林 霏，關(guān)為群，劉瑜佳

近年來，隨著口腔粘結(jié)技術(shù)的不斷發(fā)展，有學(xué)者提出了“乙醇濕粘結(jié)”的概念，即用梯度乙醇置換出牙本質(zhì)基質(zhì)中的水分并促進(jìn)疏水性樹脂滲入膠原纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，形成高質(zhì)量的疏水性混合層[1]。理論上，這種技術(shù)可以減少酸蝕脫鈣的膠原基質(zhì)的親水性，允許疏水粘結(jié)劑單體滲透到脫鈣膠原網(wǎng)絡(luò)，防止形成界相分離[2－3]，能更好地抵抗口腔內(nèi)的水解。但標(biāo)準(zhǔn)乙醇濕粘結(jié)技術(shù)操作繁瑣，其乙醇梯度置換的過程約耗時4min，并不適用于臨床工作。另外，目前“乙醇濕粘結(jié)”的研究多限于正常牙本質(zhì)界面，但臨床工作中，最常遇到的粘結(jié)界面是齲病影響牙本質(zhì)（caries－affected dentin，CAD）。本研究通過在齲壞離體牙上制備窩洞獲得CAD界面，分別采用傳統(tǒng)水濕粘結(jié)和簡化乙醇濕粘結(jié)方法粘結(jié)充填樹脂，采用冷熱循環(huán)實(shí)驗和染色實(shí)驗，評估簡化乙醇濕粘結(jié)技術(shù)對牙本質(zhì)粘結(jié)微滲漏的影響。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

1.1.1 主 要 材 料 Prime ＆ Bond NT（批 號1303000815，德 國 Dentsply 公 司 ）；Adper Single bond plus（批號N463807，美國3M公司），自制疏水性粘結(jié)劑見表1。光固化復(fù)合樹脂：Filtek Z250（批號N432232，美國3M 公司），齲齒顯示液（批號02472，美國Snoop公司），0.5%堿性品紅。

1.1.2 主要儀器 光固化機(jī)（spectrum QTH，德國Dentsply公司）；恒溫箱（WMZK－02型，浙江義烏冷凍機(jī)總廠）；體視顯微鏡（SMZ1000型，日本NIKON公司）；冷熱循環(huán)儀（TC－501F，蘇州威爾實(shí)驗用品有限公司）。

表1 實(shí)驗用粘結(jié)劑的基本組成Tab 1 Composition of the experimental Adhesive

1.2 樣本制備 收集在福建醫(yī)科大學(xué)附屬協(xié)和醫(yī)院口腔科1個月內(nèi)拔除的的牙根發(fā)育完整、無修復(fù)體、無折裂的慢性牙合面齲第三磨牙84顆，去除牙齒表面殘留的軟組織、牙石等。齲壞用齲齒顯示液染色，圓形車針，低速噴水條件下完全去除染色部分，保留未被染色的牙本質(zhì)部分，即為CAD。84顆離體牙隨機(jī)分為6組，各組操作均先進(jìn)行37%磷酸酸蝕15s后，流水沖洗15s，拭干并保持界面濕潤，之后按照分組選擇不同粘結(jié)劑及粘結(jié)技術(shù)進(jìn)行粘結(jié)，并充填樹脂（具體分組見圖1），充填深度為約2mm（窩洞深度＜2mm的離體牙丟棄，窩洞＞2mm的離體牙僅充填2mm而未填滿）。所有粘結(jié)過程光源均與洞底粘結(jié)面垂直照射，光照角度約為90°。粘結(jié)完成后的牙齒置于37℃的生理鹽水中儲存24h。

1.3 冷熱循環(huán)條件 將試件放置在冷熱循環(huán)儀中進(jìn)行冷熱水循環(huán)實(shí)驗，共5 000次，5℃和55℃的水中各停留30s為1次循環(huán)。

1.4 邊緣微滲漏測定 樣本自然干燥后，用自凝樹脂封閉根尖孔，牙根、牙冠表面涂2層透明指甲油，僅暴露窩洞周圍2mm的區(qū)域，浸入到0.5%的堿性品紅中，室溫下染色24h，流水沖洗。用金剛砂片將實(shí)驗牙沿充填體中間縱向剖開，體式顯微鏡下放大12倍觀察牙合面近、遠(yuǎn)中側(cè)壁染色情況，按等級記錄。

1.5 評定標(biāo)準(zhǔn) 0級：無染色；1級：染色在洞深的1／3；2級：染色達(dá)洞深的1／3～2／3；3級：染色達(dá)洞深2／3以上，但未達(dá)洞底；4級：染色沿軸壁延伸至洞底[5]。

圖1 各實(shí)驗組粘結(jié)步驟Fig 1 Bonding step of each group

圖2 染色分級示意圖Fig 2 Staining grading schematic

1.6 結(jié)果 經(jīng)過5 000次冷熱循環(huán)后，1組和2組微滲漏情況差別無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；3組較4組微滲漏有明顯減少，差別有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05，表2）。

2 討 論

在傳統(tǒng)水濕粘結(jié)技術(shù)中，粘結(jié)劑中的樹脂單體替換牙本質(zhì)膠原纖維間的水分子，進(jìn)而滲入脫礦后牙本質(zhì)表面暴露的膠原纖維網(wǎng)，固化后形成混合層。納米滲漏的研究已證實(shí)在濕粘結(jié)牙本質(zhì)混合層中有含水通道，這表明并不是所有殘留的水分都能被完全去除。這些殘留的水分子可以阻止樹脂單體的聚合，導(dǎo)致樹脂聚合不充分[6]。

由于復(fù)合樹脂的熱膨脹系數(shù)比牙本質(zhì)高，在冷熱循環(huán)的過程中，長期的膨脹與收縮會在粘結(jié)界面內(nèi)產(chǎn)生應(yīng)力，使界面內(nèi)原有的缺陷擴(kuò)大，產(chǎn)生新的微裂隙，或者在粘結(jié)初期即產(chǎn)生的舊有微裂隙進(jìn)一步擴(kuò)大。有研究表明，當(dāng)親水性粘結(jié)劑單體浸潤不完全時，常會在混合層的底部形成一個缺陷區(qū)域，該區(qū)域部分膠原纖維網(wǎng)及基質(zhì)金屬蛋白酶暴露[7]，而冷熱循環(huán)時溫度的變化能激活基質(zhì)金屬蛋白酶，從而導(dǎo)致膠原纖維網(wǎng)的降解[8]。另外，熱水還能加速樹脂的塑化，尤其是在親水單體含量高的粘結(jié)劑如PB和SB[9]。本實(shí)驗中親水性粘結(jié)劑SB和PB組標(biāo)本在經(jīng)過5 000次冷熱循環(huán)后，水濕粘結(jié)組（3組、5組）均發(fā)現(xiàn)了較多的微滲漏，提示其混合層中或許殘留了較多的水分子和缺陷區(qū)域。

表2 6組微滲漏程度結(jié)果Tab 2 The microleakage results of each group

乙醇濕粘結(jié)技術(shù)中用乙醇替換水的過程和組織包埋有點(diǎn)類似，在組織包埋的脫水過程中需要梯度濃度的乙醇作用于組織上數(shù)小時來完全置換組織中的水分，因此，乙醇濕粘結(jié)技術(shù)也推薦使用梯度濃度乙醇逐步替換牙本質(zhì)中的水分子[10]。但這個過程耗時太長，臨床操作是無法滿足的。因此本實(shí)驗提出了簡化乙醇濕粘結(jié)法。在本實(shí)驗自制疏水性粘結(jié)劑組中，簡化乙醇濕粘結(jié)技術(shù)并沒有明顯改善CAD界面的微滲漏情況。乙醇在23℃下的蒸汽壓是52.50mmHg（1mmHg＝133.3Pa），而 水 為21.05mmHg，這意味著乙醇蒸發(fā)得比水快多了。而簡化乙醇替換的過程一共只有45s，可能并不足以讓乙醇完全替換牙本質(zhì)小管和膠原纖維間的水分子，殘留的水分子又影響了后續(xù)疏水性粘結(jié)劑的充分滲入。這些置換過程中產(chǎn)生的粘結(jié)缺陷在經(jīng)過5 000次冷熱循環(huán)后得以放大，因此在2組中并沒有觀察到微滲漏情況的改善。

為評估乙醇濕粘結(jié)技術(shù)與目前臨床常用的親水性全酸蝕粘結(jié)劑聯(lián)合運(yùn)用的粘結(jié)效果，本實(shí)驗還選用了2種最具代表性的成品全酸蝕粘結(jié)劑：SB和PB分別代表乙醇和丙酮兩種不同溶劑基質(zhì)。在親水性粘結(jié)劑組中，SB的溶劑為乙醇和水，PB的溶劑為丙酮，相同粘結(jié)技術(shù)下兩兩比較差別無統(tǒng)計學(xué)意義，因此推斷在相同條件下，2種粘結(jié)劑預(yù)防微滲漏的效果相近。本結(jié)果顯示，運(yùn)用簡化的乙醇濕粘結(jié)技術(shù)并不能完全消除微滲漏。但是，SB簡化乙醇濕粘結(jié)組微滲漏的情況大大減少，與SB水濕粘結(jié)組比較差別有統(tǒng)計學(xué)意義。Perdigao報道，丙酮在常溫狀態(tài)下具有更強(qiáng)的揮發(fā)性能，在牙本質(zhì)濕粘結(jié)技術(shù)中伴隨著粘結(jié)劑中的有機(jī)溶劑的有效揮發(fā)，可以充分帶走膠原纖維網(wǎng)中的殘留水分，因而增加隨后功能單體的滲入[11]。實(shí)驗組中，乙醇已經(jīng)預(yù)先替換了膠原纖維網(wǎng)中的水分子，使得丙酮作為“優(yōu)效逐水劑”的效果并不明顯。反而，以乙醇和水作為溶劑的SB粘結(jié)劑在乙醇濕粘結(jié)技術(shù)中粘結(jié)效果得到了顯著提高。

綜上所述，簡化乙醇濕粘結(jié)技術(shù)較傳統(tǒng)水濕粘結(jié)技術(shù)而言，有改善微滲漏的情況，尤其在SB組。但是簡化乙醇濕粘結(jié)技術(shù)并不能完全消除微滲漏。如何能夠最大限度的降低微滲漏，并且適用于臨床操作，還有待進(jìn)一步的研究。

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