劉文文

(安徽省宣城市宣州區(qū)畜牧獸醫(yī)管理局,安徽宣城 242000)

乳酸恩諾沙星治療雞病的藥效試驗

劉文文

(安徽省宣城市宣州區(qū)畜牧獸醫(yī)管理局,安徽宣城 242000)

目的：分析乳酸恩諾沙星對雞大腸桿菌病及沙門氏菌病的療效。方法：選取400只1日齡雛雞，隨機分為4組（各100只），飼養(yǎng)4 d后，各組隨機抽取30只做藥效試驗；雞沙門氏菌C79-13、雞大腸桿菌Caaos由中國獸藥研究所提供；將稀釋好的菌液肌肉注射感染雛雞，感染后馬上肌肉注射給藥，其中A組給予75mg·L-1乳酸恩諾沙星，B組給予125mg·L-1乳酸恩諾沙星，C組給予175mg·L-1乳酸恩諾沙星，D組給予鹽酸環(huán)丙沙星；比較兩組雛雞的體外抗菌活性及體內(nèi)抗菌活性。結(jié)果：乳酸恩諾及鹽酸環(huán)丙沙星對雞大腸桿菌Caaos的MIC均為0.0625ug·mL-1；對雞沙門氏菌C79-13的MIC分別為0.125和6.4ug·mL-1。對雞大腸桿菌Caaos的抗菌活性：A組（75mg·L-1乳酸恩諾沙星）、B組（125mg·L-1乳酸恩諾沙星）、C組（175mg·L-1乳酸恩諾沙星）三組相對增重率均明顯高于D組（鹽酸環(huán)丙沙星）（p＜0.05）。對雞沙門氏菌C79-13的抗菌活性：A組（75mg·L-1乳酸恩諾沙星）、B組（125mg·L-1乳酸恩諾沙星）相對增重率顯著高于D組（鹽酸環(huán)丙沙星）（p＜0.05）；C組（乳酸恩諾沙星175mg·L-1）與D組（鹽酸環(huán)丙沙星）比較無顯著性差異（p＞0.05）。結(jié)論：乳酸恩諾星可溶性粉能有效控制雞沙門氏菌及大腸桿菌病感染，防治雞群死亡，臨床療效顯著。

雞大腸桿菌病 沙門氏菌病 乳酸恩諾沙星 藥效

恩諾沙星是動物使用的常用抗菌藥物之一，通過藥效學[1]和體外抑菌[2]實驗顯示，恩諾沙星對革蘭氏陽性菌有顯著的抗菌作用。基于此，本文以雛雞為實驗對象，分別進行了體外抑菌和體內(nèi)藥效實驗，以進一步研究恩諾沙星對雞大腸桿菌病及沙門氏菌病的藥效。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

（1）受試藥物：恩諾沙星由廣東大華農(nóng)動物保健品股份有限公司提供，獸藥字（2011）190172119；恩諾沙星注射混懸劑配置成40.4g/L藥物含量的藥劑；恩諾沙星注射劑由南京科瑞動物藥業(yè)有限公司提供。

（2）對照藥物：鹽酸環(huán)丙沙星可溶性粉，由武漢祥和生物藥業(yè)有限公司提供，含鹽酸環(huán)丙沙星10%，批號：86483-48-9。

（3）試驗動物：400只1日齡雛雞，從安徽省宣城市中心雞場購買而來，在實驗環(huán)境下飼養(yǎng)4 d后隨機分為A組、B組、C組、D組（每組100只），并從各組中隨機抽取30只進行實驗。

（4）試驗菌種：雞沙門氏菌C79-13、雞大腸桿菌Caaos由中國獸藥研究所提供。

（5）試驗器材：微生物分離培養(yǎng)及鑒定器皿，鼠籠、雞舍及相關(guān)飼養(yǎng)設(shè)備等。

1.2 試驗方法

（1）菌液稀釋：把增毒后的大腸桿菌和沙門氏菌在實驗前1 d接種到2 m l營養(yǎng)肉湯中，37℃孵育6 h，取0.1 ml轉(zhuǎn)種10 ml營養(yǎng)肉湯中，37℃孵育18 h，為實驗用原菌液。將原菌液用生理鹽水稀釋到感染動物所需濃度。

（2）藥物稀釋：采用等比系列稀釋法，恩諾沙星混懸劑用相應(yīng)的溶媒稀釋，恩諾沙星注射劑和阿米卡星注射劑用注射用水稀釋。高低劑量組藥物濃度比值為1∶0.75。

（3）感染動物保護試驗：將稀釋好的菌液肌肉注射感染雛鴨，每只鴨注射菌量為1MLD（預試中測定），每只動物感染后即刻肌肉注射給藥2 ml/kg，連續(xù)觀察7 d，記錄感染后雛鴨的癥狀及死亡數(shù)。

1.3 數(shù)據(jù)處理

采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件對研究數(shù)據(jù)進行處理，n表示計數(shù)資料，p＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 體外抗菌活性

乳酸恩諾及鹽酸環(huán)丙沙星對雞大腸桿菌Caaos，的M IC均為0.0625μg·m L-1；對雞沙門氏菌C79-13的MIC分別為0.125和6.4μg·mL-1。

2.2 體內(nèi)抗菌活性

（1）對雞大腸桿菌Caaos的抗菌活性：注射菌液后D組（鹽酸環(huán)丙沙星）雛雞在3 d后全部死亡，A組（75mg·L-1乳酸恩諾沙星）、B組（125mg·L-1乳酸恩諾沙星）、C組（175mg·L-1乳酸恩諾沙星）三組雛雞最遲也只是掙扎到6 d就死亡了。三組比較，A組（75mg·L-1乳酸恩諾沙星）、B組（125mg·L-1乳酸恩諾沙星）、C組（175mg·L-1乳酸恩諾沙星）雛雞相對增重率明顯高于D組（鹽酸環(huán)丙沙星）。

（2）對雞沙門氏菌C79-13的抗菌活性：試驗發(fā)現(xiàn)，雛雞在經(jīng)胸肌注射接種沙門氏菌C79-13后，A、B、C三組雛雞死亡率顯著低于陽性對照組；接種細菌后7 d內(nèi)A組（75mg·L-1乳酸恩諾沙星）、B組（125mg·L-1乳酸恩諾沙星）相對增重率顯著高于D組（鹽酸環(huán)丙沙星）；與D組（鹽酸環(huán)丙沙星）比較，C組（乳酸恩諾沙星175mg·L-1）雛雞相對增重率無顯著性差異。不同藥物對雞體內(nèi)大腸桿菌Caaos及沙門氏菌C79-13的抗菌活性見表1。

表1 不同藥物對雞體內(nèi)大腸桿菌Caaos及沙門氏菌C79-13的抗菌活性（n,%）

3 討論

沙門氏菌病和大腸桿菌病是現(xiàn)代養(yǎng)殖業(yè)最為常見的細菌疾病之一，造成的經(jīng)濟損失難以估量。最近幾年來，雞沙門氏菌和雞大腸桿菌的耐藥性不斷增強，除了使用當前的藥物外，研發(fā)新藥物治療沙門氏菌病和大腸桿菌尤為必要[3]。

本研究中，注射大腸桿菌Caaos菌液后，4組雛雞感染雞大腸桿菌Caao4d后慢慢出現(xiàn)各種臨床癥狀，開始為食欲不振、精神萎靡，然后慢慢就變?yōu)橥耆珱]有食欲，青白色稀薄糞便不止。病情嚴重的出現(xiàn)雙翅下垂、雙蹼干癟、虛脫、伏地等癥狀。體內(nèi)抗菌活性研究結(jié)果提示，使用藥物乳酸恩諾沙星的A組、B組、C組雛雞相對增重率明顯高于使用藥物鹽酸環(huán)丙沙星的D組（p＜0.05）。同時，注射沙門氏菌C79-13菌液約5 h開始，雞只陸續(xù)出現(xiàn)不同程度的臨床發(fā)病癥狀，主要表現(xiàn)為精神萎靡，扎堆，呆伏不動，縮頸閉眼，反應(yīng)遲鈍，食欲減退或廢絕，呼吸困難，排白色稀糞等，發(fā)病率100%，在接種后9 h開始死亡，死亡高峰集中在感染后24 h內(nèi)。各給藥組雛雞在感染當天有輕微發(fā)病癥狀，主要是精神稍差，食欲較感染前略有下降，但給藥后2 d開始癥狀明顯改善，并很快消失。剖檢死亡雞只，急性死亡雞未見明顯病變，病程較長的可見出血性肺炎，內(nèi)臟器官充血，嗦囊空虛，肝大脆弱，心臟壞死性結(jié)節(jié)等病理變化。分離培養(yǎng)死亡雞的心、肝血，用標準抗血清對分離菌進行玻片凝集反應(yīng)為陽性，表明雛雞死亡是由沙門氏菌C79-13感染引起敗血癥所致。

恩諾沙星屬于第三代喳諾酮類藥物，主要應(yīng)用于動物臨床治療中，其抗菌功效同環(huán)丙沙星尤為相似。本文試驗過程中用到的恩諾沙星乳酸鹽是白色粉末型，無刺激性味道，容易與水相溶。根據(jù)體內(nèi)藥效結(jié)果得知，在毒性劑量較大的影響下，乳酸恩諾沙星能夠有效保護沙門氏菌和大腸桿菌對雛雞的影響，保護率高達100%。

總之，通過本實驗得知，乳酸恩諾沙星對于雛雞沙門氏菌和大綱桿菌的抗感染效果較為明顯，能夠有效改善各種臨床癥狀，降低雞群病死率，并促進雞群健康成長，臨床使用價值高。

[1] 王?；ǎ陚?，唐光武.復方鹽酸恩諾沙星可溶性粉對實驗性雞大腸桿菌病的療效試驗[J].中國畜牧獸醫(yī)文摘，2010，31 （1）：93-95.

[2] 劉小艷，方炳虎，袁照紅，等.恩諾沙星混懸液對人工誘發(fā)雞大腸桿菌病的療效觀察[J].養(yǎng)禽與禽病防治，2011，11（6）：574-579.

[3] 蔣志偉，王柄樟，孫雨，等.乳酸恩諾沙星可溶性粉在雞體內(nèi)的藥動學研究[J].畜牧與獸醫(yī)，2010，33（9）：25-27.