張仕忠 常曉濤

【中圖分類號(hào)】R-0 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B 【文章編號(hào)】1671-8801（2015）02-0363-01

在對(duì)食品生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)單位或公共場(chǎng)所從業(yè)人員作傷寒、痢疾帶菌檢查， 對(duì)各類食品樣品作沙門、志賀菌檢測(cè)時(shí)， 由于沙門菌和志賀菌檢驗(yàn)所用的增菌液不同， 即使是對(duì)同一份標(biāo)本也只能分別增菌， 分別劃線分離， 使實(shí)驗(yàn)室的工作量成倍增加， 同時(shí)由于兩者增菌時(shí)間不相同， （ 沙門菌前增菌 8～ 18 h，TTB、SC增菌18～24h 志賀菌厭氧16～ 20 h） ， 給實(shí)驗(yàn)測(cè)定的工作安排帶來一定困難， 因此， 研究和選擇合適的可同時(shí)用作沙門、志賀菌增菌的通用增菌液， 對(duì)提高實(shí)驗(yàn)室的工作效率具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。選擇了市售的 2 個(gè)牌號(hào)的沙門、志賀菌增菌液與 SC 增菌液及 GN 增菌液分別進(jìn)行了增菌效果的對(duì)比觀察， 現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 培養(yǎng)基 營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基、SC 增菌液、GN增菌液分別按國(guó)標(biāo)法 [1] 配制； 沙門、志賀菌增菌液干粉培養(yǎng)基 ① 、 ② （ 以下簡(jiǎn)稱通用增菌液 ① 、 ② ） ，分別由廣東環(huán)凱微生物試劑廠及杭州天和微生物試劑廠提供， 均按使用說明配制。

1.1.2 試驗(yàn)菌株 傷寒沙門菌（ 50071） 、鼠傷寒沙門菌 （ 50013） 、痢疾志賀菌 2 型、福氏志賀菌 2a（ 51302） 、大腸埃希菌（ ATCC25922） 由江蘇省疾病預(yù)防控制中心微生物試劑廠提供。

1.2 方法

1.2.1 試驗(yàn)菌液的制備 取上述試驗(yàn)菌株的 24 h 肉湯培養(yǎng)物， 除大腸菌外， 分別按 10 倍遞增連續(xù)稀釋至第 8 管。

1.2.2 沙門菌增菌效果的測(cè)定 取上述不同稀釋度的傷寒沙門菌及鼠傷寒沙門菌肉湯培養(yǎng)物各 0.1 ml加入 SC 增菌液及通用增菌液① 、 ②中， 同時(shí)取大腸埃希菌的 24 h 肉湯培養(yǎng)物在上述各管中各加入 0.1ml。經(jīng) 36 ℃ 24 h 增菌培養(yǎng)后各取 1 環(huán)在 XLD 瓊脂上分離培養(yǎng)， 于 36℃18～ 24 h， 檢查傷寒沙門菌及鼠傷寒沙門菌菌落的生長(zhǎng)情況。

1.2.3志賀菌增菌效果有測(cè)定 取上述不同稀釋的痢疾志賀菌及福氏志賀菌的肉湯培養(yǎng)各 0.1 ml， 分別加入 GN 增菌液及通用增菌液① 、 ② 中， 同時(shí)取大腸埃希菌的 24 h 肉湯培養(yǎng)物在上述各管中各加入0.1 ml。GN 增菌液各管經(jīng) 36℃培養(yǎng) 8 h， 通用增菌液① 、 ② 各管經(jīng) 36 ℃培養(yǎng) 24 h， 取上述增菌液各 1環(huán)在 XLD 瓊脂上分離培養(yǎng)， 于 36 ℃ 18～ 24 h， 檢查痢疾志賀菌及福氏志賀菌菌落的生長(zhǎng)情況。各項(xiàng)測(cè)定均按相同方法重復(fù)測(cè)定 5 次， 并計(jì)算出每皿檢出沙門菌或志賀菌的平均菌落形成單位。> 1～ 5 cfu/皿為“ +”； 6～ 10 cfu/ 皿為“ + + ”； 11～ 20 cfu/ 皿為“ + + + ”； > 21 cfu/ 皿為“ + + + + ”。10-6 稀釋度能分離到沙門菌或志賀菌者， 判定該增菌液符合要求[ 1] 。

2 結(jié)果

2.1 沙門菌的增菌效果 在大腸菌干擾下， 通用增菌液① 、 ②對(duì)傷寒沙門菌及鼠傷寒沙門菌的增菌效果均可達(dá)到 10 - 6 以上，詳見表1、表2。

2.2 志賀菌的增菌效果 在大腸埃希菌干擾下， 通用增菌液 ① 、 ② 對(duì)痢疾志賀菌及福氏志賀菌的增菌效果， 分別達(dá)到 10-7 及 10 -6 ， 已達(dá)到或接近達(dá)到 GN增菌液的增菌效果， 詳見表 3、表 4。

3 討論

關(guān)于腸道致病菌的增菌， 國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法及相關(guān)文獻(xiàn)中， 推薦以亞硒酸鹽胱氨酸增菌液（ SC） 、緩沖蛋白胨水（ BPW） 、四硫磺酸鹽增菌液（ TTB） 等用于沙門菌的增菌， 以 志賀氏菌增菌肉湯—新生霉素用于志賀菌的增菌。由于沙門菌與志賀菌之間， 甚至在不同種類的沙門菌之間， 一般均不能通用， 從而給基層單位實(shí)驗(yàn)室的腸道致病菌檢驗(yàn)工作帶來一定的困難或不便。因此， 有必要開展對(duì)沙門、志賀菌通用增菌培養(yǎng)基的研究。本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果可看出， 通用增菌液 ① 及 ② 在大腸埃希氏菌干擾下對(duì)傷寒沙門菌及鼠傷寒沙門菌的增菌效果可達(dá)到 10-6 以上，達(dá)到沙門菌增菌液的增菌效果； 通用增菌液 ① 、 ② 對(duì)痢疾志賀菌及福氏志賀菌的24 h 增菌效果已達(dá)到或接近GN 增菌液 8 h 增菌的效果。以通用增菌液取代沙門菌專用增菌液及志賀菌專用增菌液， 不僅使增菌管數(shù)量從原來每份標(biāo)本的 2管減少至 1 管， 而且使劃線分離用的選擇性平皿也由原來的 2 塊減少至 1 塊， 增菌時(shí)間均為 24 h， 既節(jié)省了培養(yǎng)基的用量又降低了實(shí)驗(yàn)人員的勞動(dòng)強(qiáng)度，提高了實(shí)驗(yàn)室的工作效率。其實(shí)用意義顯而易見。本次實(shí)驗(yàn)僅選擇2 株沙門菌及 2 株志賀菌進(jìn)行增菌效果觀察， 對(duì)其他沙門菌及志賀菌是否可取得同樣的增菌效果等， 尚有待于作進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)探討。

參考文獻(xiàn)：

[1] 中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB4789.4-2010食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)沙門氏菌檢驗(yàn)、中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB4789.5-2012食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)志賀氏菌檢驗(yàn)

[2] 何曉青主編. 衛(wèi)生防疫細(xì)菌檢驗(yàn) [ M] . 北京： 新華出版社， 1989： 301- 318.