邵 晞 王壽禹

（1.江蘇省連云港市畜產(chǎn)品檢測(cè)中心，江蘇 連云港222001；2.江蘇省灌云縣畜禽改良站，江蘇 灌云222200）

奶牛性控凍精輸精技術(shù)是通過人為地干預(yù)而繁殖出人們所期望性別后代的一種繁殖新技術(shù)。根據(jù)牛精液中含X染色體和Y染色體精子的DNA含量不同，利用正負(fù)電磁場(chǎng)把這兩種類型的精子分離后，選擇性的將含X（DNA）染色體的精子分裝冷凍，用于奶牛的人工授精，進(jìn)而使懷孕母牛多產(chǎn)母犢牛的技術(shù)。當(dāng)前，奶牛產(chǎn)業(yè)處于低迷階段，性控凍精輸精技術(shù)可以快速擴(kuò)繁母犢牛的數(shù)量，加快奶牛良種繁育進(jìn)程，擴(kuò)增良種能繁母牛群體，全面降低生產(chǎn)成本，促進(jìn)集約化水平的提高，成為國(guó)內(nèi)外奶牛良種擴(kuò)繁和產(chǎn)業(yè)化推廣應(yīng)用的一項(xiàng)嶄新技術(shù)。通過大面積推廣應(yīng)用可快速提高奶牛良種化率和擴(kuò)大奶牛養(yǎng)殖規(guī)模，助推奶牛產(chǎn)業(yè)提質(zhì)增效，加速奶牛產(chǎn)業(yè)化進(jìn)程。

1 技術(shù)實(shí)施前期準(zhǔn)備

奶牛性控凍精輸精技術(shù)作為一種繁殖新技術(shù)，重點(diǎn)做實(shí)前期準(zhǔn)備工作，預(yù)先明確待解決的關(guān)鍵技術(shù)，加以實(shí)施推進(jìn)。

1.1 選定試驗(yàn)應(yīng)用奶牛場(chǎng)

2008年起，選定連云港錫云奶牛養(yǎng)殖場(chǎng)、東辛農(nóng)場(chǎng)奶牛養(yǎng)殖場(chǎng)、板浦奶牛養(yǎng)殖小區(qū)、東辛農(nóng)場(chǎng)奶牛養(yǎng)殖小區(qū)4個(gè)大型奶牛養(yǎng)殖場(chǎng)區(qū)，飼養(yǎng)奶牛數(shù)量達(dá)5 000多頭，均具有較好的養(yǎng)殖技術(shù)基礎(chǔ)，集約化程度不高，奶牛良種化率低，個(gè)體產(chǎn)奶量年均偏低，連續(xù)5年實(shí)施性控凍精輸精與常規(guī)精液輸精繁育比較試驗(yàn)和技術(shù)推廣。

1.2 選定新技術(shù)實(shí)施內(nèi)容

自2008年始，在選定奶牛場(chǎng)應(yīng)用性控凍精對(duì)發(fā)情奶牛輸精，提高母牛犢生產(chǎn)數(shù)量，收集應(yīng)用有效數(shù)據(jù)，同步應(yīng)用奶牛全混合日糧（TMR）技術(shù)，建立高效擴(kuò)繁技術(shù)體系，分析匯總技術(shù)應(yīng)用成效，形成奶牛性控精液輸精和奶牛集約化生產(chǎn)集成技術(shù)，提高奶牛養(yǎng)殖的科學(xué)技術(shù)水平，提升奶牛產(chǎn)奶量和牛奶品質(zhì)。

1.3 選定待解決關(guān)鍵技術(shù)

奶牛性控凍精輸精技術(shù)試驗(yàn)與推廣，需準(zhǔn)確鑒定母牛發(fā)情，用性控精液適時(shí)對(duì)發(fā)情奶牛輸精提高其產(chǎn)母犢的比率與數(shù)量，科學(xué)做好常見繁殖疾病的防治，促進(jìn)奶牛綜合飼養(yǎng)管理，提高集約化生產(chǎn)水平。

2 新技術(shù)具體應(yīng)用做法

順利實(shí)施奶牛性控凍精輸精技術(shù)，必須扎實(shí)做好能繁母奶牛的群體選定、技術(shù)培訓(xùn)、人工授精及懷孕母牛養(yǎng)殖管理等工作，重點(diǎn)對(duì)實(shí)驗(yàn)過程收集整理的數(shù)據(jù)實(shí)時(shí)分析，及時(shí)對(duì)新技術(shù)加以改進(jìn)提高，從而獲取新技術(shù)成功的科學(xué)成果。

2.1 開展全面技術(shù)培訓(xùn)

新技術(shù)科技含量高，培訓(xùn)掌握技術(shù)要領(lǐng)是關(guān)鍵。一是邀請(qǐng)大學(xué)教授到試驗(yàn)基地開展技術(shù)培訓(xùn)，重點(diǎn)講解奶牛發(fā)情鑒定技術(shù)、性控凍精適時(shí)輸精技術(shù)、常見繁殖疾病的預(yù)防和治療技術(shù)，以及奶?？茖W(xué)飼養(yǎng)管理技術(shù)等。二是現(xiàn)場(chǎng)實(shí)施輸精操作演練，組織相關(guān)場(chǎng)戶技術(shù)人員實(shí)施操作實(shí)練，現(xiàn)場(chǎng)學(xué)習(xí)操作與交流提高，為新技術(shù)推廣應(yīng)用奠定技術(shù)基礎(chǔ)。三是推廣應(yīng)用奶牛全混合日糧（TMR）技術(shù)，做到性控精液輸精技術(shù)與和全混合日糧（TMR）飼喂同步應(yīng)用，進(jìn)一步提升奶牛集約化生產(chǎn)的綜合水平。

2.2 選定奶牛試驗(yàn)群

科學(xué)選定年齡在15月以上，體重400kg左右，以體成熟為主要指標(biāo)，膘情適中，且無疾病和遺傳病史，卵泡發(fā)育良好的青年母牛，組建起待試驗(yàn)?zāi)膛Ｈ?，建立起完善的試?yàn)編號(hào)和生產(chǎn)檔案，確定試驗(yàn)數(shù)量和欄舍，及時(shí)調(diào)整到同一欄舍，調(diào)配精干飼養(yǎng)人員，實(shí)施科學(xué)統(tǒng)一的飼養(yǎng)管理，穩(wěn)定技術(shù)應(yīng)用試驗(yàn)群體。

2.3 購用優(yōu)良性控精液

人工授精優(yōu)質(zhì)性控精液是提高產(chǎn)母犢牛比例，縮短奶牛繁殖改良世代間隔的高效技術(shù)途徑。通過使用優(yōu)質(zhì)性控精液，使奶牛繁殖在性別上實(shí)現(xiàn)人為控制，使優(yōu)質(zhì)奶牛群體在短時(shí)間內(nèi)實(shí)現(xiàn)快速擴(kuò)繁，通過輸用遺傳性能好的優(yōu)質(zhì)性控精液，使最優(yōu)秀青年母牛懷孕生產(chǎn)出更多的母犢牛，迅速提高牛群整體素質(zhì)。選購經(jīng)過后裔測(cè)定的高產(chǎn)荷斯坦奶牛性控精液待配，可充分利用現(xiàn)有優(yōu)質(zhì)公、母牛的遺傳潛力，提高奶牛的整體生產(chǎn)水平。

2.4 準(zhǔn)確鑒定母牛情期

發(fā)情奶牛一般都有明顯的外部行為表現(xiàn)，如興奮不安、哞叫、弓腰舉尾，運(yùn)步次數(shù)增加，頻繁排尿；反芻、采食和泌乳減少，追爬其它?；蜢o立接受爬跨等，當(dāng)奶牛被其他母牛爬跨而站立不動(dòng)時(shí)，要留心奶牛是否可實(shí)施配種。實(shí)踐生產(chǎn)中采取外部行為觀察法、陰道粘液測(cè)試法和直腸檢查法相結(jié)合的方法，進(jìn)行綜合判斷而確定最佳適配期。奶牛處于發(fā)情初期，粘液量少，且清亮透明、稀薄，牽縷性中等，有流動(dòng)性，pH值偏酸；到發(fā)情中期時(shí)，粘液逐漸增多，變?yōu)榘胪该?，牽縷性和pH值增加；而到發(fā)情后期時(shí)，粘液又減少，粘稠如玻璃棒狀，牽縷性很強(qiáng)，PH值中性偏堿。在發(fā)情奶牛站立時(shí)常懸吊于陰門外（稱為吊線），遇到這種情況一般即可認(rèn)定該牛正在發(fā)情階段，由于受孕后奶牛或非發(fā)情期奶牛也有少量粘液流出，所以還必須根據(jù)粘液的pH值和牽縷性進(jìn)一步斷定。將專用試紙侵入陰門部流出的新鮮粘液1秒鐘與標(biāo)準(zhǔn)比色卡對(duì)照，讀取pH值，如pH值在6.8左右，說明牛進(jìn)入發(fā)情期，再測(cè)試粘液牽縷性，測(cè)出粘液牽縷性在6～8次，一般可認(rèn)定為發(fā)情奶牛。

2.5 適時(shí)進(jìn)行輸精

確定母牛發(fā)情進(jìn)入可配期后，盡快做好輸精前各項(xiàng)準(zhǔn)備，一是做好細(xì)管精液解凍。將0.25mL的細(xì)管凍精從液氮中取出，封口端朝上、棉塞端朝下，置于35℃的水中，靜置20s實(shí)施解凍。二是做好全面消毒準(zhǔn)備。對(duì)發(fā)情奶牛和金屬輸精器實(shí)施清洗消毒，輸精人員做好準(zhǔn)備，盡量縮短精液解凍到輸入母牛體內(nèi)的時(shí)間。三是做好性控精液輸入。人工授精采用直腸把握法實(shí)施，將含有性控精液的輸精器插入陰道，緩慢通過上宮頸口，越過子宮頸皺璧，暢通抵達(dá)子宮體處。將輸精器深入到子宮體的深部或孕側(cè)子宮再進(jìn)行輸精，做到輕插、適度、慢推、緩出，防止精液到流。試驗(yàn)顯示受胎率達(dá)56.2%，達(dá)到常規(guī)凍精的受胎水平，母犢牛產(chǎn)出率由原來的50%提高到90%以上。

2.6 抓好妊娠奶牛飼養(yǎng)管理

加強(qiáng)對(duì)已輸入性控精液的妊娠母牛的全程管理。配備使用專用沙床運(yùn)動(dòng)場(chǎng)，搭建防暑涼棚，安裝噴淋裝置，做到防暑降溫，牛舍冬暖夏涼，避免水泥地面和磚面對(duì)奶牛肢蹄的損傷，持續(xù)供給潔凈飲水和全混合日糧。按時(shí)防疫和消毒，保障日常飼料投喂?fàn)I養(yǎng)平衡。

具體完整的性控精液人工授精技術(shù)路線為：

2.7 匯總比較擴(kuò)繁總體成效

自2008年始，連續(xù)5年實(shí)施性控精液人工授精和常規(guī)輸精對(duì)比試驗(yàn)，2008年至2013年，性控精液人工授精和常規(guī)輸精奶牛數(shù)分別為4324頭和926頭，常規(guī)輸精奶牛產(chǎn)仔數(shù)為866頭，其中母犢牛432頭，母犢產(chǎn)出率為49.9%；性控精液人工授精奶牛產(chǎn)仔數(shù)為4 023頭，其中母犢牛3 688頭，母犢產(chǎn)出率為91.7%。根據(jù)記錄相關(guān)生產(chǎn)數(shù)據(jù)，對(duì)情期受胎率、產(chǎn)仔數(shù)、產(chǎn)母犢數(shù)、母犢產(chǎn)出率和擴(kuò)繁母牛的年產(chǎn)奶量進(jìn)行數(shù)據(jù)匯總，對(duì)比取得性控精液人工授精比較優(yōu)勢(shì)數(shù)據(jù)（詳見表1、2），數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)比較顯示，實(shí)施性控精液繁育的母牛后續(xù)產(chǎn)奶量明顯高于常規(guī)輸精所產(chǎn)母牛，生產(chǎn)經(jīng)濟(jì)效益極為顯著（詳見表3）。

表1 奶牛性控精液輸精技術(shù)應(yīng)用產(chǎn)犢統(tǒng)計(jì)比較表

表2 奶牛性控精液輸精技術(shù)應(yīng)用年產(chǎn)奶效益比較表

表3 奶牛性控精液輸精技術(shù)應(yīng)用效益統(tǒng)計(jì)表

3 技術(shù)應(yīng)用注意事項(xiàng)

奶牛性控凍精輸精技術(shù)作為一項(xiàng)新技術(shù)，技術(shù)科技含量高，輸精時(shí)間把握好，輸精操作要求嚴(yán)，必須細(xì)心謹(jǐn)慎，不求快速，只求精準(zhǔn)。

1）輸精要防控應(yīng)激。輸精操作時(shí)，若母牛努責(zé)過甚，可采用喂給飼草、捏腰、拍打眼睛、按摩陰蒂等方法使之緩解。若母牛直腸呈罐狀時(shí)，可用手臂在直腸中前后抽動(dòng)以促使松弛。

2）操作要準(zhǔn)確緩慢。人工輸精時(shí)，操作時(shí)要精準(zhǔn)緩慢，做到輸精器輕插、適深、緩出，掌握好力度和深度，防止損傷子宮頸和子宮體，避免子宮輸精感染或損傷。

3）精液要解凍即用。要把握好精液品質(zhì)，保持精子活力在3.5以上。解凍后的性控精液應(yīng)立即輸精，延期輸精應(yīng)正確保存，細(xì)管凍精解凍后以0～4℃保存為好，10h內(nèi)授精應(yīng)用，否則精子活力下降明顯，影響精液質(zhì)量。

4）輸精要控時(shí)適量。適宜的輸精時(shí)間為母牛發(fā)情開始后12h左右或排卵前，一般掌握早晨發(fā)情傍晚輸精，中午發(fā)情夜間輸精，傍晚發(fā)情早晨輸精。情期內(nèi)輸精1～2次，兩次間隔8～12h。選定輸精時(shí)機(jī)至關(guān)重要，輸精時(shí)間過早，待卵子排出后，精子已衰老死亡：輸精過晚，排卵后輸精的受胎率又很低。

5）輸精要方法得當(dāng)。一定要把握好輸精方法及輸精部位。與新鮮精液做人工授精相比較，一般用冷凍精液輸入母畜生殖道的有效精子數(shù)大為減少，冷凍精液輸入母畜生殖道以后，其有效存活時(shí)間較自然交配大大縮短。輸精時(shí)務(wù)必將精液全部輸入到子宮頸內(nèi)口以前的部位，方可保證較高的受胎率。

4 技術(shù)應(yīng)用創(chuàng)新成效

采用性控凍精人工授精技術(shù)，要做到定場(chǎng)、定位、定量、定人、定責(zé)任，形成一套行之有效的技術(shù)實(shí)施體系，進(jìn)而促進(jìn)奶牛產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。

1）提高了奶牛發(fā)情鑒定水平。選擇適齡待配青年母牛進(jìn)行觀察鑒定，從母牛行為狀態(tài)、陰道粘液的發(fā)展變化結(jié)合直腸檢查，綜合確定了發(fā)情母牛最佳適配時(shí)期，發(fā)情母牛配種受孕率明顯提高。

2）研發(fā)了輸精綜合技術(shù)體系。通過利用性控精液人工授精，詳細(xì)做好生產(chǎn)記錄，統(tǒng)計(jì)分析產(chǎn)母犢數(shù)和生產(chǎn)時(shí)間，科學(xué)改進(jìn)輸精時(shí)間和數(shù)量，改進(jìn)子宮頸輸精為子宮體深部或孕側(cè)子宮角輸精方法，確定一次性情期輸精時(shí)間和數(shù)量，大大提高了受胎率和產(chǎn)仔率，全面形成了性控精液輸精綜合技術(shù)體系。

3）引用了奶牛TMR綜合飼養(yǎng)技術(shù)。從改善奶牛的飼養(yǎng)環(huán)境和營(yíng)養(yǎng)供給兩方面入手，應(yīng)用全混合日糧先進(jìn)的飼養(yǎng)技術(shù)，持續(xù)供應(yīng)粒度均勻的飼料，適時(shí)階段性調(diào)整全混合日糧配比，保持營(yíng)養(yǎng)穩(wěn)定與平衡，提高奶牛生產(chǎn)與產(chǎn)奶。

4）做實(shí)了奶牛常見繁殖疾病防治。對(duì)配種奶牛進(jìn)行全程跟蹤管理，及時(shí)發(fā)現(xiàn)和掌握母牛的異常變化。對(duì)適繁母牛做到包括子宮、卵巢和其它繁殖器官疾病的有效的預(yù)防和治療，保障繁殖母牛妊娠期安全，大大提高產(chǎn)犢成活率。

5 技術(shù)應(yīng)用在生產(chǎn)中的實(shí)際意義

1）母犢牛產(chǎn)出比率高，直接效益明顯。奶牛公、母犢牛的市場(chǎng)價(jià)格差一般在1 000元以上，在母牛懷孕期間飼養(yǎng)管理同成本的情況下，用性控凍精冷配，母犢牛產(chǎn)出率提高40%多，懷孕母牛的產(chǎn)犢效益顯著提高。

2）繁育母牛產(chǎn)奶量高，生產(chǎn)效益顯著。與常規(guī)冷凍精液配種相比，使用性控凍精，可以大量的繁殖出母牛后代，快速提高母牛養(yǎng)殖群體總量，進(jìn)而增加群體產(chǎn)奶量，達(dá)到母牛數(shù)和產(chǎn)奶量雙提高，全面提高生產(chǎn)效益。

3）繁育母牛優(yōu)質(zhì)快速，優(yōu)化群體改良。對(duì)能繁母奶牛推廣應(yīng)用性控凍精技術(shù)，可短期繁殖出大量的優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)的母牛后代，優(yōu)質(zhì)品種引進(jìn)與改良一步到位，促進(jìn)了牛群的淘汰速度，全面優(yōu)化奶牛養(yǎng)殖群體。

4）推廣性控凍精便捷，促進(jìn)產(chǎn)業(yè)發(fā)展。推廣應(yīng)用性控凍精改良奶牛，繁育出高比例的母犢牛，擴(kuò)增優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)的母牛群體，保障了奶牛產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。