彭 墨 徐 瑋 麥康森 周慧慧 譚 朋杜健龍 艾慶輝*

(1.中國(guó)海洋大學(xué)，海水養(yǎng)殖教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，農(nóng)業(yè)部水產(chǎn)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，青島 266003;2.江西農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，南昌 330045)

水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)可持續(xù)發(fā)展與魚(yú)油資源有限性的矛盾日益激化，尋找合適的替代脂肪源勢(shì)在必行。植物油因具備供應(yīng)穩(wěn)定、相對(duì)低的二 英和其他有機(jī)污染物含量、較大可獲得性和較高含量不飽和脂肪酸等優(yōu)點(diǎn)，已成為極具潛力的魚(yú)油替代者。相對(duì)于其他植物油，菜籽油具有適宜的C18∶2n-6［亞油酸(LA)］，低含量的 C18∶3n-3［α-亞麻酸(ALA)］和高含量的C18∶1n-9，被認(rèn)為是能量代謝偏好的底物［1］。有研究表明，菜籽油替代少量魚(yú)油不會(huì)顯著影響?hù)~(yú)體生長(zhǎng)和飼料利用［2-9］，但菜籽油全部替代魚(yú)油會(huì)對(duì)魚(yú)體生長(zhǎng)和品質(zhì)產(chǎn)生顯著影響，如生長(zhǎng)速度下降［10］、腹腔或肝臟脂肪過(guò)多沉積［11］、肝臟組織發(fā)生病變［12］、肌肉中 n-3 長(zhǎng)鏈多不飽和脂肪酸(n-3 LC-PUFA)含量顯著下降［2-5，8-9］等。魚(yú)肉對(duì)人類(lèi)營(yíng)養(yǎng)的最大價(jià)值在于其是n-3 LC-PUFA等活性物質(zhì)的來(lái)源。攝食高含量n-3 LC-PUFA魚(yú)肉后會(huì)對(duì)人體健康產(chǎn)生積極的影響，如抑制心臟病的發(fā)生和降低炎性反應(yīng)的發(fā)生［13］。因此，對(duì)植物油替代效果的衡量不僅需關(guān)注魚(yú)體的生長(zhǎng)和飼料利用，還需關(guān)注魚(yú)體健康和魚(yú)肉n-3 LC-PUFA含量。

大菱鲆(Scophthalmus maximus L.)是我國(guó)北方重要的經(jīng)濟(jì)養(yǎng)殖種類(lèi)，因其美味的肉質(zhì)、快速生長(zhǎng)的特性及較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值，在亞洲和歐洲被廣泛養(yǎng)殖。目前，已有的關(guān)于大菱鲆飼料中植物油替代魚(yú)油的研究主要涉及豆油、亞麻籽油、橄欖油和紅花油［14-16］，有關(guān)菜籽油在大菱鲆上的替代效果研究還未見(jiàn)報(bào)道。本試驗(yàn)以菜籽油分別替代飼料中 0、33.3%、66.7%和 100.0%的魚(yú)油，探究其對(duì)大菱鲆生長(zhǎng)、脂肪酸組成及脂肪沉積的影響，為大菱鲆飼料中植物油替代魚(yú)油提供理論依據(jù)，以緩解魚(yú)油短缺難題，更好地促進(jìn)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)飼料配方和制備

以白魚(yú)粉、豆粕、谷朊粉和酪蛋白作為主要的蛋白質(zhì)源，以菜籽油分別替代 0、33.3%、66.7%和100.0%的魚(yú)油，配制粗蛋白質(zhì)含量為50%(干物質(zhì)基礎(chǔ))、粗脂肪含量為12%(干物質(zhì)基礎(chǔ))的4種等氮等脂飼料(表1)。魚(yú)油和菜籽油分別購(gòu)于福山大茂飼料有限公司和寧波奉化大堰阿拉榨油坊，其脂肪酸組成見(jiàn)表2。因魚(yú)粉中含有脂肪，魚(yú)油中LC-PUFA含量占總脂肪酸的18%～25%(參照李慶民等［17］、Turchini等［18］的方法計(jì)算)。以魚(yú)油總脂肪酸中含有18%的LC-PUFA計(jì)，可推測(cè)出全魚(yú)油組、33.3%菜籽油組、66.7%菜籽油組和全菜籽油組飼料中n-3 LC-PUFA含量分別約為1.70%、1.25%、0.80%和 0.35%。

飼料制備之前，魚(yú)粉和豆粕等飼料原料先經(jīng)粉碎，過(guò)320μm篩網(wǎng)，再按配比從小到大逐級(jí)定量均勻混合;較大的混合物進(jìn)入V型攪拌機(jī)充分混合25 min。將大豆卵磷脂、菜籽油和魚(yú)油混合均勻，隨后將其與已混好的干粉充分混勻，再加入適量的水揉勻，全自動(dòng)漁用餌料機(jī)(F-26Ⅱ，華南理工大學(xué)研制)將其加工制成直徑為3.0 mm的硬顆粒飼料，45～55℃烘干至飼料水分含量為10%左右，待飼料顆粒干燥冷卻后，雙層塑料袋包裝并封口，所制飼料置于-20℃冰箱保存?zhèn)溆?，以防止飼料脂肪被氧化?/p>

表1 試驗(yàn)飼料組成及營(yíng)養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets(DM basis) %

續(xù)表1

表2 脂肪源和飼料脂肪酸組成(占總脂肪酸的百分比)Table 2 Fatty acid composition of lipid sources and diets(percentage of total fatty acids) %

1.2 飼養(yǎng)管理和樣品采集

試驗(yàn)用統(tǒng)一規(guī)格的同批次健康大菱鲆幼魚(yú)購(gòu)于青島膠州養(yǎng)殖場(chǎng)。在正式試驗(yàn)之前，所有試驗(yàn)魚(yú)先用大菱鲆0#料(七好生物科技有限公司提供)暫養(yǎng)1周適應(yīng)養(yǎng)殖系統(tǒng)，再用自制硬顆粒飼料(混合的本試驗(yàn)配制的4種飼料)暫養(yǎng)1周使其適應(yīng)自制飼料。在饑餓 24 h后，初重為(5.89±0.02)g的大菱鲆幼魚(yú)被隨機(jī)分到12個(gè)桶(300 L，35尾/桶)。每種飼料隨機(jī)飼喂3桶試驗(yàn)魚(yú)。每天投喂2次(08:00和18:00)，飽食投喂，養(yǎng)殖周期為92 d。大菱鲆在飼料下沉過(guò)程時(shí)攝食，攝食后，桶內(nèi)多余的飼料和糞便立即用吸管吸去。記錄攝食量，如有死魚(yú)記錄數(shù)量并稱(chēng)重。海水持續(xù)經(jīng)由水泵泵到泡沫分離器，經(jīng)由生物塔砂濾到高位池后最終進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)，控制每桶水流速2 L/min。每次攝食完后，循環(huán)水系統(tǒng)排污，在試驗(yàn)第1個(gè)月，每桶更換1/2的水，之后更換70%桶體積水。循環(huán)水系統(tǒng)使用氣石持續(xù)充氧。在養(yǎng)殖過(guò)程中，水溫17.5～19.0 ℃;鹽度28.0%～31.0%;溶氧濃度在7 mg/L左右;氨態(tài)氮(NH4-N)、硝態(tài)氮(NO3-N)和亞硝酸鹽氮(NO2-N)濃度均低于100.0μg/L。從試驗(yàn)第6周開(kāi)始，投喂5 h后收集桶內(nèi)成形的糞便，放入5 mL離心管，2 000×g離心10 min后保存于-20℃，待后期用于表觀消化率的測(cè)定。

在試驗(yàn)開(kāi)始之前，隨機(jī)挑出15尾魚(yú)做全魚(yú)常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分分析。養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，所有魚(yú)都饑餓處理24 h。每桶各取6尾魚(yú)稱(chēng)重，取背部肌肉、肝臟，稱(chēng)重。將肝臟和肌肉放入5 mL離心管，液氮速凍，隨后保存在-80℃，待后期用于脂肪酸組成以及水分、粗脂肪含量的測(cè)定。此外，每桶取5尾魚(yú)放入樣品袋，-20℃保存，待后期用于全魚(yú)常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分分析。

1.3 指標(biāo)測(cè)定

1.3.1 常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分分析

飼料原料、飼料和試驗(yàn)魚(yú)均測(cè)定水分、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪和粗灰分含量。樣品在105℃烘干到恒重后求得干物質(zhì)含量，然后進(jìn)行生化組分分析。粗蛋白質(zhì)含量的測(cè)定采用凱氏定氮法;粗脂肪含量的測(cè)定采用索氏抽提法;粗灰分含量的測(cè)定采用馬弗爐灼燒法。每份樣品均重復(fù)測(cè)定2次，若相對(duì)偏差大于2%，則增加重復(fù)次數(shù)，采用相對(duì)偏差在2%以下的2個(gè)測(cè)定值的平均值為測(cè)定結(jié)果。

肝臟和肌肉脂肪含量分析參照Floch等［19］方法略作修改，詳見(jiàn)彭墨等［20］的方法。

1.3.2 脂肪酸組成測(cè)定

脂肪酸組成的測(cè)定參照Metcalfe等［21］的方法略作修改，詳見(jiàn)彭墨等［20］的方法。

1.3.3 釔含量測(cè)定

將糞便和飼料樣品冷凍干燥20 h，研磨成粉，再次冷凍干燥6 h。稱(chēng)取100 mg糞便(或飼料)于干凈燒瓶中，加入10 mL高氯酸，電爐上灼燒，直到燒瓶中液體呈透明狀。將透明液體轉(zhuǎn)移至100 mL容量瓶中，用雙蒸水定容，0.22μm濾膜過(guò)濾后即可借助電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜儀(ICP-OES，瓦里安公司，美國(guó))測(cè)定釔的含量。

1.4 計(jì)算公式

存活率(survival rate，SR，%)=100×終末魚(yú)數(shù)量/初始魚(yú)數(shù)量;

特定生長(zhǎng)率(special growth rate，SGR，%/d)=100×(ln終末體重-ln初始體重)/試驗(yàn)天數(shù);

飼料效率(feed conversion rate，F(xiàn)CR)=(終末體重-初始體重)/飼料干物質(zhì)消耗量;

攝食率(feed intake ratio，F(xiàn)IR，%/d)=100×飼料干物質(zhì)消耗量/［(初始體重+終末體重)/2］/試驗(yàn)天數(shù);

表觀凈蛋白質(zhì)利用率(apparent net protein utilization，ANPU，%)=100×(末期魚(yú)體蛋白質(zhì)含量-初始魚(yú)體蛋白質(zhì)含量)/攝食

飼料蛋白質(zhì)的量;

肝體比(hepatosomatic index，HSI，%)=100×肝臟重/體重;

脂肪表觀消化率［apparent digestibility coefficient(ADC)of lipid，%］=100×［1-(飼料中 Y2O3含量/飼料脂肪含量)×(糞便脂肪含量/糞便中Y2O3含量)］。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，在單因素方差分析(one-way ANOVA)達(dá)到顯著水平時(shí)(P＜0.05)，采用 Turkey’s檢驗(yàn)進(jìn)行多重比較，數(shù)據(jù)表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤的形式。

2 結(jié)果

2.1 菜籽油替代魚(yú)油對(duì)大菱鲆幼魚(yú)存活、生長(zhǎng)和形體指標(biāo)的影響

由表3可知，全菜籽油組大菱鲆幼魚(yú)SR較其他組顯著下降(P＜0.05)，與其他各組間差異不顯著(P＞0.05)。各組大菱鲆幼魚(yú)的 FIR在1.51%/d～1.63%/d 范圍內(nèi)，但菜籽油替代水平并未顯著影響大菱鲆幼魚(yú)的FIR(P＞0.05)。大菱鲆幼魚(yú)的終末體重和SGR均隨菜籽油替代水平的升高而下降，全菜籽油組的終末體重和SGR顯著低于全魚(yú)油組(P＜0.05)，其他組間差異不顯著(P＞0.05)。菜籽油替代水平并未顯著影響大菱鲆幼魚(yú)的FCR和ANPU(P＞0.05)。大菱鲆幼魚(yú)的HSI隨菜籽油替代水平的升高而升高(P＜0.05)，且全菜籽油組的HSI顯著高于全魚(yú)油組(P＜0.05)，與其他組間差異不顯著(P＞0.05)。

表3 菜籽油替代魚(yú)油對(duì)大菱鲆幼魚(yú)存活、生長(zhǎng)和形體指數(shù)的影響Table 3 Effects of fish oil replacement by rapeseed oil on growth，survival and body parameters of juvenile turbot(Scophthalmus maximus L.)(n=3)

2.2 菜籽油替代魚(yú)油對(duì)大菱鲆幼魚(yú)體成分、肝臟和肌肉脂肪含量以及飼料脂肪表觀消化率的影響

由表4可知，菜籽油替代水平并未顯著影響大菱鲆幼魚(yú)的體成分和肌肉脂肪含量以及飼料脂肪表觀消化率(P＞0.05)。大菱鲆幼魚(yú)的肝臟脂肪含量隨著菜籽油替代水平的升高而升高，當(dāng)菜籽油替代66.7%和100.0%的魚(yú)油時(shí)，該組肝臟脂肪含量顯著高于全魚(yú)油組(P＜0.05)，且全菜籽油組肝臟脂肪含量還顯著高于33.3%菜籽油組(P＜0.05)，但與 66.7%菜籽油組間差異不顯著(P＞0.05)。

表4 菜籽油替代魚(yú)油對(duì)大菱鲆幼魚(yú)體成分、肝臟和肌肉脂肪含量以及飼料脂肪表觀消化率的影響Table 4 Effects of fish oil replacement by rapeseed oil on body composition，lipid content in muscle and liver of juvenile turbot(Scophthalmus maximus L.)and dietary lipid apparent digestibility(n=3) %

2.3 菜籽油替代魚(yú)油對(duì)大菱鲆幼魚(yú)肝臟和肌肉脂肪酸組成的影響

隨著菜籽油替代水平的升高，大菱鲆幼魚(yú)肝臟中C18∶1及肝臟和肌肉中LA和ALA含量隨之升高，肝臟和肌肉中 C14∶0、C18∶0、C20∶4n-6［花生四烯酸(ARA)］、C20∶5n-3(EPA)和 C22∶6n-3(DHA)含量隨之下降(表5)。相對(duì)于全魚(yú)油組，66.7%菜籽油組和全菜籽油組肌肉和肝臟中LA和ALA含量顯著升高(P＜0.05)，而EPA和 DHA含量則顯著下降(P＜0.05)。飼料C18∶1含量與大菱鲆幼魚(yú)肝臟和肌肉中 C18∶1、LA、ALA、EPA 和DHA含量存在正相關(guān)關(guān)系(圖1)。

表5 菜籽油替代魚(yú)油對(duì)大菱鲆幼魚(yú)肝臟和肌肉脂肪酸組成的影響(占總脂肪酸的百分比)Table 5 Effects of fish oil replacement by rapeseed oil on fatty acid composition in liver and muscle of turbot(Scophthalmus maximus L.)(percentage of total fatty acids) %

續(xù)表5

圖1 飼料C18∶1含量與大菱鲆幼魚(yú)肝臟和肌肉中 C18 ∶1、C18 ∶2n-6、C18 ∶3n-3、C20∶5n-3和 C22∶6n-3含量的關(guān)系Fig.1 Relationship between dietary C18 ∶1 content and C18 ∶1n，C18 ∶2n-6，C18 ∶3n-3，C20 ∶5n-3 and C22∶6n-3 contents in liver and muscle of turbot(Scophthalmus maximus L.)

3 討論

本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，在養(yǎng)殖周期為92 d時(shí)，飼料中菜籽油替代66.7%的魚(yú)油并未顯著影響大菱鲆幼魚(yú)的生長(zhǎng)和飼料利用。該結(jié)果與一些海水魚(yú)如歐洲 鱸 魚(yú) (Dicentrarchus labrax L.)［6］和 金 頭 鯛(Sparus aurata)［7］的研究結(jié)果一致。但當(dāng)魚(yú)油全部被菜籽油替代時(shí)，則會(huì)顯著影響大菱鲆的生長(zhǎng)，這與布魯克嘉魚(yú)(Salvelinus fontinalis)［2］、大西洋鮭 魚(yú) (Salmo salar L.)［3-5］、虹 鱒 (Oncorhynchus mykiss)［8］和青魚(yú) (Mylopharyngodon piceus)［9］上的研究不一致，上述這些研究表明菜籽油全部替代魚(yú)油并未顯著魚(yú)體的生長(zhǎng)。Turchini等［18］指出，當(dāng)植物油替代全部魚(yú)油時(shí)，魚(yú)體出現(xiàn)生長(zhǎng)下降的原因大多與飼料中的n-3 LC-PUFA不足有關(guān)。本試驗(yàn)中，大菱鲆幼魚(yú)的FE、FIR及飼料的脂肪表觀消化率均未受到菜籽油替代水平的顯著影響，因此全菜籽油組魚(yú)體生長(zhǎng)下降的原因可能是飼料中n-3 LC-PUFA的含量不能滿(mǎn)足魚(yú)體需求。在本試驗(yàn)中，全魚(yú)油組、33.3%菜籽油組、66.7%菜籽油組和全菜籽油組n-3 LC-PUFA的含量分別約為1.70%、1.25%、0.80%和 0.35%。Léger等［22］研究指出，大菱鲆必需脂肪酸需求可能低于0.6%;Gatesoupe等［23］指出，大菱鲆必需脂肪酸需求可能在0.8%。因此，全菜籽油組飼料中0.35%的 n-3 LC-PUFA含量不能滿(mǎn)足魚(yú)體對(duì)n-3 LC-PUFA的需求，故可能影響大菱鲆對(duì)飼料其他營(yíng)養(yǎng)素的利用。

本試驗(yàn)中，菜籽油替代水平并未顯著影響大菱鲆幼魚(yú)的體成分。而另有研究表明飼料中菜籽油含量過(guò)高時(shí)顯著影響青魚(yú)的魚(yú)體水分含量［9］，結(jié)果的不同可能與養(yǎng)殖魚(yú)類(lèi)和養(yǎng)殖時(shí)間有關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)，大菱鲆幼魚(yú)的HSI隨菜籽油替代水平的升高而升高，且全菜籽油組的HSI顯著高于全魚(yú)油組。這可能與肝臟脂肪含量升高有關(guān)。大菱鲆幼魚(yú)的肝臟脂肪含量隨菜籽油替代水平的升高而升高，其結(jié)果與在青魚(yú)［9］和金頭鯛［11］上所得結(jié)果一致。脂肪過(guò)多沉積于肝臟可能與肝臟n-3/n-6 PUFA的不平衡密切有關(guān)［24］。本試驗(yàn)中全魚(yú)油組、33.3%菜籽油組、66.7%菜籽油組和全菜籽油組飼料中 n-3/n-6 PUFA 分別為 1.20%、0.88%、0.61%和 0.42%，相 對(duì) 應(yīng) 的 4種 飼 料 中 n-3 LC-PUFA的含量分別約為 1.70%、1.25%、0.80%和0.35%。n-3 LC-PUFA一方面能激活過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體α(peroxisome proliferatorsactivated receptorα，PPARα)，進(jìn)而促進(jìn)脂肪分解［25］;另一方面能抑制固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白-1c(sterol regulatory element-binding protein 1c，SREBP-1c)的表達(dá)，進(jìn)而抑制脂肪合成［26］。因此，菜籽油替代魚(yú)油后n-3/n-6 PUFA的不平衡和較低n3 LC-PUFA含量可能造成肝臟脂肪過(guò)多沉積。

魚(yú)類(lèi)脂肪酸組成與人類(lèi)健康息息相關(guān)［27］。本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，隨菜籽油替代水平的升高，肝臟ARA、EPA和DHA含量以及n-3/n-6 PUFA均隨之下降，而肝臟C18∶1、LA和ALA含量則隨之升高，且與飼料C18∶1之間存在顯著的相關(guān)性。雖然飼料中LA和ALA含量隨菜籽油替代水平的升高而升高，但肝臟和肌肉中ARA、EPA和DHA含量則隨之下降。這可能與大菱鲆沒(méi)有或只具有較低轉(zhuǎn)化LA為ARA或ALA為EPA和DHA的能力有關(guān)。盡管大菱鲆△6脂肪酸去飽和酶(Fad)活力較高，但其△5Fad和延長(zhǎng)酶(從C18到C20)活力相對(duì)較低［28-29］。此外，肝臟和肌肉中ARA含量降低可能還與ARA轉(zhuǎn)化為類(lèi)二十烷酸產(chǎn)物，如前列腺素2(PGE2)等炎性物質(zhì)有關(guān)，最終影響?hù)~(yú)體的免疫能力。本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，全菜籽油組存活率低于其他3組。因此，菜籽油高水平替代魚(yú)油可能會(huì)影響?hù)~(yú)體的免疫力，其機(jī)理還未知，需進(jìn)一步深入研究。

4 結(jié) 論

菜籽油替代66.7%的魚(yú)油雖未顯著影響大菱鲆幼魚(yú)生長(zhǎng)和飼料利用，但顯著影響大菱鲆肝臟脂肪含量和肌肉n-3 LC-PUFA含量，故從營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)的角度，在大菱鲆幼魚(yú)飼料中菜籽油替代魚(yú)油的水平應(yīng)低于66.7%。

致謝:

感謝國(guó)家鲆鰈類(lèi)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系(CARS 50-G08)經(jīng)費(fèi)的資助，感謝同實(shí)驗(yàn)室左然濤博士在試驗(yàn)方案設(shè)計(jì)以及孟玉瓊、王震、韓麗蓉、路凱和陽(yáng)鋼同學(xué)在飼料制備、養(yǎng)殖試驗(yàn)及樣品采集時(shí)給予的幫助。

［1］ HENDERSON R J.Fatty acid metabolism in freshwater fish with particular reference to polyunsaturated fatty acids［J］.Archiv f?r Tierern?hrung，1996，49(1):5-22.

［2］ GUILLOU A，SOUCY P，KHALIL M，et al.Effects of dietary vegetable and marine lipid on growth，muscle fatty acid composition and organoleptic quality of flesh of brook charr(Salvelinus fontinalis)［J］.Aquaculture，1995，136(3/4):351-362.

［3］ TOCHER D R，BELL JG，DICK JR，et al.Polyunsaturated fatty acid metabolism in Atlantic salmon(Salmo salar)undergoing parr-smolt transformation and the effects of dietary linseed and rapeseed oils［J］.Fish Physiology and Biochemistry，2000，23(1):59-73.

［4］ BELL J G，TOCHER D R，HENDERSON R J，et al.Altered fatty acid compositions in Atlantic salmon(Salmo salar)fed diets containing linseed and rapeseed oils can be partially restored by a subsequent fish oil finishing diet［J］.The Journal of Nutrition，2003，133(9):2793-2801.

［5］ TORSTENSEN B E，F(xiàn)R?YLAND L，LIE ?.Replacing dietary fish oil with increasing levels of rapeseed oil and olive oil—effects on Atlantic salmon(Salmo salar L.)tissue and lipoprotein lipid composition and lipogenic enzyme activities［J］.Aquaculture Nutrition，2004，10(3):175-192.

［6］ MOURENTE G，GOOD JE，BELL JG.Partial substitution of fish oil with rapeseed，linseed and olive oils in diets for European sea bass(Dicentrarchus labrax L.):effects on flesh fatty acid composition，plasma prostaglandins E2and F2α，immune function and effectiveness of a fish oil finishing diet［J］.Aquaculture Nutrition，2005，11(1):25-40.

［7］ IZQUIERDO M S，MONTERO D，ROBAINA L，et al.Alterations in fillet fatty acid profile and flesh quality in gilthead seabream(Sparus aurata)fed vegetable oils for a long term period.Recovery of fatty acid profiles by fish oil feeding［J］.Aquaculture，2005，250(1/2):431-444.

［8］ PETTERSSON A，JOHNSSON L，BR?NN?S E，et al.Effects of rapeseed oil replacement in fish feed on lipid composition and self-selection by rainbow trout(Oncorhynchus mykiss)［J］.Aquaculture Nutrition，2009，15(6):577-586.

［9］ SUN S，YE J，CHEN J，et al.Effect of dietary fish oil replacement by rapeseed oil on the growth，fatty acid composition and serum non-specific immunity response of fingerling black carp，Mylopharyngodon piceus［J］.Aquaculture Nutrition，2011，17(4):441-450.

［10］ 王驥騰，韓濤，田麗霞，等.3種植物油源對(duì)軍曹魚(yú)生長(zhǎng)、體組成和脂肪酸組成的影響［J］.浙江海洋學(xué)院學(xué)報(bào):自然科學(xué)版，2007，26(3):237-246.

［11］ FOUNTOULAKI E，VASILAKI A，HURTADO R，et al.Fish oil substitution by vegetable oils in commercial diets for gilthead sea bream(Sparus aurata L.):effects on growth performance，flesh quality and fillet fatty acid profile:recovery of fatty acid profiles by a fish oil finishing diet under fluctuating water temperatures［J］.Aquaculture，2009，289(3/4):317-326.

［12］ CABALLERO M J，OBACH A，ROSENLUND G，et al.Impact of different dietary lipid sources on growth，lipid digestibility，tissue fatty acid composition and histology of rainbow trout，Oncorhynchus mykiss［J］.Aquaculture，2002，214(1/2/3/4):253-271.

［13］ SIMOPOULOSA P.Essential fatty acids in health and chronic disease［J］.The American Journal of Clinical Nutrition，1999，70(3):560s-569s.

［14］ BELL JG，TOCHER D R，MACDONALD F M，et al.Effects of diets rich in linoleic(18∶2n-6)and α-linolenic(18∶3n-3)acids on the growth，lipid class and fatty acid compositions and eicosanoid production in juvenile turbot(Scophthalmus maximus L.)［J］.Fish Physiology and Biochemistry，1994，13(2):105-118.

［15］ BEll J G，TOCHER D R，F(xiàn)ARNDALE B M，et al.Effects of essential fatty acid-deficient diets on growth，mortality，tissue histopathology and fatty acid compositions in juvenile turbot(Scophthalmus maximus)［J］.Fish Physiology and Biochemistry，1999，20(3):263-277.

［16］ ALTUNDAG M S，TIRIL S U，OZDEMIR A.Effects of safflower oil supplementation in diet on growth performance and body fatty acid composition of turbot(Psetta maxima)［J］.Aquaculture International，2014，22(2):597-605.

［17］ 李慶民，陳桂范，高實(shí)，等.氣相色譜外標(biāo)法測(cè)定魚(yú)油中EPA和DHA的含量［J］.沈陽(yáng)藥科大學(xué)學(xué)報(bào)，1996，13(4):259-261.

［18］ TURCHINI G M，TORSTENSEN B E，NG W K.Fish oil replacement in finfish nutrition［J］.Reviews in Aquaculture，2009，1(1):10-57.

［19］ FOLCH J，LEES M，SLOANE STANLEY G H.A simple method for the isolation and purification of total lipides from animal tissues［J］.The Journal of Biological Chemistry，1957，226(1):497-509.

［20］ 彭墨，徐瑋，麥康森，等.亞麻籽油替代魚(yú)油對(duì)大菱鲆幼魚(yú)生長(zhǎng)、脂肪酸組成及脂肪沉積的影響［J］.水產(chǎn)學(xué)報(bào)，2014，38(8):1131-1139.

［21］ METCALFE L D，SCHMITZ A A，PELKA JR.Rapid preparation of fatty acid esters from lipids for gas chromatographic analysis［J］.Analytical Chemistry，1966，38(3):514-515.

［22］ LéGER C，GATESOUPE FJ，METAILLER R，et al.Effect of dietary fatty acids differing by chain lengths andωseries on the growth and lipid composition of turbot Scophthalmus maximus L.［J］.Comparative Biochemistry and Physiology Part B:Comparative Biochemistry，1979，64(4):345-350.

［23］ GATESOUPE F J，LEGER C，BOUDON M，et al.Lipid feeding of turbot(Scophthalmus maximus L.):influence on growth of supplementation with methyl esters of linolenic acid and fatty acid acids of w-9 series［J］.Annales d’Hydrobiologie，1977，8:247-254.

［24］ TAKEUCHI T，WATANABE T.Effect of excess amounts of essential fatty acids on growth of rainbow trout［J］.Bulletin of the Japanese Society of Scientific Fisheries，1979，45:1517-1519.

［25］ VARGA T，CZIMMERER Z，NAGY L.PPARs are a unique set of fatty acid regulated transcription factors controlling both lipid metabolism and inflammation［J］.Biochimica et Biophysica Acta:Molecular Basis of Disease，2011，1812(8):1007-1022.

［26］ YOSHIKAWA T，SHIMANO H，YAHAGI N，et al.Polyunsaturated fatty acids suppress sterol regulatory element-binding protein 1c promoter activity by inhibition of liver X receptor(LXR)binding to LXR response elements［J］.The Journal of Biological Chemistry，2002，277(3):1705-1711.

［27］ VALDIMARSSON G，JAMES D.World fisheriesutilisation of catches［J］.Ocean ＆ Coastal Management，2001，44(9/10):619-633.

［28］ TOCHER D R，CARR J，SARGENT J R.Polyunsaturated fatty acid metabolism in fish cells:differential metabolism of(n-3)and(n-6)series acids by cultured cells orginating from a freshwater teleost fish and from a marine teleost fish［J］.Comparative Biochemistry and Physiology Part B:Comparative Biochemistry，1989，94(2):367-374.

［29］ GHIONI C，TOCHER D R，BELL M V，et al.Low C18 to C20 fatty acid elongase activity and limited conversion of stearidonic acid，18∶4(n-3)，to eicosapentaenoic acid，20∶5(n-3)，in a cell line from the turbot，Scophthalmus maximus［J］.Biochimica et Biophysica Acta:Molecular and Cell Biology of Lipids，1999，1437(2):170-181.