0.001），但治療組和對(duì)照組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。治療后，治療組和對(duì)照組血清MMP-9及TIMP-1水平均明顯下降（P＜0.001）；且治療組血清MMP-9及TIMP-1水平均明顯低于對(duì)照組（P＜0.05或P＜0.01）。治療后，對(duì)照組和治療組均可使SAQ評(píng)分升高（P＜0.01），但是治療后治療組AS、AF、TS評(píng)分明顯高于對(duì)照組（P＜0.01）。結(jié)論蓮子心可在標(biāo)準(zhǔn)治療基礎(chǔ)上，降低UAP患者患者血清MMP-9、TIMP-1水平，從而改善生存質(zhì)量。

不穩(wěn)定型心絞痛蓮子心基質(zhì)金屬蛋白酶-9基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-1生存質(zhì)量

不穩(wěn)定型心絞痛（UAP）在中醫(yī)學(xué)中多歸于“胸痹”“真心痛”等范疇，《周慎齋遺書·心痛》則明確提出了“心痛有屬心火者”，因此，清熱解毒法治療冠心病心絞痛等在臨床逐步被重視。筆者采用清熱泄?jié)嵫a(bǔ)腎方治療冠心病患者，可以明顯改善血管內(nèi)皮功能指標(biāo)，并提高患者生存質(zhì)量［1］。蓮子心具有“清心去熱”（《大明一練志》）、“瀉心，堅(jiān)腎”（《醫(yī)林纂要》）的作用，切合UAP的熱邪致病機(jī)。前期筆者采用蓮子心對(duì)UAP患者進(jìn)行干預(yù)，發(fā)現(xiàn)其可以調(diào)節(jié)血清基質(zhì)金屬蛋白酶-9（MMP-9）及基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-1（TIMP-1）表達(dá)水平，從而改善SAQ生存質(zhì)量評(píng)分［2］。本文則從血清學(xué)角度，進(jìn)一步探討了蓮子心對(duì)UAP患者的血清MMP-9、TIMP-1水平以及生存質(zhì)量的影響。

1　資料與方法

1.1病例選擇UAP的診斷標(biāo)準(zhǔn)參照WHO缺血性心臟病的命名與診斷標(biāo)準(zhǔn)［3］。納入標(biāo)準(zhǔn)：年齡50～80歲；滿足UAP診斷標(biāo)準(zhǔn)；且冠狀動(dòng)脈造影術(shù)發(fā)現(xiàn)至少

1支血管或至少1處血管狹窄超過60%。排除標(biāo)準(zhǔn)：精神病患者；妊娠或哺乳期婦女及過敏體質(zhì)者；急性心肌梗死、重度心律失常、重度心衰者；動(dòng)脈粥樣硬化閉塞或主動(dòng)脈瘤患者；懷疑或確有酒精/藥物濫用病史者；經(jīng)檢查證實(shí)合并有心、腦、肺、肝、腎和造血系統(tǒng)等嚴(yán)重原發(fā)疾病者；伴發(fā)其他可能妨礙其入組或影響其生存的嚴(yán)重疾病者。

1.2臨床資料選取120例南京中醫(yī)藥大學(xué)無錫附屬醫(yī)院心血管病科2007年10月至2011年12月住院患者。均符合上述病例選擇標(biāo)準(zhǔn)。本研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)同意，并嚴(yán)格遵守《赫爾辛基宣言》倫理學(xué)要求。按照隨機(jī)數(shù)字表法分為兩組，各60例。其中治療組男性30例，女性30例；年齡56～77歲，平均（71.35±8.70）歲；病程2 h至28年，平均（8.73±11.12）年。對(duì)照組男性27例，女性33例；年齡54～78歲，平均（71.65±9.93）歲；病程1 h至40年，平均（8.91± 13.62）年。兩組臨床資料差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。同時(shí)，匹配年齡性別后，從本院在職及退休職工中納入30例健康人作為正常對(duì)照組（簡稱正常組）。本研究取得了所有志愿者的知情同意。

1.3治療方法兩組均給予西醫(yī)常規(guī)治療，包括硝酸酯類藥物如單硝酸異山梨酯片（魯南貝特制藥有限公司，20 mg，每日2次）、硝酸異山梨酯片（南京白敬宇制藥有限責(zé)任公司，5～10 mg，每天3次）、硝酸甘油（廣州白云山明興制藥有限公司，每日5～20 mg，根據(jù)病情調(diào)整），他汀類調(diào)脂藥物如阿托伐他汀鈣片（輝瑞制藥有限公司，10～20 mg，每日1次）、氟伐他汀鈉膠囊（北京諾華制藥有限公司，40 mg，每晚1次）、阿司匹林（拜耳醫(yī)藥有限公司，100～300 mg，每日1次）、低分子肝素鈣（Sanofi Winthrop，0.4 mL，每12小時(shí)1次），血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑如貝那普利片（北京諾華制藥有限公司，10 mg，每日1次）、培哚普利片（Les Laboratoires Servier Industrie，4 mg，每日1次）等，無禁忌證時(shí)使用β受體阻滯劑如美托洛爾片（阿斯利康制藥有限公司，6.25～100 mg，每日2次）、比索洛爾片（默克有限公司，2.5～5 mg，每日1次）等，均為全程長期使用。兩組間常規(guī)治療所用藥物的品種、劑量、療程差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。治療組另口服蓮子心顆粒劑（天江制藥廠），每次3 g，每日2次。兩組均以3周為1療程。治療1個(gè)療程。

1.4觀察指標(biāo)于入院24 h內(nèi)凌晨空腹抽取靜脈血2 mL，慢慢注入無菌干燥帶塞試管中，即刻送實(shí)驗(yàn)室，室溫下血液自然凝固20 min后，以2000 r/min離心15 min，收集上清。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。分離血清后統(tǒng)一編號(hào)，-70℃冰箱保存。治療3周后重復(fù)上述過程。血清MMP-9和TIMP-1水平的檢測(cè)采用酶聯(lián)免疫標(biāo)記測(cè)定（ELISA），試劑盒由上海西唐生物公司提供。實(shí)驗(yàn)方法及步驟嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。生存質(zhì)量評(píng)分采用西雅圖心絞痛量表（SAQ）進(jìn)行評(píng)分，由課題組專職副主任醫(yī)師于入院即刻及治療3周后進(jìn)行評(píng)估，所有評(píng)分均采用統(tǒng)一的紙質(zhì)SAQ量表進(jìn)行評(píng)分，評(píng)分內(nèi)容包括軀體活動(dòng)受限程度（PL）、心絞痛穩(wěn)定狀態(tài)（AS）、心絞痛發(fā)作情況（AF）、治療滿意程度（TS）以及疾病認(rèn)識(shí)程度（DP）。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件處理。計(jì)量資料以（±s）表示。療效分析組間比較采用兩獨(dú)立樣本的雙側(cè)student-t檢驗(yàn)，組內(nèi)治療前后比較采用配對(duì)樣本的雙側(cè)student-t檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

表1　各組血清MMP-9、TIMP-1水平比較（μg/L，±s）

表1　各組血清MMP-9、TIMP-1水平比較（μg/L，±s）

與正常組比較，▼P＜0.01；與本組治療前比較，*P＜0.01；與對(duì)照組治療后比較，△P＜0.05，△△P＜0.01。下同。

組別n 時(shí)間MMP-9TIMP-1正常組30治療組60治療前114.12±62.9022.13±11.62治療前920.26±95.77▼91.99±10.68▼對(duì)照組60治療后114.13±7.52*22.14±1.38*治療前944.16±95.48▼96.27±16.76▼治療后227.05±10.25*△△26.33±0.71*△

2.1各組患者血清MMP-9及TIMP-1水平比較見表1。治療前治療組和對(duì)照組的血清MMP-9、TIMP-1水平均高于正常組（P＜0.01）；治療組和對(duì)照組之間血清MMP-9、TIMP-1水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。治療后治療組、對(duì)照組血清MMP-9、TIMP-1水平均較治療前降低（P＜0.01），組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01或P＜0.05）。

2.2兩組患者生存質(zhì)量比較見表2。治療前，兩組SAQ各項(xiàng)評(píng)分（PL、AS、AF、TS、DP）相當(dāng)（P＞0.05）。治療后，對(duì)照組和治療組SAQ評(píng)分均較治療前升高（P＜0.01），治療組AS、AF、TS評(píng)分明顯高于對(duì)照組（P＜0.01）。

表2　各組生存質(zhì)量SAQ評(píng)分比較（分，±s）

表2　各組生存質(zhì)量SAQ評(píng)分比較（分，±s）

組別時(shí)間PLASAF TSDP治療組治療前（n=60）治療后對(duì)照組治療前22.39±7.7232.62±10.7437.67±8.23 68.45±14.46*87.67±10.45*△△84.62±14.19*△△22.14±6.1331.76±8.1638.38±9.17 36.14±5.1559.87±14.65 85.71±13.75*△△71.13±16.79*35.47±7.3757.68±13.91（n=60）治療后64.9±14.51*75.25±13.09*72.72±12.97*69.28±12.67*70.91±15.75*

3　討論

UAP實(shí)質(zhì)上是一個(gè)慢性炎癥的急性惡化過程。在動(dòng)脈粥樣硬化斑塊從穩(wěn)定向不穩(wěn)定狀態(tài)轉(zhuǎn)化的過中，炎癥起著至關(guān)重要的作用［4］，基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）是重要的炎癥因子之一，在UA的發(fā)病過程中起著重要作用，它可損害血管內(nèi)皮功能，影響動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的穩(wěn)定性，如MMP-9可促進(jìn)血管中膜平滑肌細(xì)胞遷移、增殖［5］。而對(duì)冠心病心絞痛患者而言，血管內(nèi)皮功能下降可導(dǎo)致患者SAQ評(píng)分下降，兩者有密切關(guān)系［1］。而且，血管內(nèi)皮細(xì)胞受到損害時(shí)，會(huì)分泌多種炎癥因子，誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞分泌MMP-2和MMP-9降解基底膜，MMP-9可促進(jìn)血管中膜平滑肌細(xì)胞遷移、增殖，促使動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成，繼而斑塊內(nèi)的炎性細(xì)胞又進(jìn)一步釋放大量的MMP-9［6］，進(jìn)一步促進(jìn)纖維原降解，從而導(dǎo)致臨床事件的發(fā)生。TIMP-1則是活性MMP-9特異性抑制物，可與活化的MMP-9形成1∶1的復(fù)合物，阻斷MMP-9與底物結(jié)合，從而抑制其活性，減少基質(zhì)膠原的降解。

筆者前期研究發(fā)現(xiàn)，UAP患者外周血MMP-9 mRNA表達(dá)水平是明顯增高的；且MMP-9 mRNA的表達(dá)與生存質(zhì)量SAQ評(píng)分中PL、AF、TS的相關(guān)系數(shù)分別為-0.178、-0.204、-0.434，呈明顯負(fù)相關(guān)，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異［2］，證實(shí)了MMP-9表達(dá)對(duì)UAP患者生存質(zhì)量有影響。而蓮子心則可以調(diào)節(jié)MMP-9、TIMP-1基因表達(dá)水平，從而改善UAP患者的SAQ生存質(zhì)量評(píng)分［2］。但是基因表達(dá)和下游蛋白產(chǎn)物的表達(dá)關(guān)系是非線性的。本研究從MMP-9基因表達(dá)改變是否能導(dǎo)致下游效應(yīng)蛋白改變而影響生存質(zhì)量入手。結(jié)果顯示，UAP患者的血清MMP-9和TIMP-1水平也是明顯高于正常組的，提示對(duì)于UAP患者，還存在血清MMP-9和TMIP-1水平升高的病理過程，從而影響了UAP患者的血管內(nèi)皮功能。而本課題組前期研究已經(jīng)證實(shí)，冠心病患者血管內(nèi)皮功能指標(biāo)內(nèi)皮素-1和一氧化氮水平的改變與SAQ生活質(zhì)量積分是顯著相關(guān)的［1］。這從另外一個(gè)角度佐證了本文的研究結(jié)果是和文獻(xiàn)相一致的。

現(xiàn)代研究也發(fā)現(xiàn)，火邪可熏蒸痰濕、瘀血，從而化生濁邪，導(dǎo)致動(dòng)脈硬化相關(guān)疾病的發(fā)生、發(fā)展［7］。因此，清熱解毒法治療冠心病、心絞痛等在臨床已經(jīng)逐步被重視并運(yùn)用，取得良好的臨床效果。研究證實(shí)，采用清熱泄?jié)嵫a(bǔ)腎方法治療冠心病患者，可以明顯改善血管內(nèi)皮功能指標(biāo)，降低內(nèi)皮素-1水平，提高一氧化氮水平［1］；并且抑制內(nèi)皮炎癥反應(yīng)指標(biāo)，降低炎癥因子白介素6的水平［8］；并提高冠心病患者SAQ評(píng)分，改善了冠心病患者的生存質(zhì)量［1，8］。

本研究中采用的干預(yù)藥物蓮子心，具有“瀉心，堅(jiān)腎”（《醫(yī)林纂要》）、“清心去熱”（《大明一練志》）的作用，與中醫(yī)典籍記載及現(xiàn)代研究證實(shí)的胸痹心痛病熱邪致病的病機(jī)相吻合。其主要成分蓮心堿、異蓮心堿和甲基蓮心堿等。研究證實(shí)，對(duì)于二腎一夾腎血管性高血壓大鼠，蓮心堿可以提高心肌肌漿網(wǎng)Ca2+-ATP酶（SERCA）的活力的作用［9］。具有“清心、瀉心”作用的蓮子心治療血管疾病具備現(xiàn)代藥理學(xué)基礎(chǔ)。此前，筆者采用蓮子心對(duì)UAP患者進(jìn)行干預(yù)研究也證實(shí)，對(duì)于UAP患者，蓮子心可在標(biāo)準(zhǔn)治療基礎(chǔ)上，通過進(jìn)一步降低MMP-9 mRNA表達(dá)水平及M/Tr比值、提高TIMP-1 mRNA表達(dá)水平，從而進(jìn)一步改善UAP患者的生存質(zhì)量SAQ評(píng)分，特別是提高AS、AF、TS 3項(xiàng)的評(píng)分［2］。因此，采用蓮子心“清心去熱”，可以干預(yù)UAP患者熱邪致病的中醫(yī)病機(jī)，并抑制炎癥反應(yīng)，提高部分生存質(zhì)量指標(biāo)。

而相對(duì)于mRNA表達(dá)，MMP-9及TIMP-1的血清水平與血管內(nèi)皮功能及炎癥反應(yīng)之間的關(guān)系可能更為密切。本研究結(jié)果則顯示，對(duì)于UAP患者，治療組和對(duì)照組均可以明顯降低血清MMP-9及TIMP-1水平，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。SAQ評(píng)分也證實(shí)，治療組和對(duì)照組均可以提高UAP患者生存質(zhì)量，減輕UAP患者軀體活動(dòng)受限程度，降低心絞痛發(fā)作次數(shù)，提高心絞痛穩(wěn)定狀態(tài)治療效果，以及疾病認(rèn)識(shí)程度；但是，加用蓮子心的治療組AS、AF、TS均值升高更明顯。

因此，本研究可以證實(shí)蓮子心可在標(biāo)準(zhǔn)治療基礎(chǔ)上，降低UAP患者M(jìn)MP-9及TIMP-1水平，從而改善生存質(zhì)量。

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質(zhì)量及基質(zhì)金屬蛋白酶-9和基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-1 mRNA表達(dá)水平的影響［J］.中華中醫(yī)藥雜志，2014，29（8）：2640-2644.

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The Effects of Plumula Nelumbinis on the Levels of Matrix Metalloproteinase-9 and Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-1 and Life Quality in Patients with Unstable Angina

ZHU Hongjun，SU Wei，GONG Shaoyu，et al.Wuxi Hospital Affiliated to Nanjing University of Traditional Chinese Medicine，Jiangsu，Nanjing 214001，China

Objective：To observe the effects of Plumula nelumbinis on the levels of Matrix Metalloproteinase-9（MMP-9）and Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-1（TIMP-1）and life quality in patients with unstable angina. Methods：120 patients with unstable angina were randomly divided into the treatment group（n=60）and the standard treatment group（the control group，n=60）.A normal group of 30 healthy persons was additionally set up. The treatment group and the control group both received standard treatment，and the treatment group was added Plumula nelumbinis.The course of treatment lasted for 3 weeks.Changes in levels of MMP-9 and TIMP-1 were measured and Seatle Angina Questionnaire（SAQ）was adopted in studying life quality before and after treatment. Results：Before treatment，compared with the normal group，the average levels of MMP-9 and TIMP-1in the other two groups increased obviously（P＜0.001），but there was no significant difference in the average levels of MMP-9 and TIMP-1 in the control group and the treatment group（P＞0.05）.After treatment，there was an obvious drop in the average levels of MMP-9 and TIMP-1in the control group and the treatment group（P＜0.001），and that of the treatment group was lower than that of the control group（P＜0.01 or P＜0.05）.There was no significant difference in the scores of SAQ（PL，AS，AF，TS，DP）between two group before treatment（P＞0.05）.After treatment，the scores of SAQ（PL，AS，AF，TS，DP）were higher than before treatment（P＜0.01），but the scores of SAQ（AS，AF，TS）in the treat group were obviously higher than that of the control groups（P＜0.01）.Conclusion：Plumula nelumbinis can decline the levels of MMP-9 and TIMP-1 and raise scores of SAQ in patients with unstable angina on the basis of standard treatment，so as to improve the quality of life.

Unstable angina；Plumula nelumbinis；Matrix Metalloproteinase-9；Tissue inhibitor of Metalloproteinase-1；Life quality

R541.4

A

1004-745X（2015）11-1923-04

10.3969/j.issn.1004-745X.2015.11.013

2015-08-08）

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江蘇省自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目（BK2008117）

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