劉迎春 阮 劍
湖北團風(fēng)縣人民醫(yī)院 1)檢驗科 2)骨外科 團風(fēng) 438000
中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染是中樞神經(jīng)系統(tǒng)(central nervous system,CNS)的常見疾病,腦脊液(cerebrospinal fluid,CSF)檢查對疾病的診斷具有重要參考意義[1]。本文采用玻片離心沉淀法檢查腦脊液細胞學(xué)診斷中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染,現(xiàn)分析如下。
1.1病例資料選取2010-03-2013-03間我院收治的中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染患者82例,男43例,女39例,年齡23~67歲,平均39歲。病毒性腦膜炎23例,結(jié)核性腦膜炎31例,細菌性腦膜炎17例,腦轉(zhuǎn)移瘤11例,均為亞急性或急性發(fā)病。頭痛13例,發(fā)熱11例,嘔吐23例,意識障礙15例,抽搐7例,精神異常8例,腦膜刺激征5例。
1.2儀器和方法
1.2.1 儀器:玻片離心沉淀儀,采用孔氏FCS兩用型離心沉淀儀。細胞涂片離心機,購自于長沙湘儀離心機儀器有限公司。顯微診斷儀,購自于重慶天海醫(yī)療設(shè)備有限公司。
1.2.2 CSF檢查方法:①患者行腰椎穿刺術(shù),先進行腦脊液常規(guī)檢查、計數(shù)和生化檢查,檢測顱內(nèi)壓。每位患者各取1 mL新鮮腦脊液標本進行玻片離心沉淀。采用FCS-E型玻片離心儀,將獲取的標本注入離心機沉淀池內(nèi),慢速離心,設(shè)置參數(shù)為500rpm/min,離心10min后取出玻片晾干。②于室溫下進行瑞-姬染色,染色時間約為10min,之后沖洗晾干。③利用顯微診斷儀觀察腦脊液細胞形態(tài),并進行計數(shù)和分類,查看有無異常細胞。
2.1腦脊液常規(guī)、生化和壓力檢測結(jié)果患者腦脊液壓力增高,其中10例患者腦脊液壓力>300mmH2O。蛋白含量0.5~3.8g/L,8例顯著升高。葡萄糖含量1~3.5mmol/L,3例顯著降低。氯化物在118~120mmol/L范圍內(nèi)波動,變化不顯著。腦脊液中最高白細胞數(shù)量達到1 000個/mm3,最少者僅為6個/mm3。見表1。
表1 腦脊液常規(guī)生化檢查與細胞學(xué)檢查異常百分率比較表
2.2腦脊液細胞學(xué)檢查結(jié)果(1)正常腦脊液:60%~70%為淋巴細胞,形態(tài)較小且多呈圓形,具有完整的胞膜和光滑的邊緣,胞漿量少。30%~40%為單核細胞,形態(tài)較大且多呈馬蹄形。單核細胞與小淋巴細胞的比例約為4:6或3:4,無中性粒細胞,偶見大淋巴細胞。(2)化腦:神經(jīng)外科術(shù)后感染患者,80%~90%為嗜中性粒細胞,甚者中毒顆粒出現(xiàn)在胞漿內(nèi)。(3)病腦:以淋巴細胞反應(yīng)為主,細胞分類比例為嗜中性粒細胞<單核細胞<淋巴細胞,具有大量激活淋巴細胞。(4)結(jié)腦:染色涂片后出現(xiàn)單核細胞、淋巴細胞、嗜中性粒細胞、漿細胞、激活單核細胞及激活淋巴細胞等并存,由此可見結(jié)腦以混合細胞反應(yīng)為主。(5)腦髓炎:小淋巴細胞升高為主要表現(xiàn)癥狀,同時伴有漿細胞、激活淋巴細胞和嗜中性粒細胞。(6)腦囊蟲:嗜酸性粒細胞升高為主要表現(xiàn)癥狀。見表2。
中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染是由不同病原體引起的一類炎性疾病,是由于生物性病原體侵入中樞神經(jīng)系統(tǒng)后引起的慢性或急性疾病,屬于我國常見疾病,包括腦炎、腦膜腦炎和腦膜炎等,且臨床漏診或誤診現(xiàn)象極其嚴重。腦室系統(tǒng)內(nèi)的脈絡(luò)從可產(chǎn)生腦脊液,正常腦脊液中單核細胞與淋巴細胞的比例約為70∶30~60∶40,當致病菌侵襲中樞神經(jīng)系統(tǒng)時,其抗原性引起特征性細胞免疫反應(yīng)和相應(yīng)的腦脊液白細胞計數(shù),同時還可出現(xiàn)激活淋巴細胞、大淋巴細胞、嗜酸性粒細胞、激活單核細胞、嗜中性粒細胞等異常細胞,為定性診斷提供依據(jù)[2-3]。其中,細菌性腦膜炎以嗜中性粒細胞反應(yīng)為主,結(jié)核性腦膜炎以嗜中性粒細胞、單核細胞、激活淋巴細胞和漿細胞的混合反應(yīng)為主,病毒性腦膜炎以淋巴細胞的細胞學(xué)反應(yīng)為主。腦脊液細胞學(xué)檢查是一門逐漸發(fā)展的新興學(xué)科,主要研究正常狀態(tài)和病理狀態(tài)下的腦脊液細胞成分分類及其臨床引用,通過特殊裝置收集細胞成分后進行染色觀察[4]。常規(guī)腦脊液檢查其陽性率遠遠低于腦脊液細胞學(xué)檢查,不同類型的中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染表現(xiàn)出不同的腦脊液細胞學(xué)特性,腦脊液細胞學(xué)檢查可準確的動態(tài)觀察細胞形態(tài),提供快速、簡便、準確的輔助診斷。腦脊液細胞學(xué)臨床表現(xiàn)大致可分為如下幾類:(1)淋巴細胞型,如感染后脫髓鞘腦炎或病毒性腦膜炎等慢性或免疫性炎癥。(2)單核-吞噬細胞型,常見于變性疾病或慢性刺激性疾病。(3)多形核粒細胞型,常見于出血或急性細菌性炎癥。(4)混合細胞型,常見于隱球菌性腦膜炎和結(jié)核性腦膜炎等亞急性炎癥。
有學(xué)者采用玻片離心沉淀法分別收集結(jié)核性腦膜炎和病毒性腦膜炎患者的腦脊液細胞,進行巴氏染色后發(fā)現(xiàn)結(jié)核性腦膜炎患者在病初12d內(nèi)多呈嗜中性粒細胞反應(yīng),直至病情第4周末,單核細胞與嗜中性粒細胞所占比例一致[5]。隨著病程的逐漸延長,淋巴細胞逐步代替腦脊液病理細胞,而在整個病程中始終出現(xiàn)漿細胞和激活單核細胞,由此提示腦脊液細胞的細胞質(zhì)、量差別及動態(tài)變化對結(jié)核性腦膜炎的早期診斷具有重大意義。
腦脊液內(nèi)的細胞在離體環(huán)境下極易被破壞,因而腦脊液細胞檢查的關(guān)鍵是盡可能多的收集完整細胞,沉淀池法收集細胞形態(tài)清晰完整,僅需少量標本0.5~1.0mL。綜上所述,通過玻片離心沉淀法檢查腦脊液細胞學(xué)可動態(tài)監(jiān)測其變化,從而極大提高中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染診斷的陽性率,對臨床療效的評估具有重要意義。
表2 腦脊液細胞學(xué)檢查結(jié)果
[1]粟秀初,趙鋼,楊毅寧,等 .玻片離心沉淀法腦脊液細胞學(xué)檢查在中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病診斷中的應(yīng)用價值[J].中國現(xiàn)代神經(jīng)疾病雜志,2013,2:008.
[2]Spudich S,Gisslen M,Hagberg L,et al.Central nervous system immune activation characterizes primary human immunodeficiency virus 1infection even in participants with minimal cerebrospinal fluid viral burden[J].Journal of Infectious Diseases,2011,204(5):753-760.
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[4]戰(zhàn)玉喜,李建新 .顱內(nèi)感染者腦脊液細胞學(xué)檢查的臨床意義[J].山東醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校學(xué)報,2013,35(5):364-366.
[5]粟秀初 .影響玻片離心沉淀法腦脊液細胞學(xué)檢查進一步推廣的若干因素[J].中國現(xiàn)代神經(jīng)疾病雜志,2011,11(5):486-488.